本公開(kāi)涉及有機(jī)污染生物修復(fù)技術(shù)領(lǐng)域,具體地,涉及一種微生物菌劑及其用于治理土壤有機(jī)污染的微生物植物協(xié)同修復(fù)方法。
背景技術(shù):
當(dāng)今世界,石油已經(jīng)成為人類(lèi)最主要的能源之一,大量的石油及其加工品進(jìn)入土壤造成土壤的石油污染,給人類(lèi)乃至整個(gè)生物圈帶來(lái)危害,從而成為世界性的環(huán)境問(wèn)題。在對(duì)石油污染的研究中,生物修復(fù)作為一種潛在的高效、低成本的清潔技術(shù)正日益受到重視。生物修復(fù)(bioremediation)是指通過(guò)生物(特別是微生物)催化降解有機(jī)污染物,從而修復(fù)被污染的環(huán)境或消除環(huán)境中的污染物的受控或自發(fā)進(jìn)行的過(guò)程。
中國(guó)自1975年起,先后對(duì)青島膠州灣、渤海、廈門(mén)港、黃海和東海石油降解微生物的數(shù)量、分布、種類(lèi)組成和影響降解因素等進(jìn)行了調(diào)查研究。在影響微生物對(duì)石油烴的降解的主要因素中,微生物的生理特性是決定降解石油烴能力的關(guān)鍵因素之一。目前已經(jīng)分離得到的微生物菌株對(duì)環(huán)境條件的適應(yīng)能力還較低,在環(huán)境中的石油烴降解效率不高,因此,迫切需要開(kāi)發(fā)出一種能夠高效降解石油烴的微生物菌劑及土壤有機(jī)污染的生物協(xié)同修復(fù)方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本公開(kāi)的目的在于提供一種對(duì)石油烴的降解能力強(qiáng)的微生物菌劑和土壤有機(jī)污染的生物協(xié)同修復(fù)方法,其可以有效處理石油污染。
本公開(kāi)提供了一種微生物菌劑,所述微生物菌劑含有有效量的活性成分,所述活性成分包含保藏編號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)、保藏號(hào)為cgmccno.4794的友好戈登氏菌(gordoniaamicalis)、保藏號(hào)為cgmccno.4796的食烷烴戈登氏菌(gordoniaalkanivorans)和保藏號(hào)為cgmccno.4797的日本假黃單胞菌(pseudoxanthomonasjaponensis)。
本公開(kāi)還提供了如上所述的微生物菌劑在治理有機(jī)污染中的應(yīng)用。
本公開(kāi)還提供了如上所述的微生物菌劑在促進(jìn)植物生長(zhǎng)中的應(yīng)用。
本公開(kāi)還提供了一種治理石油污染的方法,該方法包括使用石油污染的土壤或水體種植植物,同時(shí)施用如上所述的微生物菌劑。
本公開(kāi)還提供了一種短小芽孢桿菌,所述短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)的保藏編號(hào)為cgmccno.13208。
通過(guò)上述技術(shù)方案,本公開(kāi)提供的微生物菌劑之間、以及微生物與植物之間的協(xié)同作用有助于高效降解石油烴類(lèi)有機(jī)碳大分子,并且所述微生物菌劑能分泌生長(zhǎng)激素促進(jìn)植物的發(fā)芽和生長(zhǎng),同時(shí)使用上述微生物菌劑可以抑制植物細(xì)菌性病害的發(fā)生;將所述微生物菌劑和植物同時(shí)應(yīng)用于治理石油污染可以相互促進(jìn)生長(zhǎng),更有利于高效分解石油烴,治理石油污染。
本公開(kāi)的其他特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的具體實(shí)施方式部分予以詳細(xì)說(shuō)明。
生物材料保藏
