本發(fā)明涉及基因測(cè)序技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種基因測(cè)序芯片、基因測(cè)序系統(tǒng)及其測(cè)序方法。
背景技術(shù):
基因測(cè)序技術(shù)是現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中最常用的技術(shù),從1977第一代基因測(cè)序發(fā)展至今,基因測(cè)序技術(shù)取得了相當(dāng)大的發(fā)展。其中,基因測(cè)序技術(shù)的發(fā)展過(guò)程包括:第一代sanger測(cè)序技術(shù),第二代高通量測(cè)序技術(shù),第三代單分子測(cè)序技術(shù),第四代納米孔測(cè)序技術(shù);目前市場(chǎng)主流的測(cè)序技術(shù)仍以第二代高通量測(cè)序?yàn)橹鳌?/p>
第二代高通量測(cè)序技術(shù)主要包括:illumina的邊合成邊測(cè)序技術(shù),thermofisher的離子半導(dǎo)體測(cè)序技術(shù)、連接法測(cè)序技術(shù)和roche的焦磷酸測(cè)序技術(shù);其中,illumina的邊合成邊測(cè)序法和thermofisher的連接法測(cè)序都需要進(jìn)行熒光標(biāo)記,還需要有激光光源和光學(xué)系統(tǒng),這樣使得測(cè)序變的復(fù)雜,增加了測(cè)序時(shí)間和成本。而roche的焦磷酸測(cè)序不需要激光光源和光學(xué)系統(tǒng),但是也需要進(jìn)行熒光標(biāo)記;而離子半導(dǎo)體測(cè)序法采用的測(cè)序裝置需要采用半導(dǎo)體制作工藝制作一個(gè)離子傳感器和兩個(gè)場(chǎng)效應(yīng)晶體管,其制作工藝復(fù)雜,制作過(guò)程較困難。
因此,如何簡(jiǎn)化基因測(cè)序的過(guò)程,從而降低基因測(cè)序的時(shí)間和成本,是本領(lǐng)域技術(shù)人員亟待解決的技術(shù)問(wèn)題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明實(shí)施例提供了一種基因測(cè)序芯片、基因測(cè)序系統(tǒng)及其測(cè)序方法,用以簡(jiǎn)化基因測(cè)序的過(guò)程,從而降低基因測(cè)序的時(shí)間和成本,。
本發(fā)明實(shí)施例提供了一種基因測(cè)序芯片,包括:相對(duì)設(shè)置的上基板和下基板、透明電極層和位于所述下基板與所述上基板之間的切換層;其中,
所述切換層用于在電場(chǎng)的作用下完成反射態(tài)與透射態(tài)之間的切換;
所述透明電極層位于所述下基板;
所述上基板背離所述下基板的一面具有相互隔離的多個(gè)微孔,所述微孔底部具有離子敏感膜。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,所述切換層為雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶層,所述基因測(cè)序芯片還包括:第一取向膜和第二取向膜;其中,
所述第一取向膜位于所述下基板面向所述上基板的一面;
所述第二取向膜位于所述上基板面向所述下基板的一面。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,所述雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶層用于在電場(chǎng)作用下由反射態(tài)切換到透射態(tài);其中,所述反射態(tài)為平面態(tài),所述透射態(tài)為焦錐態(tài)。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,所述切換層為電致變色層。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,多個(gè)所述微孔在所述上基板背離所述下基板的一面呈矩陣排列。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,還包括:黑色基底層;
所述黑色基底層位于所述下基板背離所述上基板的一面。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,所述離子敏感膜的材料為四氮化三硅。
本發(fā)明實(shí)施例提供了一種基因測(cè)序系統(tǒng),包括:本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片以及感光傳感器;其中,
所述感光傳感器用于獲取基因測(cè)序過(guò)程中所述切換層反射的光信息或所述切換層透射狀態(tài)下所述下基板的基底反射的光信息。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序系統(tǒng)中,所述感光傳感器為照相機(jī)。
本發(fā)明實(shí)施例提供了一種本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序系統(tǒng)的測(cè)序方法,包括:
將擴(kuò)增富集有多個(gè)樣本基因的磁珠加入到所述基因測(cè)序芯片的微孔中;
向所述微孔中依次加入四種可逆終止核苷酸;
待加入所述可逆終止核苷酸后,對(duì)所述基因測(cè)序芯片的透明電極層施加電壓信號(hào),并采用所述感光傳感器依次獲取加入所述可逆終止核苷酸后所述切換層反射或透射的光信息;
根據(jù)獲取到所述切換層透射的光信息對(duì)應(yīng)的所述可逆終止核苷酸確定所述樣本基因的序列。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序方法中,根據(jù)獲取到的所述切換層透射的光信息對(duì)應(yīng)的所述可逆終止核苷酸確定所述樣本基因的序列,具體包括:
在獲取到所述切換層透射的光信息時(shí),確定加入的所述可逆終止核苷酸的類(lèi)型;
根據(jù)確定的所述可逆終止核苷酸的類(lèi)型確定所述樣本基因的序列。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序方法中,還包括:
在每確定所述樣本基因序列中的一個(gè)堿基類(lèi)型后,清洗掉加入所述微孔中的所述可逆終止核苷酸,并向所述微孔中加入疏基試劑。
在一種可能的實(shí)施方式中,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序方法中,還包括:
在每確定所述樣本基因序列中的一個(gè)堿基類(lèi)型后,停止對(duì)所述透明電極層施加電壓信號(hào)。
本發(fā)明實(shí)施例的有益效果包括:
本發(fā)明實(shí)施例提供了一種基因測(cè)序芯片、基因測(cè)序系統(tǒng)及其測(cè)序方法,該基因測(cè)序芯片包括:相對(duì)設(shè)置的上基板和下基板、透明電極層和位于下基板與上基板之間的切換層;其中,切換層用于在電場(chǎng)的作用下完成反射態(tài)與透射態(tài)之間的切換;透明電極層位于下基板;上基板背離下基板的一面具有相互隔離的多個(gè)微孔,微孔底部具有離子敏感膜。這樣在微孔中使得樣本基因與可逆終止核苷酸進(jìn)行配對(duì)釋放氫離子,在離子敏感膜表面感應(yīng)出能斯特電位,進(jìn)而利用透明電極層形成電場(chǎng)控制切換層切換到透射態(tài),再根據(jù)獲取到切換層透射態(tài)下的光信息時(shí)對(duì)應(yīng)的可逆終止核苷酸的類(lèi)型確定基因的堿基類(lèi)型,從而實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序。該基因測(cè)序芯片的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單制作成本低,用于配對(duì)測(cè)序的可逆終止核苷酸無(wú)需進(jìn)行熒光標(biāo)記,也不需要背光光源、激光光源等光學(xué)系統(tǒng),僅通過(guò)自然光反射原理就可以實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序,該測(cè)序方法簡(jiǎn)單易行,大大降低了基因測(cè)序的成本和時(shí)間。
附圖說(shuō)明
圖1為本發(fā)明實(shí)施例提供的基因測(cè)序芯片的結(jié)構(gòu)示意圖;
圖2a-圖2c分別為本發(fā)明實(shí)施例提供的雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶的偏轉(zhuǎn)狀態(tài)示意圖;
圖3為本發(fā)明實(shí)施例提供的雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶的電壓驅(qū)動(dòng)狀態(tài)轉(zhuǎn)換示意圖;
圖4為本發(fā)明實(shí)施例提供的基因測(cè)序方法流程圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合附圖,對(duì)本發(fā)明實(shí)施例提供的基因測(cè)序芯片、基因測(cè)序系統(tǒng)及其測(cè)序方法的具體實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)的說(shuō)明。
本發(fā)明實(shí)施例提供了一種基因測(cè)序芯片,如圖1所示,可以包括:相對(duì)設(shè)置的上基板01和下基板02、透明電極層04和位于下基板02與上基板01之間的切換層03;其中,
切換層03用于在電場(chǎng)的作用下完成反射態(tài)與透射態(tài)之間的切換;透明電極層04位于下基板02;如圖1所示,以透明電極層04位于下基板02面向上基板01的一面為例,在具體實(shí)施時(shí),透明電極層也可以位于下基板背離上基板的一面;
上基板01背離下基板02的一面具有相互隔離的多個(gè)微孔07,微孔07底部具有離子敏感膜08。
