本發(fā)明涉及分生孢子的收集工藝，用于白僵菌、綠僵菌等昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子的收集。
背景技術(shù)：
：白僵菌屬半知菌綱、鏈孢霉目、鏈孢霉科、真菌科，綠僵菌屬子囊菌門、肉座菌目、麥角菌科、真菌科，白僵菌和綠僵菌是最具代表性的昆蟲(chóng)病原真菌。昆蟲(chóng)病原真菌廣泛寄生于蠐螬、家蠅、介殼蟲(chóng)、白粉虱、蚜蟲(chóng)、薊馬、馬鈴薯葉甲、蜚蠊、蝗蟲(chóng)、蚱蜢、蟋蟀、棉鈴象、棉跳盲蝽、玉米螟、天牛、甘蔗金龜子等昆蟲(chóng)體內(nèi)，且能夠使昆蟲(chóng)致病至死，其致病原理是：昆蟲(chóng)病原真菌在無(wú)性繁殖過(guò)程中產(chǎn)生的分生孢子(也稱之為孢子)侵入昆蟲(chóng)(寄主)體內(nèi)后，通過(guò)在昆蟲(chóng)(寄主)體內(nèi)不斷生長(zhǎng)和繁殖來(lái)消耗昆蟲(chóng)(寄主)的營(yíng)養(yǎng)，并釋放毒素，進(jìn)而使昆蟲(chóng)(寄主)發(fā)病至死。由于這種方式致病性強(qiáng)，致病機(jī)理復(fù)雜，且能夠有針對(duì)性的殺死目標(biāo)昆蟲(chóng)，因此，農(nóng)業(yè)上常用昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子來(lái)制備真菌殺蟲(chóng)劑。目前，主要采用分篩法或旋風(fēng)收集法收集昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子并得到孢子粉，采用這兩種方法容易導(dǎo)致昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子四處飛散，進(jìn)而影響操作區(qū)域空氣質(zhì)量，甚至危害人員健康。此外，孢子粉需要儲(chǔ)存于干燥的環(huán)境中，保存不便。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供一種昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子收集工藝。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：一種昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子收集工藝，包括昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子培養(yǎng)和收集步驟；所述昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子培養(yǎng)為：將昆蟲(chóng)病原真菌菌種接種于薩氏液體培養(yǎng)基培養(yǎng)后得到昆蟲(chóng)病原真菌液體菌種；再將所得液體菌種接種于滅菌后的大米培養(yǎng)基或麥麩培養(yǎng)基上發(fā)酵至產(chǎn)孢成熟；所述昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子收集為：將含有成熟產(chǎn)孢的培養(yǎng)基與植物油或礦物油混合，于3-30℃的工藝溫度下攪拌均勻，得到分散體系；將所得分散體系過(guò)濾后進(jìn)行真空除水，再經(jīng)離心篩選或過(guò)濾篩選后收取分生孢子油膏。上述技術(shù)方案將植物油或礦物油與含成熟產(chǎn)孢的培養(yǎng)基混合，在特定的溫度(3-30℃)下攪拌后結(jié)合過(guò)濾工藝收取分生孢子油膏，解決了分生孢子在收集過(guò)程在容易飛散的問(wèn)題，極大程度避免了分生孢子污染操作區(qū)域的空氣和危害操作人員健康，在真菌殺蟲(chóng)劑的工業(yè)生產(chǎn)中具有極大的應(yīng)用價(jià)值。優(yōu)選地，所述植物油為大豆油、菜籽油、棕櫚油的一種或幾種組合。優(yōu)選地，所述植物油或礦物油含量為含有成熟產(chǎn)孢的培養(yǎng)基重量的1-5倍。為進(jìn)一步解決昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子在收集過(guò)程中易飛散的問(wèn)題，在大米培養(yǎng)基或麥麩培養(yǎng)基與植物油或礦物油混合后的攪拌過(guò)程中，工藝溫度控制為10-23℃；優(yōu)選地，在大米培養(yǎng)基與植物油或礦物油混合后的攪拌過(guò)程中，工藝溫度控制為15-23℃。