本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，涉及egfr,her-2和dna多靶點抗腫瘤化合物及其制備方法，以及其在治療腫瘤中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：腫瘤的發(fā)生與發(fā)展是一個多因素作用、多基因參與的復(fù)雜的生物學(xué)過程，單一藥物單一靶點的治療方法往往存在著療效不佳、毒副作用大和容易出現(xiàn)耐藥性的問題。目前，臨床治療中經(jīng)常采用多種不同作用機制的藥物聯(lián)合治療，以克服上述的問題。根據(jù)這一臨床經(jīng)驗，科學(xué)家已經(jīng)設(shè)計并合成了許多具有多靶點作用機制的小分子藥物，藥理實驗證明，這種思路是可行的。egfr小分子抑制劑是近年來上市的抗腫瘤藥物，治療效果顯著，但是在臨床應(yīng)用中，由于此類藥物由于全部作用于atp結(jié)合位點，因而使用過程中會不斷產(chǎn)生變異，進而產(chǎn)生耐藥性，降低了藥物療效。而且，很多細胞同時表達egfr和her-2受體，使得egfr抑制劑的治療效果明顯降低。這就要求設(shè)計能同時作用于egfr和her-2，且對突變型受體有效的新型抑制劑。環(huán)磷酰胺是一種應(yīng)用多年的dna烷化劑類抗腫瘤藥物，但是嚴重的毒副作用限制了臨床上的應(yīng)用。雖然已經(jīng)有科學(xué)家將egfr小分子抑制劑和dna烷化劑結(jié)合起來設(shè)計了一系列的雙靶點藥物分子，但這類化合物的抗腫瘤活性一般。根據(jù)多靶點藥物設(shè)計的理念，以及本實驗組多年來有關(guān)環(huán)磷酰胺季銨鹽衍生物的研究基礎(chǔ)，將egfr/her-2抑制劑的母體結(jié)構(gòu)與磷酰氮芥通過合適的連接臂結(jié)合，設(shè)計并合成了一類emb-3的4-芳氨基喹唑啉磷酰胺氮芥類抑制劑，該化合物既有egfr/her-2受體抑制活性，又有dna烷化作用，且沒有發(fā)現(xiàn)明顯的毒副作用，但體內(nèi)試驗證明其代謝速度快，體內(nèi)半衰期短。為提高此類化合物的代謝穩(wěn)定性，我們根據(jù)骨架躍遷的原理設(shè)計并合成了一系列環(huán)狀結(jié)構(gòu)的egfr/her-2/dna損傷多靶點化合物，希望提高此類化合物在體內(nèi)的穩(wěn)定性，增加藥物抗腫瘤活性，降低藥物的劑量。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供了一種環(huán)狀結(jié)構(gòu)的egfr/her-2/dna損傷多靶點化合物，該化合物具有如化學(xué)式(i)所示的結(jié)構(gòu)：其中，r1選自氫、低級烷氧基；優(yōu)選自氫、甲氧基或乙氧基。r2選自取代或未取代的苯基，所述取代的苯基是指苯基被一個或多個鹵素、c1-c4炔基、低級烷基、低級烷氧基或芳基烷氧基取代；優(yōu)選自3-溴、3-氯-4-氟、3-乙炔基或3-氯-4-(3-氟芐氧基)、3-三氟甲基、3-芐氧基。r3選自氫、氰基；優(yōu)選自氫。a為o或者nh；在本發(fā)明中所定義的：所述“低級烷基”可以是c1-c6烷基或取代的烷基，例如，甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、環(huán)丁基等，當為取代的烷基時，取代基可以是例如鹵素或取代苯基等。所述“低級烷氧基”可以是c1-c6烷氧基或取代的烷氧基，例如，甲氧基、乙氧基、異丙氧基、正丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、異戊氧基、正己氧基、異己氧基等，當為取代的烷氧基時，取代基可以是例如鹵素或取代苯基等。所述“芳基烷氧基”可以是例如芐基氧基或低級取代的芐基氧基，所述低級取代基可以是設(shè)于苯環(huán)上的一個或多個鹵素、氨基或c1-c4烷基、c1-c4烷氧基等。所述“鹵素”為氯、氟或溴。本發(fā)明的化合物可包括，但不限于下面優(yōu)選的化合物，其結(jié)構(gòu)如下表所示：本發(fā)明還提供了化學(xué)式(i)所示的多靶點化合物的制備方法：其中，當a為o且r1為氫，r2、r3如前述化學(xué)式(i)所定義時的化合物的合成路線一如下所示：合成路線一：試劑條件及反應(yīng)：a)et3n，室溫反應(yīng).；b)hconh2，160℃；c)ac2o，100℃；d)socl2，回流；e)取代苯胺，i-proh，et3n，回流；f)nh3oh，ch3oh，室溫反應(yīng)；g)3，diad，pph3，ch2cl2.二氯磷酰氮芥與3-氨基-1，2-二羥基丙烷反應(yīng)得到2-(雙(2-氯乙基)氨基)-5-羥甲基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物。5-羥基-2-氨基苯甲酸與甲酰胺高溫合環(huán)得4，6-二羥基喹唑啉；然后將6-oh選擇性乙?；?，得到6-乙酰氧基-4-羥基喹唑啉，再與氯化亞砜反應(yīng)成為6-乙酰氧基-4-氯喹唑啉，不經(jīng)純化直接與取代苯胺反應(yīng)得到4-取代苯氨基-6-乙酰氧基喹唑啉，然后在氨水/甲醇體系中脫乙?；玫?-取代苯胺基-6-羥基喹唑啉；最后在三苯基膦、偶氮二甲酸二異丙酯條件下，與2-(雙(2-氯乙基)氨基)-5-羥甲基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物反應(yīng)得到部分式(i)所示的化合物。其中，當a為o且r1為甲氧基，r2、r3如前述化學(xué)式(i)所定義時的化合物的合成路線二如下所示：合成路線二：試劑及反應(yīng)條件：a)socl2，dmf(cat.)