本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,將樣本基因與可逆終止核苷酸加入到微孔之后,在微孔中樣本基因與可逆終止核苷酸進(jìn)行配對(duì),釋放出氫離子,這樣就會(huì)在離子敏感膜表面感應(yīng)出能斯特電位,其中離子敏感膜的材料可以為四氮化三硅;進(jìn)而通過(guò)對(duì)下基板上的透明電極層施加電壓形成電場(chǎng)控制切換層切換到透射態(tài),再根據(jù)獲取到切換層透射態(tài)下的光信息時(shí)對(duì)應(yīng)的可逆終止核苷酸的類(lèi)型確定基因的堿基類(lèi)型,從而實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序。該基因測(cè)序芯片的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單制作成本低,用于配對(duì)測(cè)序的可逆終止核苷酸無(wú)需進(jìn)行熒光標(biāo)記,也不需要背光光源、激光光源等光學(xué)系統(tǒng),僅通過(guò)自然光反射原理就可以實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序,該測(cè)序方法簡(jiǎn)單易行,大大降低了基因測(cè)序的成本和時(shí)間。
在具體實(shí)施時(shí),本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,多個(gè)微孔在上基板背離下基板的一面可以呈矩陣排列,也可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行相應(yīng)的排列調(diào)整,在此不做限定。另外,微孔的孔徑一般設(shè)置在1~30微米。
在具體實(shí)施時(shí),本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,如圖1所示,切換層03為雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶層,基因測(cè)序芯片還可以包括:第一取向膜05和第二取向膜06;其中,第一取向膜05位于下基板02面向上基板01的一面;第二取向膜06位于上基板01面向下基板02的一面。液晶層可以在電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn),進(jìn)而實(shí)現(xiàn)反射態(tài)和透射態(tài)的切換,其中液晶層的液晶可以為雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶。具體地,雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶層用于在電場(chǎng)作用下由反射態(tài)切換到透射態(tài);其中,反射態(tài)為平面態(tài),透射態(tài)為焦錐態(tài)。雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶有三個(gè)狀態(tài),如圖2a-圖2c所示,分別是:
1.平面態(tài)(p態(tài)-planar):如圖2a所示,液晶分子圍繞垂直于基板表面的螺旋軸在空間呈現(xiàn)螺旋形排列,當(dāng)光線入射到液晶表面時(shí),液晶分子對(duì)特定波長(zhǎng)λ的光線選擇性反射:λ=np;其中,λ為中心反射波長(zhǎng),p為液晶材料的螺距,n為平均折射率(ne+no)/2。因此反射波長(zhǎng)λ由螺距p來(lái)控制;
2.焦錐態(tài)(fc態(tài)-focalconic):如圖2b所示,液晶分子仍然呈螺旋排列,但液晶疇的螺旋軸的方向隨機(jī)分布,分子呈多疇?wèi)B(tài),入射光在相鄰的液晶疇交界處由于折射率的突變而發(fā)生散射,此時(shí)基板反射散亂光,進(jìn)而顯示基板的顏色(若基板為黑色,則形成暗態(tài));
3.垂直態(tài)(h態(tài)-homeotropic):如圖2c所示,液晶分子螺旋織構(gòu)被解螺旋,呈現(xiàn)一種向列相垂面排列,液晶層是一個(gè)折射率均勻的介質(zhì),故呈透射態(tài),液晶盒呈現(xiàn)透明態(tài)。
如圖3所示,為雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶的驅(qū)動(dòng)方式,若膽甾相液晶初始在p態(tài),當(dāng)電壓由零增大到閾值電壓后,它將發(fā)生p態(tài)→fc態(tài)的轉(zhuǎn)變,如果從這個(gè)電壓降到零,則為穩(wěn)態(tài);從上述fc態(tài),進(jìn)一步增大外加電場(chǎng)到飽和電壓,fc態(tài)→h態(tài)轉(zhuǎn)變,h態(tài)不是穩(wěn)態(tài)。如果把電壓快速降到零,液晶弛豫到p態(tài),即暗態(tài)→亮態(tài)轉(zhuǎn)變;如果電壓緩慢降到零,液晶分子會(huì)回到fc態(tài)。p態(tài)的反射態(tài)和fc態(tài)的散射態(tài)是零場(chǎng)穩(wěn)定狀態(tài),通過(guò)變換外電場(chǎng)可以實(shí)現(xiàn)兩種狀態(tài)的轉(zhuǎn)換,即實(shí)現(xiàn)亮態(tài)(反射態(tài))和暗態(tài)(透射態(tài))的轉(zhuǎn)換。本發(fā)明的基因測(cè)序芯片可以基于上述雙穩(wěn)態(tài)膽甾相液晶的驅(qū)動(dòng)原理,通過(guò)獲取雙穩(wěn)態(tài)液晶在不同穩(wěn)定態(tài)之間轉(zhuǎn)換顯示不同顏色光信息,來(lái)實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序。