本公開(kāi)中短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)是本公開(kāi)的發(fā)明人從石油污染土壤中分離得到的純培養(yǎng)物,其保藏編號(hào)為cgmccno.13208,保藏日期為2016年10月27日,保藏單位為中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào),分類(lèi)命名為短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)。其中,保藏號(hào)為cgmccno.4794的友好戈登氏菌(gordoniaamicalis)、保藏號(hào)為cgmccno.4796的食烷烴戈登氏菌(gordoniaalkanivorans)和保藏號(hào)為cgmccno.4797的日本假黃單胞菌(pseudoxanthomonasjaponensis)的生物保藏信息已經(jīng)在公開(kāi)號(hào)為cn102250770a的專(zhuān)利文獻(xiàn)中公開(kāi)。
具體實(shí)施方式
以下對(duì)本公開(kāi)的具體實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解的是,此處所描述的具體實(shí)施方式僅用于說(shuō)明和解釋本公開(kāi),并不用于限制本公開(kāi)。
本公開(kāi)第一方面提供了一種微生物菌劑,其特征在于,所述微生物菌劑含有有效量的活性成分,所述活性成分包含保藏編號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)、保藏號(hào)為cgmccno.4794的友好戈登氏菌(gordoniaamicalis)、保藏號(hào)為cgmccno.4796的食烷烴戈登氏菌(gordoniaalkanivorans)和保藏號(hào)為cgmccno.4797的日本假黃單胞菌(pseudoxanthomonasjaponensis)。
通過(guò)上述技術(shù)方案,本公開(kāi)提供的微生物菌劑之間的協(xié)同作用有助于高效降解石油烴類(lèi)有機(jī)碳大分子,并且所述微生物菌劑能分泌生長(zhǎng)激素促進(jìn)植物的發(fā)芽和生長(zhǎng),同時(shí)使用上述微生物菌劑可以抑制植物細(xì)菌性病害的發(fā)生;將所述微生物菌劑和植物同時(shí)應(yīng)用于治理石油污染可以相互促進(jìn)生長(zhǎng),更有利于高效分解石油烴,治理石油污染。
根據(jù)本公開(kāi)第一方面,為了使所述微生物菌劑中各菌株能夠協(xié)同作用、不對(duì)其他菌株的生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制,所述短小芽孢桿菌、友好戈登氏菌、食烷烴戈登氏菌和日本假黃單胞菌的數(shù)量比為1:(0.15-7.5):(0.05-5):(0.05-5)。
根據(jù)本公開(kāi)第一方面,為了使所述微生物菌劑達(dá)到快速發(fā)揮作用的目的所述微生物菌劑中的活菌數(shù)量需要達(dá)到一定的水平,相對(duì)于1g的固體微生物菌劑或者1ml的液體微生物菌劑,所述總活菌數(shù)為(0.1-2.5)×1010個(gè);優(yōu)選為(0.5-1)×1010個(gè)。
根據(jù)本公開(kāi)第一方面,所述微生物菌劑還含有用于保持微生物活性的培養(yǎng)基;所述培養(yǎng)基可以為各種常用的固體培養(yǎng)基或者液體培養(yǎng)基;優(yōu)選地,所述培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、石油篩選培養(yǎng)基和pda培養(yǎng)基中的至少一種。例如,所述微生物菌劑可以保存于固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;所述石油篩選培養(yǎng)基來(lái)篩選適合于該處石油污染的微生物菌劑;為了活化、加快所述微生物菌劑的生長(zhǎng)時(shí)可以使用pda培養(yǎng)基;同時(shí)為了保持所述微生物菌劑應(yīng)用于治理石油污染初期具有較高的活力,可以使用液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。
根據(jù)本公開(kāi)第一方面,為了加快所述微生物菌劑分解石油烴的速度,所述微生物菌劑還含有表面活性劑;以所述微生物菌劑的總重量為基準(zhǔn),所述表面活性劑的含量為0.1-0.5重量%。