，回流；b)nh4oh，methanol，室溫反應(yīng)；c)3，pph3，dtad，dcm，室溫反應(yīng)；d)取代苯胺，dmf，90℃7-甲氧基-4-羥基喹唑啉-6-醇乙酸酯在氯化亞砜中回流得到7-甲氧基-4-氯喹唑啉-6-醇乙酸酯，不經(jīng)純化在氨水/甲醇體系中脫乙?；玫?-羥基-7-甲氧基-4-氯喹唑啉；然后在三苯基膦、偶氮二甲酸二叔丁基酯條件下，與2-(雙(2-氯乙基)氨基)-5-羥甲基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物反應(yīng)得到2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(4-氯-7-甲氧基)喹唑啉甲基醚-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物；最后與取代苯胺在dmf中加熱反應(yīng)得到部分式(i)所示的化合物。其中，當a為nh且r1為氫，r2、r3如前述化學(xué)式(i)所定義時的化合物的合成路線三如下所示：合成路線三：試劑及反應(yīng)條件：a)hconh2，160℃；b)socl2，dmf；c)ch3oh，nh4oh，取代苯胺，室溫反應(yīng)；d)(nh2ch2)2choh，cul，t-buona，dmf，回流；e)cl2pon(ch2ch2cl)2，et3n，i-proh，80℃2-氨基-5-碘苯甲酸加入過量甲酰胺后高溫下合環(huán)得到6-碘-4-羥基喹唑啉，再與氯化亞砜回流得到4-氯-6-碘喹唑啉，然后不經(jīng)純化直接與取代苯胺反應(yīng)得到6-碘-4-芳胺基喹唑啉中間體。然后在氬氣保護下，以dmf為溶劑，通過cui催化的ullmann反應(yīng)與2-羥基-1，3-二氨基丙烷反應(yīng)得到中間體1-氨基-3-((4-取代苯胺基喹唑啉)6-氨基)丙二醇，最后與磷酰二氯氮芥環(huán)合得到部分式(i)所示的化合物。本發(fā)明還提供了化學(xué)式(i)所示的多靶點化合物在抗腫瘤方面的應(yīng)用，研究顯示其具有顯著的抗腫瘤活性。具體實施方式下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。實施例1：制備2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(6-(4-(3-溴苯胺基)喹唑啉)氧)甲基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10a1)1、合成2-(雙(2-氯乙基)氨基)-5-羥甲基-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(3)3-胺基-1，2-丙二醇(5.54g，60.8mmo1)溶于100ml異丙醇中，加入二氯磷酰氮芥(15.7g，60.8mmol)和三乙胺(12.3g，121.6mmol)，室溫攪拌24小時。反應(yīng)結(jié)束后，抽濾，濾液蒸干后用乙酸乙酯和水萃取三次(150ml×3)，合并有機層后用飽和氯化鈉溶液洗三次，加無水硫酸鈉干燥后濃縮，閃柱分離(二氯甲烷:甲醇＝40:1)，得到9.08g乳白色固體，產(chǎn)率54％。mp:98℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ4.53(m,1h),3.84(d,1h),3.63(m,6h),3.44(m,6h),3.32(d,1h)13cnmr(101mhz,cdcl3)δ78.71,63.56,49.09,43.07,42.24.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ30.37.2、合成4,6-二羥基喹唑啉(5)將5-羥基-2-氨基苯甲酸(45.00g,150mmol)加到200ml甲酰胺中，150℃下反應(yīng)1h，產(chǎn)生大量固體。待冷卻后，加水抽濾，烘干，得淺咖啡色金屬光澤鱗片樣固體21.25g，產(chǎn)率86％。mp>300℃1hnmr(400mhz,dmso)δ12.02(s,1h),10.05(s,1h),7.90(s,1h),7.61–7.49(m,1h),7.42(s,1h),7.25(d,j＝7.8hz,1h).13cnmr(101mhz,dmso)δ161.04,156.58,142.66,142.37,129.29,124.12,109.19.3、合成4-羥基-6-乙酰氧基喹唑啉(6)將4,6-二羥基喹唑啉(23.50g,145mmol)和30ml吡啶加到220ml乙酸酐中，100℃下反應(yīng)2h。待冷卻后，倒入碎冰中，析出大量固體，抽濾，烘干，得淺棕色固體30.00g，產(chǎn)率84％。mp:130-132℃4、合成4-(3-溴苯氨基)-6-乙酰氧基喹唑啉(8)將化合物6-乙酰氧基-4-羥基喹唑啉(15.00g,60mmol)和dmf(10ml)加到80ml二氯亞砜中，回流應(yīng)5h。減壓蒸去氯化亞砜，再以乙酸乙酯(100ml×3)旋蒸帶走殘留的氯化亞砜，得到黃色固體。加入100ml異丙醇，3-溴苯胺(12.00g,70mmol)和三乙胺(9.00g,90mmol)，80℃下回流6h。冷卻，抽濾，依次以異丙醇、水和乙醚洗，烘干，得淡黃色固體，15.30g，產(chǎn)率71％。mp:238-239℃1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ2.40(s,3h),7.44-7.54(m,2h),7.78(d,j＝7.5hz,1h),7.93-8.09(m,3h),8.67(s,1h),8.99(s,1h),11.39(s,1h).5、合成4-(3-溴苯氨基)-6-羥基喹唑啉(9)將4-(3-溴苯氨基)-6-乙酰氧基喹唑啉(15.00g,40mmol)和濃氨水50ml加到150ml甲醇中，室溫反應(yīng)過夜。