在具體實(shí)施時(shí),本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,切換層也可以為電致變色層。具體地,切換層也可以通過(guò)電致變色層來(lái)實(shí)現(xiàn),電致變色層可以在電場(chǎng)所用下切換到透明狀態(tài)。因此,在進(jìn)行基因測(cè)序時(shí),若樣本基因與可逆終止核苷酸配對(duì)釋放出氫離子,這樣就會(huì)在離子敏感膜表面感應(yīng)出能斯特電位;進(jìn)而通過(guò)對(duì)下基板上的透明電極層施加電壓形成電場(chǎng)控制電致變色層切換到透明態(tài),再根據(jù)獲取到透明態(tài)下的光信息時(shí)對(duì)應(yīng)的可逆終止核苷酸的類(lèi)型確定基因的堿基類(lèi)型,從而實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序。
在具體實(shí)施時(shí),本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,如圖1所示,還可以包括:黑色基底層09;黑色基底層09位于下基板02背離上基板01的一面。具體地,為了便于獲取液晶層透射狀態(tài)下的光信息,可以在下基板背離上基板的一面設(shè)置一層黑色基底層。在基因測(cè)序過(guò)程中,當(dāng)樣本基因與可逆終止核苷酸發(fā)生配對(duì)合成后,在離子敏感膜上感應(yīng)出電位,并與透明電極層形成電場(chǎng)使得液晶發(fā)生偏轉(zhuǎn)形成透射態(tài),自然光經(jīng)過(guò)下基板基底的反射直接透過(guò)液晶層,因此將下基板基底的顏色設(shè)置為黑色比較容易識(shí)別反射的光,當(dāng)然也可以設(shè)置其他滿足要求的基底顏色,在此不做限定。
在具體實(shí)施時(shí),本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片中,用于與樣本基因進(jìn)行配對(duì)測(cè)序的可逆終止核苷酸包括四種不同類(lèi)型的可逆終止核苷酸。具體地,可逆終止核苷酸,與普通的核苷酸不同,可逆終止核苷酸的3′端連接一個(gè)疊氮基團(tuán),在dna合成過(guò)程中不能形成磷酸二酯鍵,因而會(huì)中斷dna的合成。如果可逆終止核苷酸與微孔中的樣本基因互補(bǔ)配對(duì),則該可逆終止核苷酸被合成到樣本基因分子中,并且釋放氫離子,這樣就會(huì)在離子敏感膜表面感應(yīng)出能斯特nernst電位。通過(guò)給下基板的透明電極層施加電壓信號(hào),雙穩(wěn)態(tài)液晶則從平面態(tài)轉(zhuǎn)換為焦錐態(tài),液晶盒將反射黑色基底。
基于同一發(fā)明構(gòu)思,本發(fā)明實(shí)施例提供了一種基因測(cè)序系統(tǒng),包括:本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序芯片以及感光傳感器;其中,感光傳感器用于獲取基因測(cè)序過(guò)程中切換層反射的光信息或切換層透射狀態(tài)下下基板的基底反射的光信息。具體地,本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序系統(tǒng)在基因測(cè)序過(guò)程中,可以采用照相機(jī)作為感光傳感器,獲取切換層反射或透射的光信息,以實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序。由于該基因測(cè)序系統(tǒng)解決問(wèn)題的原理與基因測(cè)序芯片相似,因此該基因測(cè)序系統(tǒng)的實(shí)施可以參見(jiàn)上述基因測(cè)序芯片的實(shí)施,重復(fù)之處不再贅述。
基于同一發(fā)明構(gòu)思,本發(fā)明實(shí)施例提供了一種本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序系統(tǒng)的測(cè)序方法,如圖4所示,可以包括:
s101、將擴(kuò)增富集有多個(gè)樣本基因的磁珠加入到基因測(cè)序芯片的微孔中;
s102、向微孔中依次加入四種可逆終止核苷酸;
s103、待加入可逆終止核苷酸后,對(duì)基因測(cè)序芯片的透明電極層施加電壓信號(hào),并采用感光傳感器依次獲取加入可逆終止核苷酸后切換層反射或透射的光信息;
s104、根據(jù)獲取到切換層透射的光信息時(shí)對(duì)應(yīng)的可逆終止核苷酸確定樣本基因的序列。