根據(jù)本公開(kāi)第一方面,優(yōu)選情況下,所述表面活性劑為脂肪醇醚硫酸鈉、硬脂酸甲酯聚氧乙烯醚磺酸鈉、異辛醇磷酸酯和異辛醇醚磷酸酯中的至少一種。
本公開(kāi)第二方面提供了如上所述的微生物菌劑在治理有機(jī)污染中的應(yīng)用,所述微生物菌劑由于石油烴分解能力強(qiáng),可以單獨(dú)應(yīng)用于治理石油污染中。
本公開(kāi)第三方面提供了所述的微生物菌劑在促進(jìn)植物生長(zhǎng)中的應(yīng)用,所述微生物菌劑能夠單獨(dú)應(yīng)用促進(jìn)植物生長(zhǎng),其可以分泌生長(zhǎng)激素iaa\ga等促進(jìn)植物的發(fā)芽和生長(zhǎng),同時(shí)使用上述微生物菌劑可以抑制植物細(xì)菌性病害的發(fā)生。
本公開(kāi)第三方面提供了一種土壤有機(jī)污染的生物協(xié)同修復(fù)方法,該方法包括使用有機(jī)污染的土壤或水體種植植物,同時(shí)施用如上所述的微生物菌劑;優(yōu)選地,所述有機(jī)污染為石油污染。將所述微生物菌劑和植物同時(shí)應(yīng)用于治理石油污染可以相互促進(jìn)生長(zhǎng),更有利于高效分解石油烴,治理石油污染。
本公開(kāi)第四方面提供了一種短小芽孢桿菌,該短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)的保藏編號(hào)為cgmccno.13208;所述短小芽孢桿菌由本公開(kāi)發(fā)明人從石油污染土壤中篩選得到,該菌株對(duì)石油烴具有很強(qiáng)的降解能力。
以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1
以所述菌種的總重量為100%計(jì),將所述保藏編號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)接種于100ml的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中;將所述接種后的培養(yǎng)基于28℃、180轉(zhuǎn)/分鐘的條件下培養(yǎng)1天使所述培養(yǎng)基中短小芽孢桿菌的濃度為2.5×1010個(gè)/ml;以所述微生物菌劑的總重量為100%計(jì),向所述培養(yǎng)基中加入0.1重量%的脂肪醇醚硫酸鈉制備得到本實(shí)施例的短小芽孢桿菌劑。
實(shí)施例2
將所述保藏編號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)、保藏號(hào)為cgmccno.4794的友好戈登氏菌(gordoniaamicalis)、保藏號(hào)為cgmccno.4796的食烷烴戈登氏菌(gordoniaalkanivorans)和保藏號(hào)為cgmccno.4797的日本假黃單胞菌(pseudoxanthomonasjaponensis)分別接種于100ml的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中;將所述接種后的培養(yǎng)基于28℃、180轉(zhuǎn)/分鐘的條件下培養(yǎng)1天使其菌液濃度達(dá)到1×109個(gè)/ml,將9體積%所述含有短小芽孢桿菌的培養(yǎng)液、1.5體積%所述含有友好戈登氏菌的培養(yǎng)液、44.75體積%所述含有食烷烴戈登氏菌的培養(yǎng)液和44.75體積%所述含有日本假黃單胞菌的培養(yǎng)液混合均勻配置成100ml復(fù)合菌劑;1ml所述微生物菌劑中的總活菌數(shù)為0.1×1010個(gè)。
實(shí)施例3