濃縮，加水抽濾，烘干，得黃褐色固體12.10g，產(chǎn)率95％。mp>300℃。1hnmr(400mhz,dmso)δ10.10(s,1h),9.58(s,1h),8.51(s,1h),8.27(s,1h),7.93(d,j＝7.7hz,1h),7.79(s,1h),7.70(d,j＝8.9hz,1h),7.45(d,j＝8.6hz,1h),7.33(t,j＝7.9hz,1h),7.26(d,j＝7.6hz,1h).6、合成2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(6-(4-(3-溴苯胺基)喹唑啉)氧)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10a1)2-(雙(2-氯乙基)氨基)-5-羥甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(1.00g，3.6mmol)與三苯基膦(1.04g，4mmol)混懸于6ml二氯甲烷中，0℃下攪拌。緩慢滴加diad，溶液呈淡黃色澄清，0℃下反應(yīng)1h。加入4-(3-溴苯氨基)-6-羥基喹唑啉(0.40g，1mmol)，反應(yīng)過夜，溶液由黃綠色渾濁變?yōu)樽厣吻?。反?yīng)結(jié)束后，體系加二氯甲烷和水萃取，無水硫酸鈉靜置后濃縮，閃柱(二氯甲烷:甲醇＝60:1)，得淡黃色泡沫狀固體372mg，產(chǎn)率18％。mp：84-87℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.57(s,1h),8.62(s,1h),8.15(s,1h),7.97(m,2h),7.67(m,2h),7.30(s,1h),7.20(s,2h),4.87(s,1h),4.66–4.50(m,1h),4.19(m,1h),3.85–3.54(m,6h),3.39(m,5h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ157.55,157.10,152.38,144.21,140.62,129.95,128.38,126.72,125.49,124.69,122.15,120.58,115.83,103.59,77.24,71.19,48.74(d,j＝5.0hz),43.74(d,j＝9hz),42.13.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ29.25.hrms(esi+)m/zcalcdforc21h24brcl2n5o3p(m+h)+574.01717,found574.01751.實施例2：制備2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(6-(4-(3’-氯-4’-(3”-氟芐氧基)苯氨基)喹唑啉)氧)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10a2)1、合成6-羥基-7-甲氧基-4-氯喹唑啉(13)將7-甲氧基-4-羥基喹唑啉-6-醇乙酸酯(4.68g,20mmol)和dmf(0.4ml)加到25ml二氯亞砜中，回流5小時。減壓蒸去氯化亞砜，再以氯仿(10ml×3)及甲苯(10ml×2)旋蒸帶走殘留的氯化亞砜，得到7-甲氧基-4-氯喹唑啉-6-醇乙酸酯。未經(jīng)純化，將其加入到濃氨水(35ml)的甲醇(70ml)溶液中，室溫攪拌3小時，抽濾，濾餅用乙醚洗得到6-羥基-7-甲氧基-4-氯喹唑啉，淡白色固體3.61g，產(chǎn)率84.6％。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.75(s,1h),8.79(s,1h),7.39(s,1h),7.37(s,1h),4.01(s,3h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ157.64,157.03,151.78,150.34,148.24,119.37,107.43,105.73,56.84.2、合成2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(6-(4-氯-7-甲氧基喹唑啉)氧)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(14)將6-羥基-7-甲氧基-4-氯喹唑啉(211mg,1.0mmol)，2-(雙(2-氯乙基)氨基)-5-羥甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(333mg,1.2mmol)，三苯基膦(341mg,1.3mmol)加入到無水二氯甲烷(15ml)中，氬氣保護。室溫攪拌下緩慢滴加dtad(300mg,1.3mmol)，數(shù)分鐘滴完后室溫攪拌12小時，反應(yīng)液直接拌樣，閃柱分離(二氯甲烷：乙酸乙酯＝1:1→二氯甲烷：乙酸乙酯：甲醇＝40:40:1)得白色固體397mg，產(chǎn)率84.5％。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.86(s,1h),7.42(s,2h),5.12(d,j＝16.0hz,1h),4.88(m,1h),4.33(d,j＝5.3hz,2h),4.02(s,3h),3.70(m,4h),3.51(m,1h),3.33(dd,j＝13.0,4.9hz,4h)13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ158.53,157.08,152.79,150.52,149.10,118.89,107.54,104.14,75.78,70.97,57.06,48.70,43.55,42.89.3、合成2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(6-(4-(3’-氯-4’-(3”-氟芐氧基)苯氨基)喹唑啉)氧)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10a2)將2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(4-氯-7-甲氧基)喹唑啉甲基醚-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(170mg,0.362mmol)，3-氯-4-(3-氟芐氧基)苯胺(109mg,0.434mmol)加入到dmf(5ml)中，100℃攪拌10小時，反應(yīng)結(jié)束后冷卻，加入乙酸乙酯(10ml)，抽濾，濾餅用大量乙酸乙酯洗滌。