本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序方法中,將樣本基因與可逆終止核苷酸加入到微孔之后,在微孔中樣本基因與可逆終止核苷酸進(jìn)行配對(duì),釋放出氫離子,這樣就會(huì)在離子敏感膜表面感應(yīng)出能斯特電位,進(jìn)而通過(guò)對(duì)下基板上的透明電極層施加電壓形成電場(chǎng),從而控制切換層切換到透射態(tài),再根據(jù)獲取到切換層透射態(tài)下的光信息時(shí)對(duì)應(yīng)的可逆終止核苷酸的類(lèi)型確定基因的堿基類(lèi)型,從而實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序。該基因測(cè)序中用于配對(duì)測(cè)序的可逆終止核苷酸無(wú)需進(jìn)行熒光標(biāo)記,也不需要背光光源、激光光源等光學(xué)系統(tǒng),僅通過(guò)自然光反射原理就可以實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序,該測(cè)序方法簡(jiǎn)單易行,大大降低了基因測(cè)序的成本和時(shí)間。
在具體實(shí)施時(shí),本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序方法中,步驟s104可以具體包括:在獲取到切換層透射的光信息時(shí),確定加入的可逆終止核苷酸的類(lèi)型;根據(jù)確定的可逆終止核苷酸的類(lèi)型確定樣本基因的序列。具體地,待加入一種可逆終止核苷酸后,通過(guò)獲取的切換層反射或透射的光信息,則可以確定該可逆終止核苷酸是否與樣本基因配對(duì),即當(dāng)液晶層透射下基板基底反射的光信息時(shí),則確定該可逆終止核苷酸與樣本基因配對(duì),否則該可逆終止核苷酸沒(méi)有與樣本基因配對(duì)(此時(shí)切換層反射出其他特定波長(zhǎng)的光),從而實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序。
在具體實(shí)施時(shí),本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序方法中,還可以包括:在每確定樣本基因序列中的一個(gè)堿基類(lèi)型后,清洗掉加入微孔中的可逆終止核苷酸,并向微孔中加入疏基試劑。具體地,在獲取每條模板序列一個(gè)堿基位置反應(yīng)所聚合上去的核苷酸種類(lèi)之后,加入疏基試劑將可逆終止核苷酸的基團(tuán)進(jìn)行化學(xué)切割,使得疊氮基團(tuán)斷裂,從而恢復(fù)了3'羥基末端的粘性,即在原來(lái)位置形成一個(gè)羥基,可繼續(xù)聚合第二個(gè)核苷酸以進(jìn)行后續(xù)位置的堿基類(lèi)型檢測(cè)。
在具體實(shí)施時(shí),本發(fā)明實(shí)施例提供的上述基因測(cè)序方法中,還可以包括:在每確定樣本基因序列中的一個(gè)堿基類(lèi)型后,停止對(duì)透明電極層施加電壓信號(hào)。這樣可以保證切換層及時(shí)恢復(fù)到反射態(tài),避免切換層由于電場(chǎng)的存在無(wú)法恢復(fù)到反射態(tài)而影響下一個(gè)堿基類(lèi)型的確定。
本發(fā)明實(shí)施例提供了一種基因測(cè)序芯片、基因測(cè)序系統(tǒng)及其測(cè)序方法,該基因測(cè)序芯片包括:相對(duì)設(shè)置的上基板和下基板、透明電極層和位于下基板與上基板之間的切換層;其中,切換層用于在電場(chǎng)的作用下完成反射態(tài)與透射態(tài)之間的切換;透明電極層位于下基板;上基板背離下基板的一面具有相互隔離的多個(gè)微孔,微孔底部具有離子敏感膜。這樣在微孔中使得樣本基因與可逆終止核苷酸進(jìn)行配對(duì)釋放氫離子,在離子敏感膜表面感應(yīng)出能斯特電位,進(jìn)而利用透明電極層形成電場(chǎng)控制切換層切換到透射態(tài),再根據(jù)獲取到切換層透射態(tài)下的光信息時(shí)對(duì)應(yīng)的可逆終止核苷酸的類(lèi)型確定基因的堿基類(lèi)型,從而實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序。該基因測(cè)序芯片的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單制作成本低,用于配對(duì)測(cè)序的可逆終止核苷酸無(wú)需進(jìn)行熒光標(biāo)記,也不需要背光光源、激光光源等光學(xué)系統(tǒng),僅通過(guò)自然光反射原理就可以實(shí)現(xiàn)基因測(cè)序,該測(cè)序方法簡(jiǎn)單易行,大大降低了基因測(cè)序的成本和時(shí)間。
顯然,本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種改動(dòng)和變型而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。這樣,倘若本發(fā)明的這些修改和變型屬于本發(fā)明權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi),則本發(fā)明也意圖包含這些改動(dòng)和變型在內(nèi)。