將所述保藏編號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)、保藏號(hào)為cgmccno.4794的友好戈登氏菌(gordoniaamicalis)、保藏號(hào)為cgmccno.4796的食烷烴戈登氏菌(gordoniaalkanivorans)和保藏號(hào)為cgmccno.4797的日本假黃單胞菌(pseudoxanthomonasjaponensis)分別接種于100ml的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中;將所述接種后的培養(yǎng)基于28℃、180轉(zhuǎn)/分鐘的條件下培養(yǎng)1天使其菌液濃度達(dá)到5×1010個(gè)/ml,將5.8體積%所述含有短小芽孢桿菌的培養(yǎng)液、44體積%所述含有友好戈登氏菌的培養(yǎng)液、0.1體積%所述含有食烷烴戈登氏菌的培養(yǎng)液、0.1體積%所述含有日本假黃單胞菌的培養(yǎng)液和余量的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基混合均勻配置成100ml復(fù)合菌劑;1ml所述微生物菌劑中的總活菌數(shù)為2.5×1010個(gè)。
實(shí)施例4
將所述保藏編號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)、保藏號(hào)為cgmccno.4794的友好戈登氏菌(gordoniaamicalis)、保藏號(hào)為cgmccno.4796的食烷烴戈登氏菌(gordoniaalkanivorans)和保藏號(hào)為cgmccno.4797的日本假黃單胞菌(pseudoxanthomonasjaponensis)分別接種于100ml的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中;將所述接種后的培養(yǎng)基于28℃、180轉(zhuǎn)/分鐘的條件下培養(yǎng)1天使其菌液濃度達(dá)到1×1010個(gè)/ml,將6.25體積%所述含有短小芽孢桿菌的培養(yǎng)液、18.75體積%所述含有友好戈登氏菌的培養(yǎng)液、12.5體積%所述含有食烷烴戈登氏菌的培養(yǎng)液、12.5體積%所述含有日本假黃單胞菌的培養(yǎng)液和余量的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基混合均勻配置成100ml復(fù)合菌劑;1ml所述微生物菌劑中的總活菌數(shù)為0.5×1010個(gè)。
實(shí)施例5
將所述保藏編號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)、保藏號(hào)為cgmccno.4794的友好戈登氏菌(gordoniaamicalis)、保藏號(hào)為cgmccno.4796的食烷烴戈登氏菌(gordoniaalkanivorans)和保藏號(hào)為cgmccno.4797的日本假黃單胞菌(pseudoxanthomonasjaponensis)分別接種于100ml的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中;將所述接種后的培養(yǎng)基于28℃、180轉(zhuǎn)/分鐘的條件下培養(yǎng)1天使其菌液濃度達(dá)到1×1010個(gè)/ml,將25體積%所述含有短小芽孢桿菌的培養(yǎng)液、25體積%所述含有友好戈登氏菌的培養(yǎng)液、25體積%所述含有食烷烴戈登氏菌的培養(yǎng)液和25體積%所述含有日本假黃單胞菌的培養(yǎng)液混合均勻配置成100ml復(fù)合菌劑;1ml所述微生物菌劑中的總活菌數(shù)為1×1010個(gè)。
實(shí)施例6
將所述保藏編號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)、保藏號(hào)為cgmccno.4794的友好戈登氏菌(gordoniaamicalis)、保藏號(hào)為cgmccno.4796的食烷烴戈登氏菌(gordoniaalkanivorans)和保藏號(hào)為cgmccno.4797的日本假黃單胞菌(pseudoxanthomonasjaponensis)分別接種于100ml的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中;將所述接種后的培養(yǎng)基于28℃、180轉(zhuǎn)/分鐘的條件下培養(yǎng)1天使其菌液濃度達(dá)到1010個(gè)/ml,將25體積%所述含有短小芽孢桿菌的培養(yǎng)液、25體積%所述含有友好戈登氏菌的培養(yǎng)液、25體積%所述含有食烷烴戈登氏菌的培養(yǎng)液和25體積%所述含有日本假黃單胞菌的培養(yǎng)液混合均勻配置成100ml復(fù)合菌劑;以所述微生物菌劑的總重量為100%計(jì),向所述復(fù)合菌劑中加入0.5重量%的異辛醇醚磷酸酯制備得到本實(shí)施例的微生物菌劑;1ml所述微生物菌劑中的總活菌數(shù)為1×1010個(gè)。