將濾液蒸干后直接拌樣，閃柱分離(二氯甲烷：乙酸乙酯＝1:1→二氯甲烷：乙酸乙酯：甲醇＝40:40:1)得黃色固體42mg，產(chǎn)率16.9％，mp:108-110℃1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.53(s,1h),8.46(s,1h),7.99(d,j＝2.5hz,1h),7.93(s,1h),7.74(d,j＝9.0hz,1h),7.47(dd,j＝12.0,4.3hz,1h),7.35–7.15(m,5h),5.24(s,3h),4.90(d,j＝5.8hz,1h),4.32(d,j＝44.4hz,2h),3.94(s,3h),3.68(d,j＝6.9hz,4h),3.55(d,j＝13.4hz,1h),3.37(s,1h),3.31(s,1h),3.25(s,1h),3.03(s,1h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ164.71,163.89,161.49,156.82,154.78,153.54,149.83,148.20,147.57,140.25,134.19,131.03,130.97,124.17,123.79,122.33,121.59,115.24,115.04,114.90,114.61,114.39,109.15,108.03,76.03,71.25,70.01,56.38,48.66,46.20,42.86.31pnmr(162mhz,dmso-d6)δ29.92.hrms:m/zcalcd.forc29h31cl3fn5o5p[m+h]+684.110693；found684.11057.實施例3：制備2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(6-(4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉)氧)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10a3)合成方法同化合物10a2。淡黃色固體，記作10a3，產(chǎn)率22.6％，mp:112-114℃1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.37(s,1h),8.64(s,1h),8.18(s,1h),8.12(d,j＝6.7hz,1h),7.96–7.85(m,1h),7.21(s,1h),7.10(t,j＝8.9hz,1h),4.97(dt,j＝17.1,8.7hz,1h),4.72(dd,j＝13.2,9.4hz,1h),4.32(dd,j＝13.3,2.4hz,1h),4.00(s,3h),3.73(dd,j＝17.2,8.7hz,1h),3.58(t,j＝6.5hz,4h),3.40(d,j＝43.0hz,5h),3.19(d,j＝15.9hz,1h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ157.00,154.85,153.79–153.59(m),152.91,148.52,136.60,123.26(d,j＝1.7hz),121.07(d,j＝4.1hz),120.43(d,j＝18.3hz),116.25,116.03,109.45,107.28,106.01(s),77.31,(d,j＝21.1hz),72.34,56.21,48.74(d,j＝5.1hz),43.32(d,j＝9.6hz),42.01.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ29.93.hrms:m/zcalcd.forc22h25cl3fn5o4p[m+h]+578.068829；found578.06898.實施例4：制備2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(6-(4-(3-溴苯氨基)喹唑啉)氧)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10a4)合成方法同化合物10a2。淡黃色固體，記作10a4，產(chǎn)率7.5％，mp:117-119℃1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.30(s,1h),8.63(s,1h),8.16(s,1h),8.11(s,1h),7.99(d,j＝7.4hz,1h),7.19(dd,j＝13.6,5.5hz,3h),4.91(s,1h),4.71–4.56(m,1h),4.25(d,j＝12.9hz,1h),3.95(s,3h),3.65(dd,j＝17.2,8.7hz,1h),3.60–3.51(m,4h),3.43(d,j＝12.3hz,4h),3.36(s,2h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ156.96,154.74,153.74,148.38,147.53,141.35,129.95,125.99,124.01,122.17,119.89,109.59,107.47,105.81,77.26,72.14,56.17,48.72(d,j＝5.1hz),43.38(d,j＝9.5hz),42.16.