優(yōu)選地，將大米培養(yǎng)基或麥麩培養(yǎng)基與植物油或礦物油混合后，采用三葉漿式攪拌器或螺旋式攪拌器進(jìn)行攪拌；其中，攪拌速度控制為5-30rpm(轉(zhuǎn)/分鐘)，攪拌時(shí)間控制為5-10分鐘。為更進(jìn)一步解決昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子在收集過(guò)程中易飛散的問(wèn)題，將昆蟲(chóng)病原真菌菌種接種于1/4強(qiáng)度的薩氏液體培養(yǎng)基上，于25-27℃條件下培養(yǎng)3-4天，得到昆蟲(chóng)病原真菌液體菌種；將前述液體菌種接種于滅菌后的大米培養(yǎng)基上，并置于25-27℃條件下發(fā)酵13-15天，至產(chǎn)孢成熟；將含有成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基與大豆色拉油按照重量比＝1:1-1:5混合后，于15-23℃的工藝溫度下攪拌均勻，得到分散體系；將前述分散體系置于120-150um的篩網(wǎng)上過(guò)濾，并將所得濾液先用真空干燥機(jī)除水后，再用1-5μm的篩網(wǎng)過(guò)濾后收取分生孢子油膏。本發(fā)明昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子收集工藝，將含有植物油或礦物油與含成熟產(chǎn)孢的培養(yǎng)基混合，在特定的溫度(3-30℃)下攪拌后結(jié)合過(guò)濾工藝收取分生孢子油膏，解決了分生孢子在收集過(guò)程在容易飛散的問(wèn)題，極大程度避免了分生孢子污染操作區(qū)域的空氣和危害操作人員的健康，在真菌殺蟲(chóng)劑的工業(yè)生產(chǎn)中具有極大的應(yīng)用價(jià)值。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明還提高了分生孢子的活孢率、純度和回收率，采用本發(fā)明收集到的昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子的活孢率非常高，且回收率明顯提高；經(jīng)測(cè)試，本發(fā)明收集的分生孢子的活孢率可達(dá)99.4％(較旋風(fēng)收集法提高8.2-10.9％)，其純度較分篩法提高13.2-26.2％，本發(fā)明收集的分生孢子的回收率可達(dá)98.7％(較旋風(fēng)收集法、分篩法提高6.4-9.7％)。此外，本發(fā)明收集的昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子的活性好，能夠增強(qiáng)的殺蟲(chóng)效果。本發(fā)明收集的昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子直接儲(chǔ)存于油膏中，既能夠避免分生孢子受潮，方便保存，又可以直接用來(lái)制備粉劑、懸浮劑等農(nóng)藥產(chǎn)品。本發(fā)明昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子收集工藝，所用設(shè)備簡(jiǎn)單，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，工序少，在常壓下即可完成分生孢子的收集，同時(shí)能提高收集率，節(jié)約能源和成本。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，在此指出以下實(shí)施例不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的內(nèi)容作出一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整，均在本發(fā)明保護(hù)范圍內(nèi)。除特殊說(shuō)明外，本發(fā)明中所述分?jǐn)?shù)均為重量份，所述百分比均為重量百分比；本發(fā)明中所述原料均是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員知曉的市售產(chǎn)品，其中，薩氏液體培養(yǎng)基為上海冠導(dǎo)生物工程有限公司生產(chǎn)的1/4sday培養(yǎng)基(1/4指的是培養(yǎng)基的強(qiáng)度)；本發(fā)明所用菌種由重慶大學(xué)基因工程中心提供；本發(fā)明中所述分篩法采用的設(shè)備為卓美機(jī)械z(mì)m600-1800型振蕩分篩機(jī)，篩網(wǎng)可按孔徑要求替換；本發(fā)明中所述旋風(fēng)收孢機(jī)為流能lnc-180a型旋風(fēng)收孢機(jī)，収孢溫度可按要求控制。