實(shí)施例7
將所述保藏編號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌(bacilluspumilus)、保藏號(hào)為cgmccno.4794的友好戈登氏菌(gordoniaamicalis)、保藏號(hào)為cgmccno.4796的食烷烴戈登氏菌(gordoniaalkanivorans)和保藏號(hào)為cgmccno.4797的日本假黃單胞菌(pseudoxanthomonasjaponensis)分別接種于100ml的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中;將所述接種后的培養(yǎng)基于28℃、180轉(zhuǎn)/分鐘的條件下培養(yǎng)1天使其菌液濃度達(dá)到1010個(gè)/ml以上,將6.25體積%所述含有短小芽孢桿菌的培養(yǎng)液、18.75體積%所述含有友好戈登氏菌的培養(yǎng)液、12.5體積%所述含有食烷烴戈登氏菌的培養(yǎng)液、12.5體積%所述含有日本假黃單胞菌的培養(yǎng)液和余量的液體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基混合均勻配置成100ml復(fù)合菌劑;以所述微生物菌劑的總重量為100%計(jì)向所述復(fù)合菌劑中加入0.1重量%的脂肪醇醚硫酸鈉制備得到本實(shí)施例的微生物菌劑;1ml所述微生物菌劑中的總活菌數(shù)為0.5×1010個(gè)。
對(duì)比例1
按照實(shí)施例1的方法制備微生物菌劑,不同的是,所述保藏編號(hào)為cgmccno.13208短小芽孢桿菌替換為發(fā)明人自行分離的編號(hào)pdbp-2的短小芽孢桿菌。
對(duì)比例2
按照實(shí)施例3的方法制備微生物菌劑,不同的是,所述保藏編號(hào)為cgmccno.13208短小芽孢桿菌替換為發(fā)明人自行分離的編號(hào)pdbp-3的短小芽孢桿菌。
測(cè)試實(shí)施例1
本測(cè)試實(shí)施例用于測(cè)定實(shí)施例1-7與對(duì)比例1-2中的微生物菌劑分解石油烴的效率。
稱(chēng)取石油污染土壤樣品,每份各10g(石油含量1.25g),所述土壤樣品為采自克拉瑪依油田的采油井周?chē)穆涞卦臀廴就寥?、油泥沙和長(zhǎng)期堆放油泥沙的耕層土按照1:1:1的比例混合后的石油污染土壤樣品;將所述石油污染土壤樣品分別加入裝有100ml液體牛肉膏蛋白胨的250ml三角瓶中,同時(shí)分別接種所述實(shí)施例1-7、對(duì)比例1或者對(duì)比例2中的微生物各3瓶;接種后將所述培養(yǎng)基于28℃、180轉(zhuǎn)/分鐘條件下培養(yǎng)5天,檢測(cè)所述培養(yǎng)基中的石油含量(g),具體結(jié)果見(jiàn)表1。
表1
經(jīng)表1中實(shí)施例1-7與對(duì)比例1-2比較可以看出,本公開(kāi)提供的含有保藏號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌的微生物菌劑具有更好的分解石油烴的效果;實(shí)施例2-5中含有多種菌株的復(fù)合微生物菌劑與實(shí)施例1相比具有更高的石油烴分解效率;更優(yōu)選地,實(shí)施例4-7中所述復(fù)合微生物菌劑中的活菌數(shù)為(0.5-1.0)×1010個(gè)/ml時(shí)石油烴分解效率更高;最優(yōu)選地,實(shí)施例6-7所述微生物菌劑中添加有0.1-0.5重量%的表面活性劑時(shí)具有更好的石油烴分解效果。