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ29.01.hrms:m/zcalcd.forc22h26brcl2n5o4p[m+h]+604.027735；found604.02691.實施例5：制備2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(6-(4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉)氧)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10a5)合成方法同化合物10a2。黃褐色固體，記作10a5，產(chǎn)率19.9％，mp:113-115℃1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.30(s,1h),8.64(s,1h),8.16(s,1h),8.06(d,j＝6.2hz,2h),7.30(t,j＝8.2hz,1h),7.19(d,j＝7.1hz,2h),4.93(dt,j＝16.2,8.0hz,1h),4.67(dd,j＝13.0,9.2hz,1h),4.26(d,j＝13.0hz,1h),3.97(s,3h),3.67(q,j＝8.8hz,1h),3.56(t,j＝5.8hz,4h),3.50–3.27(m,6h),3.06(s,1h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ157.08,154.60,154.00,148.30,147.75,140.00,128.74,126.91,124.69,122.27,122.06,109.67,107.65,105.83,83.89,77.32,76.90,72.24,56.19,48.75(d,j＝5.1hz),43.34(d,j＝9.5hz),42.24.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ28.87.hrms:m/zcalcd.forc24h27cl2n5o4p[m+h]+550.117223；found550.11609.實施例6：制備中間體6-碘-4-(鹵代苯氨基)喹唑啉(編號：17b-17g)；1、合成6-碘-4-(3-溴苯氨基)喹唑啉(17b)將6-碘-4-羥基喹唑啉(2.72g,10mmol)和dmf(0.2ml)加到24ml二氯亞砜中，回流5h。減壓蒸去氯化亞砜，再以乙酸乙酯(100ml×3)旋蒸帶走殘留的氯化亞砜，得到黃色固體4-氯-6-碘喹唑啉。加入20ml異丙醇，3-溴苯胺(2.06g,12mmol)和三乙胺(1.00g,10mmol)，80℃回流6h。冷卻，抽濾，濾液加乙醚繼續(xù)析出固體，得到的固體用大量水洗并再次抽濾，烘干，得淺黃色固體3.61g，產(chǎn)率84.6％，mp：197–199℃。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.90(s,1h),9.22(s,1h),8.84(s,1h),8.23(dd,j＝8.2,3.4hz,1h),8.13(s,1h),7.85(dd,j＝8.2,3.4hz,1h),7.64(d,j＝8.7hz,1h),7.40(t,j＝9.0hz,1h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ157.84,152.05,143.47,141.3,138.94,132.65,130.52,128.31,126.16,123.9,122.6,121.12,115.6,93.69.實施例7：制備6-碘-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(17c)合成方法同化合物17b。白色固體，記作17c，黃色固體，產(chǎn)率95.1％，mp:162–165℃。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.77(s,1h),9.15(s,1h),8.80(s,1h),8.22(d,j＝8.7hz,1h),8.15(dd,j＝6.7,2.3hz,1h),7.84(dd,j＝8.2,3.4hz,1h),7.64(d,j＝8.7hz,1h),7.49(t,j＝9.0hz,1h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ156.18,154.52,152.11,150.02,147.86,143.16,137.78(d,j＝2.9hz),129.2,124.3,123.24,122.17(d,j＝6.6hz),119.14(d,j＝18.3hz),117.01(d,j＝7.4hz),116.76,101.28.實施例8：制備6-碘-4-(3-乙炔苯氨基)喹唑啉(編號：17d)合成方法同化合物17b。淺黃色固體，記作17d，產(chǎn)率80.0％，mp:185-186℃。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.90(s,1h),9.01(s,1h),8.67(s,1h),8.24–8.02(m,2h),7.95(d,j＝8.0hz,1h),7.58(d,j＝8.7hz,1h),7.43(t,j＝7.9hz,1h),7.26(d,j＝7.5hz,1h),4.21(s,1h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ156.85,155.17,149.30,141.90,139.76,131.92,130.28,129.40,127.39,125.41,123.14,122.28,117.37,92.15,83.91,81.08.