實(shí)施例1：綠僵菌分生孢子培養(yǎng)，將金龜子綠僵菌cqma421菌種接種于1/4強(qiáng)度的薩氏液體培養(yǎng)基上，在26℃條件下培養(yǎng)3天，得到金龜子綠僵菌液體菌種；將前述液體菌種接種于滅菌后的大米培養(yǎng)基(將大米在26℃的自來(lái)水中浸泡4小時(shí)后瀝干，將其滅菌后冷卻至室溫制得大米培養(yǎng)基)上，將大米培養(yǎng)基置于26℃條件下發(fā)酵15天，至產(chǎn)孢成熟。綠僵菌分生孢子收集，將含有成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基與大豆色拉油按照重量比＝1：2.5混合后(含成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基100kg，大豆色拉油250kg)，在15℃的工藝溫度下，以20rpm的轉(zhuǎn)速攪拌10分鐘得到分散體系；將前述分散體系置于120um的篩網(wǎng)中過(guò)濾，并將所得濾液先用真空干燥機(jī)除水，再用篩網(wǎng)規(guī)格為5μm的過(guò)濾機(jī)過(guò)濾后收取分生孢子油膏。該分生孢子油膏直接加入大豆油、礦物油或棕櫚油中分散，即可得到綠僵菌油懸浮劑。實(shí)施例2：綠僵菌分生孢子培養(yǎng)，將金龜子綠僵菌cqma102菌種接種于1/4強(qiáng)度的薩氏液體培養(yǎng)基上，在27℃條件下培養(yǎng)4天，得到金龜子綠僵菌液體菌種；將前述液體菌種接種于滅菌后的大米培養(yǎng)基(將大米在27℃的自來(lái)水中浸泡4小時(shí)后瀝干，將其滅菌后冷卻至室溫制得大米培養(yǎng)基)上，將大米培養(yǎng)基置于27℃條件下發(fā)酵15天，至產(chǎn)孢成熟。綠僵菌分生孢子收集，將含有成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基與大豆色拉油按照重量比＝1：4混合后(含成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基100kg，大豆色拉油400kg)，在17℃的工藝溫度下，以20rpm的轉(zhuǎn)速攪拌10分鐘得到分散體系；將前述分散體系置于150um的篩網(wǎng)中過(guò)濾，并將所得濾液先用真空干燥機(jī)除水，再用臥式螺旋離心機(jī)離心后收取分生孢子油膏。實(shí)施例3：白僵菌分生孢子培養(yǎng)，將球孢白僵菌cqbb101菌種接種于1/4強(qiáng)度的薩氏液體培養(yǎng)基上，在25℃條件下培養(yǎng)3天，得到金龜子綠僵菌液體菌種；將前述液體菌種接種于滅菌后的麥麩培養(yǎng)基(將麥麩與自來(lái)水按照重量比＝2:1混合后拌勻，再經(jīng)滅菌后冷卻至室溫制得麥麩培養(yǎng)基)上，將麥麩培養(yǎng)基置于25℃條件下發(fā)酵15天，至產(chǎn)孢成熟。白僵菌分生孢子收集，將含有成熟產(chǎn)孢的麥麩培養(yǎng)基與菜籽油按照重量比＝1：5混合后(含成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基100kg，菜籽油500kg)，在10℃的工藝溫度下，以5rpm的轉(zhuǎn)速攪拌10分鐘得到分散體系；將前述分散體系置于120um的篩網(wǎng)中過(guò)濾，并將所得濾液先用真空干燥機(jī)除水，再用篩網(wǎng)規(guī)格為5μm的過(guò)濾機(jī)過(guò)濾后收取分生孢子油膏。該分生孢子油膏直接加入大豆油、礦物油或棕櫚油分散后，再加入5％(重量比)的脂肪醇聚氧乙烯醚，即可配制成白僵菌可分散懸浮劑。實(shí)施例4：白僵菌分生孢子培養(yǎng)，將球孢白僵菌cqbb223菌種接種于1/4強(qiáng)度的薩氏液體培養(yǎng)基上，在27℃條件下培養(yǎng)4天，得到金龜子綠僵菌液體菌種；將前述液體菌種接種于滅菌后的麥麩培養(yǎng)基(將麥麩與自來(lái)水按照重量比＝2:1混合后拌勻，再經(jīng)滅菌后冷卻至室溫制得麥麩培養(yǎng)基)上，將麥麩培養(yǎng)基置于27℃條件下發(fā)酵20天，至產(chǎn)孢成熟。