測(cè)試實(shí)施例2
本測(cè)試實(shí)施例用于測(cè)定實(shí)施例1-7與對(duì)比例1-2中的微生物菌劑促進(jìn)植物生長(zhǎng)的效率。
取每份100粒苜蓿種子放入鋪墊3張濾紙的100mm的培養(yǎng)皿中,以無(wú)菌水稀釋后含量為10體積%的微生物菌劑處理,以無(wú)菌水作為對(duì)照,保持濾紙浸潤(rùn)并且于室溫下培養(yǎng)3天后測(cè)定種子發(fā)芽勢(shì),5天后測(cè)定發(fā)芽率和根長(zhǎng),具體結(jié)果見(jiàn)表2。
表2
經(jīng)表2中實(shí)施例1-7與對(duì)比例1-2比較可以看出,本公開(kāi)提供的含有保藏號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌的微生物菌劑具有更好的促進(jìn)植物生長(zhǎng)的效果;實(shí)施例2-7中含有多種菌株的復(fù)合微生物菌劑與實(shí)施例1相比效果更好,優(yōu)選情況下,實(shí)施例4-7所述復(fù)合微生物菌劑中的活菌數(shù)為(0.5-1.0)×1010個(gè)/ml時(shí)促進(jìn)植物生長(zhǎng)的效果更好。
測(cè)試實(shí)施例3
本測(cè)試實(shí)施例為實(shí)施例1-7與對(duì)比例1-2中的微生物菌劑與植物聯(lián)合處理石油污染土壤的效果。
稱(chēng)取石油污染土壤樣品,每份各100g(石油含量5g),所述土壤樣品為采自克拉瑪依油田的采油井周?chē)穆涞卦臀廴就寥?、油泥沙和長(zhǎng)期堆放油泥沙的耕層土按照1:1:1的比例混合后的石油污染土壤樣品;將所述石油污染土壤樣品鋪在100mm的培養(yǎng)皿中,取100粒苜蓿種子分別放入鋪墊油污土壤的培養(yǎng)皿,以10體積%的微生物菌劑澆灌處理,以無(wú)菌水作為對(duì)照;保持石油污染土壤被浸潤(rùn)并且于室溫下培養(yǎng)5天后測(cè)定種子發(fā)芽勢(shì),10天后測(cè)定苜蓿的發(fā)芽率、根長(zhǎng)和石油的分解率。具體結(jié)果見(jiàn)表3。
表3
經(jīng)表3中實(shí)施例1-7與對(duì)比例1-2比較可以看出,本公開(kāi)提供的含有保藏號(hào)為cgmccno.13208的短小芽孢桿菌的微生物菌劑與植物聯(lián)合治理石油污染效果更好,同時(shí)有利于植物的生長(zhǎng);實(shí)施例2-7中含有多種菌株的復(fù)合微生物菌劑與實(shí)施例1相比促進(jìn)植物生長(zhǎng)、分解油污的效果更好;更優(yōu)選地,實(shí)施例4-7所述復(fù)合微生物菌劑中的活菌數(shù)為(0.5-1.0)×1010個(gè)/ml時(shí)促進(jìn)植物生長(zhǎng)、分解油污的效果更好;最優(yōu)選地,實(shí)施例6-7所述微生物菌劑中添加有0.1-0.5重量%的表面活性劑時(shí)具有最好的石油分解效果。
以上詳細(xì)描述了本公開(kāi)的優(yōu)選實(shí)施方式,但是,本公開(kāi)并不限于上述實(shí)施方式中的具體細(xì)節(jié),在本公開(kāi)的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi),可以對(duì)本公開(kāi)的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡(jiǎn)單變型,這些簡(jiǎn)單變型均屬于本公開(kāi)的保護(hù)范圍。
另外需要說(shuō)明的是,在上述具體實(shí)施方式中所描述的各個(gè)具體技術(shù)特征,在不矛盾的情況下,可以通過(guò)任何合適的方式進(jìn)行組合。為了避免不必要的重復(fù),本公開(kāi)對(duì)各種可能的組合方式不再另行說(shuō)明。
此外,本公開(kāi)的各種不同的實(shí)施方式之間也可以進(jìn)行任意組合,只要其不違背本公開(kāi)的思想,其同樣應(yīng)當(dāng)視為本公開(kāi)所公開(kāi)的內(nèi)容。