實施例9：制備6-碘-4-(3’-氯-4’-(3”-氟芐氧基)苯氨基)喹唑啉(編號：17e)合成方法同化合物17b。乳白色粉末，記作17e，產(chǎn)率93.0％，mp:221–224℃。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.84(s,1h),8.95(s,1h),8.62(s,1h),8.10(d,j＝8.6hz,1h),8.05(s,1h),7.77(d,j＝8.8hz,1h),7.56(d,j＝8.7hz,1h),7.48(dd,j＝13.9,7.8hz,1h),7.38–7.24(m,3h),7.19(t,j＝8.5hz,1h),5.26(s,2h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ163.65,161.23,156.53,155.03,149.98,148.97,141.52,139.87(d,j＝7.7hz),133.23,131.59,130.77(d,j＝8.0hz),130.01,124.16,123.53,122.30,121.30,117.05,114.92(d,j＝20.8hz),114.42(d,j＝13.6hz),114.14,91.74,69.63.實施例10：制備6-碘-4-(3-三氟甲苯氨基)喹唑啉(編號：17f)合成方法同化合物17b。淺灰色固體，記作17f，產(chǎn)率78.2％，mp:149-151℃。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.84(s,1h),9.42(s,1h),9.01(s,1h),8.39(dd,j＝8.7,1.6hz,1h),8.20(s,1h),8.13(d,j＝8.2hz,1h),7.80(d,j＝8.7hz,1h),7.78–7.64(m,2h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ158.50,151.46,144.14,139.23,137.70,132.98,129.98,129.53,129.21,128.13,125.27,122.73(d,j＝8.2hz),122.32,120.79(d,j＝9hz),115.39,94.23.實施例11：制備6-碘-4-(3’-芐氧基)苯氨基喹唑啉(編號：17g)合成方法同化合物17b。淺黃色固體，記作17g，產(chǎn)率89.7％，mp:175–176℃。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.02(s,1h),8.65(s,1h),8.20–8.04(m,1h),7.71(s,1h),7.58(d,j＝8.7hz,1h),7.53–7.39(m,5h),7.36(d,j＝7.2hz,1h),7.32(t,j＝8.1hz,1h),6.82(dd,j＝8.1,1.8hz,1h),5.14(s,2h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ158.89,156.77,155.21,149.34,141.84,140.47,137.51,131.85,130.21,129.70,128.91,128.30,128.14,117.44,115.03,110.48,109.38,92.02,69.74.實施例12：制備2-(雙(2-氯乙基))氨基-5-(6-(4-(3-溴苯氨基)喹唑啉)氨基)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10b)將6-碘-4-(3-溴苯胺)喹唑啉(5mmol，2.13g)，2-羥基-1,3-丙二胺(10mmol，0.92g)和叔丁醇鈉(5mmol，0.48g)與催化劑cui(4％，0.04g)加入干燥的三口瓶，氬氣保護，注入12mldmf。80℃恒溫回流反應(yīng)4h。過濾，加入50ml蒸餾水，濾液用乙酸乙酯萃取3次，每次50ml。合并濾液，無水na2so4干燥后濃縮。得到粗品黃棕色油狀液體，不經(jīng)分離直接用于下一步反應(yīng)。將上一步得到的黃棕色油狀液體粗品，三乙胺(0.36ml，5mmol)加入10ml異丙醇攪拌1min。再向體系中加入磷酰二氯氮芥(1.30g，5mmol)，室溫攪拌12h。加蒸餾水50ml，用乙酸乙酯萃取3次，每次50ml。合并濾液，干燥后，用硅膠柱層析(二氯甲烷：甲醇＝50∶1→20∶1)分離。得到亮黃色泡沫狀固體0.170g，兩步總產(chǎn)率11.8％，mp:85–87℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.57(s,1h),8.62(s,1h),8.15(s,1h),7.97(m,2h),7.67(m,2h),7.30(s,1h),7.20(s,2h),4.87(m,1h),457(m,1h),4.17(m,1h),3.41-3.59(m,6h),3.32-3.37(m,5h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ157.55,157.10,152.38,144.21,140.62,129.95,128.38,126.72,125.49,124.69,122.15,120.58,115.83,103.59,48.77,48.72,43.78,43.69,42.13.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ29.25.hrms(esi+)m/zcalcdforc21h25brcl2n6o2p(m+h)+573.03316,found573.03318.