白僵菌分生孢子收集，將含有成熟產(chǎn)孢的麥麩培養(yǎng)基與菜籽油按照重量比＝1：3混合后(含成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基100kg，菜籽油300kg)，在23℃的工藝溫度下，以30rpm的轉(zhuǎn)速攪拌5分鐘得到分散體系；將前述分散體系置于150um的篩網(wǎng)中過(guò)濾，并將所得濾液先用真空干燥機(jī)除水，再用臥式螺旋離心機(jī)離心后收取分生孢子油膏。實(shí)施例5：綠僵菌分生孢子培養(yǎng)，將金龜子綠僵菌cqma421菌種接種于1/4強(qiáng)度的薩氏液體培養(yǎng)基上，在25℃條件下培養(yǎng)3天，得到金龜子綠僵菌液體菌種；將前述液體菌種接種于滅菌后的大米培養(yǎng)基(將大米在25℃的自來(lái)水中浸泡4小時(shí)后瀝干，將其滅菌后冷卻至室溫制得大米培養(yǎng)基)上，將大米培養(yǎng)基置于25℃條件下發(fā)酵10天，至產(chǎn)孢成熟。綠僵菌分生孢子收集，將含有成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基與混合物油(大豆油與棕櫚油混合所得的油)按照重量比＝1：1混合后(含成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基100kg，大豆油50kg，棕櫚油50kg)，在3℃的工藝溫度下，以5rpm的轉(zhuǎn)速攪拌5分鐘得到分散體系；將前述分散體系置于120um的篩網(wǎng)中過(guò)濾，并將所得濾液先用真空干燥機(jī)除水，再用篩網(wǎng)規(guī)格為1μm的過(guò)濾機(jī)過(guò)濾后收取分生孢子油膏。實(shí)施例6：綠僵菌分生孢子培養(yǎng)，將金龜子綠僵菌cqma421菌種接種于1/4強(qiáng)度的薩氏液體培養(yǎng)基上，在27℃條件下培養(yǎng)4天，得到金龜子綠僵菌液體菌種；將前述液體菌種接種于滅菌后的大米培養(yǎng)基(將大米在27℃的自來(lái)水中浸泡4小時(shí)后瀝干，將其滅菌后冷卻至室溫制得大米培養(yǎng)基)上，將大米培養(yǎng)基置于27℃條件下發(fā)酵20天，至產(chǎn)孢成熟。綠僵菌分生孢子收集，將含有成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基與礦物油按照重量比＝1：4混合后(含成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基100kg，礦物油400kg)，在30℃的工藝溫度下，以30rpm的轉(zhuǎn)速攪拌10分鐘得到分散體系；將前述分散體系置于150um的篩網(wǎng)中過(guò)濾，并將所得濾液先用真空干燥機(jī)除水，再用臥式螺旋離心機(jī)離心后收取分生孢子油膏。對(duì)比實(shí)施例1：采用分篩法收集孢子粉，參照實(shí)施例1中綠僵菌分生孢子培養(yǎng)步驟，制備成熟產(chǎn)孢，將含有成熟產(chǎn)孢的培養(yǎng)基置于干燥室(溫度30℃，濕度≤30％)內(nèi)干燥2天后，先用120目的振蕩篩收集孢子粉，再用震蕩分篩機(jī)(卓美機(jī)械z(mì)m600-1800型分篩機(jī)，篩網(wǎng)規(guī)格為149μm)收集孢子粉，經(jīng)低溫干燥后得到含水量為4％的孢子粉。對(duì)比實(shí)施例2：采用旋風(fēng)收集法收集孢子粉，參照實(shí)施例1中綠僵菌分生孢子培養(yǎng)步驟，制備成熟產(chǎn)孢，將含有成熟產(chǎn)孢的培養(yǎng)基置于干燥室(溫度30℃，濕度≤30％)干燥2天后，用旋風(fēng)收孢機(jī)(流能lnc-180a型旋風(fēng)收孢機(jī)，収孢溫度設(shè)為40-50℃)收集孢子粉，經(jīng)低溫干燥后得到含水量為4％的孢子粉。對(duì)比實(shí)施例3：參照實(shí)施例2中綠僵菌分生孢子培養(yǎng)步驟，制備成熟產(chǎn)孢，先用150目的振蕩篩收集孢子粉，再用震蕩分篩機(jī)(卓美機(jī)械z(mì)m600-1800型分篩機(jī)，篩網(wǎng)規(guī)格為149μm)收集孢子粉，經(jīng)低溫干燥后得到含水量為5％的孢子粉。對(duì)比實(shí)施例4：參照實(shí)施例2中綠僵菌分生孢子培養(yǎng)步驟，制備成熟產(chǎn)孢，將含有成熟產(chǎn)孢的培養(yǎng)基用旋風(fēng)收集器(旋風(fēng)收集法)收集孢子粉，經(jīng)低溫干燥后得到含水量為5％的孢子粉。