實施例13：制備2-(雙(2-氯乙基))氨基-5-(6-(4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉)氨基)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10c)合成方法同化合物10b。黃色泡沫狀固體，記作10c，產(chǎn)率8.67％，mp:112–117℃。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.88(s,1h),8.44(s,1h),8.24(dd,j＝6.8,2.5hz,1h),7.96(ddd,j＝8.9,4.2,2.8hz,1h),7.57(d,j＝9.0hz,1h),7.48(d,j＝2.0hz,1h),7.43(t,j＝9.1hz,1h),7.35(dd,j＝9.0,2.1hz,1h),6.65(t,j＝6.0hz,1h),4.67(dt,j＝8.7,6.1hz,1h),3.71–3.61(m,4h),3.55(dd,j＝14.0,7.0hz,2h),3.48–3.41(m,1h),3.38–3.29(m,4h),3.24(d,j＝10.9hz,2h).13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ156.07,154.34,149.13,147.75,141.06,136.85,127.28,124.30,123.21,122.12,118.76(d,j＝18.4hz),116.52,116.24(d,j＝12.1hz)，97.11,77.68,54.86,48.17,44.46(d,j＝9.4hz),42.28.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ29.21.hrms(esi+)m/zcalcdforc21h23cl3fn6o2p(m+h)+547.03316,found547.02883.實施例14：制備2-(雙(2-氯乙基))氨基-5-(6-(4-(3-乙炔苯氨基)喹唑啉)氨基)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10d)合成方法同化合物10b。淺黃色泡沫狀固體，記作10d，產(chǎn)率11.43％，mp:93–97℃。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.48(s,1h),8.51(s,1h),8.09(s,1h),7.99(d,j＝8.0hz,1h),7.58(s,2h),7.28(dd,j＝9.1,6.6hz,1h),7.19(d,j＝7.5hz,1h),7.05(d,j＝8.3hz,1h),4.85(s,1h),4.63–4.46(m,1h),3.63(d,j＝10.8hz,2h),3.51(dd,j＝14.5,7.9hz,5h),3.36(dd,j＝11.9,6.2hz,2h),3.30–3.15(m,4h),3.08(s,1h)13cnmr(101mhz,dmso-d6)δ157.08,150.69,146.89,142.58,139.77,130.94,128.77(d,j＝11.5hz),127.91,127.23,125.18,123.80,122.59,122.25,116.79,99.19,83.83,79.48,49.41,48.82,44.46(d,j＝9.5hz),42.26.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ29.34.hrms(esi+)m/zcalcdforc23h26cl2n6o2p(m+h)+519.12264,found519.12247實施例15：制備2-(雙(2-氯乙基))氨基-5-(6-(4-(3’-氯-4’-(3”-氟芐氧基)苯氨基)喹唑啉)氨基)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10e)合成方法同化合物10b。淺黃色泡沫狀固體。記作10e，產(chǎn)率14.9％，mp:125–130℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.29(s,1h),8.41(s,1h),7.93(d,j＝2.4hz,1h),7.71(dd,j＝8.9,2.4hz,1h),7.27–7.19(m,1h),7.14–7.08(m,2h),6.97–6.87(m,2h),6.81(d,j＝9.0hz,1h),4.99(s,2h),4.63(s,1h),4.57–4.41(m,1h),3.62–3.47(m,3h),3.43(t,j＝6.6hz,4h),3.34–3.07(m,6h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ164.18,161.73,157.04,151.09,150.05,146.74,143.05,139.31(d,j＝7.4hz),134.10,130.14(d,j＝8.1hz),128.24,123.85,122.99,122.54(d,j＝2.9hz),121.46,116.76,114.80(d,j＝21.1hz),114.47,113.98(d,j＝22.2hz),99.28,79.50,70.46,62.50,49.54,48.80(d,j＝4.9hz),44.41,42.14,30.11.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ29.66.hrms(esi+)m/zcalcdforc28h30cl3n6o3p(m+h)+653.11611,found653.11449.實施例16：制備2-雙(2-氯乙基)氨基-5-(6-(4-(3’-三氟甲苯氨基)喹唑啉)氨基)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10f)合成方法同化合物10b。淺黃色泡沫狀固體。記作10f，產(chǎn)率14.9％，mp:95–97℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.42(s,1h),8.50(s,1h),7.74(s,1h),7.54(s,2h),7.50–7.37(m,4h),7.37–7.26(m,4h),7.24–7.19(m,1h),6.99(d,j＝7.0hz,1h),6.69(d,j＝7.3hz,1h),5.02(s,2h),4.76(s,1h),4.43(s,1h),3.76(d,j＝14.0hz,1h),3.52(s,2h),3.44(s,4h),3.30(s,4h),3.22(d,j＝14.6hz,2h),3.15–2.99(m,3h).13cnmr(101mhz,cdcl3)δ148.4,128.99,125.66,124.97,120.38,119.01,98.86,79.45,48.94,48.81(d,j＝5.0hz),44.71(d,j＝9.6hz),42.07.hrms(esi+)m/zcalcdforc22h25cl2n6o2p(m+h)+563.11611,found563.11449.實施例17：制備2-(雙(2-氯乙基))氨基-5-(6-(4-(3’-芐氧基)苯氨基喹唑啉)氨基)甲基-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)戊烷-2-氧化物(編號：10g)合成方法同化合物10b。淺黃色泡沫狀固體。記作10g，產(chǎn)率15.9％，mp：89–92℃。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.42(s,1h),8.50(s,1h),7.74(s,4h),7.54(s,5h),7.50–7.37(m,4h),7.31(m,4h),7.24–7.18(m,1h),6.99(d,j＝7.0hz,1h),6.69(d,j＝7.3hz,1h),5.02(s,2h),4.76(s,1h),4.43(s,1h),3.76(d,j＝14.0hz,1h),3.52(s,2h),3.44(s,4h),3.30(s,4h),3.22(d,j＝14.6hz,2h),3.18–2.98(m,3h)13cnmr(101mhz,cdcl3)δ161.56,158.07,155.99,152.61,149.51,145.47,138.99,135.79,128.50,127.52,126.98,126.59,122.38,115.54(d,j＝4.4hz),114.27,109.41,108.65,98.14,69.04,47.34,41.12,35.48,28.67.31pnmr(162mhz,cdcl3)δ28.87hrms(esi+)m/zcalcdforc28h32cl2n6o3p(m+h)+601.16451,found601.16485.實施例18：本發(fā)明化合物的抗腫瘤活性測試實驗例1：對skbr-3、mda-mb-468、calu-3和h522細胞增殖的影響體外培養(yǎng)人乳腺癌細胞skbr-3、mda-mb-468和肺癌細胞h522、calu-3，細胞生長至對數(shù)生長期后，收集細胞，1000rpm離心5min，棄上清，適量培養(yǎng)基懸浮，調(diào)整細胞濃度至3.5～4.5×104/ml。將細胞懸液接種到96孔細胞培養(yǎng)板中，每孔100μl，放置細胞培養(yǎng)箱(37℃，5％co2)中培養(yǎng)24h后，用藥組每孔加入細胞培養(yǎng)基稀釋的藥100μl，每種藥物設(shè)三個復(fù)孔，陰性對照組為含0.5％dmso培養(yǎng)基。培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h后，每孔加入5mg/ml的mtt20μl，置37℃放置3h。每孔加入150μldmso，于37℃搖床振蕩5min，于492nm檢測吸光度(od)。運用prismgraphpad5.0統(tǒng)計軟件計算ic50值?；瘜W(xué)式(i)所示的部分化合物對上述四個腫瘤細胞株具有良好的抗腫瘤活性，其ic50值結(jié)果見表1：表1.化合物對四個腫瘤細胞株的ic50值(單位：μm)實驗例2：對egfr及her-2受體結(jié)合實驗為證實該類化合物對efgr及her-2受體具有抑制作用，選擇化學(xué)式(i)所示的部分化合物為探針，進行了受體結(jié)合實驗。如表2所示：表2.化合物對egfr及her-2的ic50值(單位：nm)kinase10a210a310a410a510eemb-3staurosporineegfr4.610.260.270.2418.387.433.00her-20.9429.4911.82111.952.358244.42實施例19：本發(fā)明化合物的體內(nèi)代謝穩(wěn)定性測試化合物10b和10e在sd大鼠體內(nèi)藥物代謝情況如表3所示：表3化合物cjb-11和cjb-41的sd大鼠體內(nèi)藥物代謝情況試驗化合物給藥方式t1/2(hr)auclast(hr*ng/ml)aucinf(hr*ng/ml)cl(ml/min/kg)10biv1.17±0.06761±91765±9222.0±2.710eiv1.49±0.02959±177969±17717.6±3.6emb-3iv0.52±0.023659±84661±8575.7±8.5在將emb-3的連接臂改造為環(huán)狀結(jié)構(gòu)并保持了連接臂中3個碳原子的碳鏈長度后，化合物10b和10e的半衰期分別達到了1.17小時和1.49小時，分別是emb-3半衰期的2.25倍和2.87倍，證明其代謝穩(wěn)定性有了顯著提高。當前第1頁12