對(duì)比實(shí)施例5：參照實(shí)施例3中白僵菌分生孢子培養(yǎng)步驟，制備成熟產(chǎn)孢，先用120目的振蕩篩收集孢子粉，再用震蕩分篩機(jī)(卓美機(jī)械z(mì)m600-1800型分篩機(jī)，篩網(wǎng)規(guī)格為74μm)收集孢子粉，經(jīng)低溫干燥后得到含水量為4％的孢子粉。對(duì)比實(shí)施例6：參照實(shí)施例3中白僵菌分生孢子培養(yǎng)步驟，制備成熟產(chǎn)孢，將含有成熟產(chǎn)孢的培養(yǎng)基用旋風(fēng)收集器(旋風(fēng)收集法)收集孢子粉，經(jīng)低溫干燥后得到含水量為4％的孢子粉。對(duì)比實(shí)施例7：參照實(shí)施例4中白僵菌分生孢子培養(yǎng)步驟，制備成熟產(chǎn)孢，先用150目的振蕩篩收集孢子粉，再用震蕩分篩機(jī)(卓美機(jī)械z(mì)m600-1800型分篩機(jī)，篩網(wǎng)規(guī)格為5μm)收集孢子粉，經(jīng)低溫干燥后得到含水量為4％的孢子粉。對(duì)比實(shí)施例8：參照實(shí)施例4中白僵菌分生孢子培養(yǎng)步驟，制備成熟產(chǎn)孢，將含有成熟產(chǎn)孢的培養(yǎng)基用旋風(fēng)收集器(旋風(fēng)收集法)收集孢子粉，經(jīng)低溫干燥后得到含水量為5％的孢子粉。孢子飛散情況測(cè)試：選擇3m*3m*2m的密閉實(shí)驗(yàn)空間，用除塵器清理干凈實(shí)驗(yàn)空間內(nèi)的灰塵后在實(shí)驗(yàn)空間內(nèi)均勻放置4臺(tái)lzj-01d型粒子計(jì)數(shù)器。將實(shí)施例1中含有成熟產(chǎn)孢的大米培養(yǎng)基置于該實(shí)驗(yàn)空間中收集分生孢子，待收集完畢后的第30分鐘讀取粒子計(jì)數(shù)器上的數(shù)據(jù)(該數(shù)據(jù)反應(yīng)分生孢子的飛散情況，數(shù)值越大說(shuō)明分生孢子越容易飛散)，結(jié)果見(jiàn)表1。參照上述方法，在同樣的環(huán)境條件下分別測(cè)量實(shí)施例2-6，對(duì)比實(shí)施例1-8中分生孢子的飛散情況，結(jié)果見(jiàn)表1；表1昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子飛散情況由表1可知，在本發(fā)明實(shí)施例1-6收集分生孢子的過(guò)程中，粒子計(jì)數(shù)器上的平均值為15-22，而對(duì)比實(shí)施例1-8收集分生孢子的過(guò)程中，粒子計(jì)數(shù)器上的平均值為5198.5-5822.3，顯著高于本發(fā)明的平均值，充分說(shuō)明采用本發(fā)明收集昆蟲(chóng)病原菌分生孢子，收集過(guò)程中分生孢子飛散量非常小。純度與活孢率測(cè)試：純度與活孢率測(cè)試：純度測(cè)定，先分別稱取實(shí)施例1中收集到的分生孢子油膏，對(duì)比實(shí)施例1、對(duì)比實(shí)施例2中收集到的孢子粉，分別用大豆色拉油分散至80億孢子/毫升的懸浮液，然后分別取5ml懸浮液離心5分鐘后倒棄上清油，再倒于濾紙上過(guò)濾，5分鐘后分別稱離心管中的沉淀重量，并計(jì)算沉淀中的含孢量(含孢量＝400億孢子/沉淀重量)，結(jié)果見(jiàn)表2；活孢率測(cè)定，分別稱取實(shí)施例1中收集到的分生孢子油膏，對(duì)比實(shí)施例1、對(duì)比實(shí)施例2中收集到的孢子粉，分別用煤油稀釋并配制成106個(gè)孢子/毫升的孢懸液，均勻涂在1/4sday平板培養(yǎng)基(蛋白胨0.25％、酵母浸提物0.5％、葡萄糖1.0％、瓊脂1.8％)上，于26℃條件下保濕培養(yǎng)30h后置于顯微鏡下統(tǒng)計(jì)萌發(fā)的孢子數(shù)與未萌發(fā)的孢子數(shù)，計(jì)算萌發(fā)率(即活孢率)，結(jié)果見(jiàn)表2。參照上述含孢量與活孢率的測(cè)試方法，分別測(cè)定實(shí)施例2-4中和對(duì)比實(shí)施例3-8的含孢量(含孢量用來(lái)表征干孢粉的純度，含孢量越高表明其純度較高)與活孢率，結(jié)果見(jiàn)表2。比較實(shí)施例1與對(duì)比實(shí)施例1可得其含孢量增率((實(shí)施例1含孢量-對(duì)比實(shí)施例1含孢量)/對(duì)比實(shí)施例1含孢量)，結(jié)果見(jiàn)表2；比較實(shí)施例1與對(duì)比實(shí)施例2可得其活孢率增率((實(shí)施例1含活孢率-對(duì)比實(shí)施例2活孢率)/對(duì)比實(shí)施例2活孢率)，結(jié)果見(jiàn)表2；其它實(shí)施例增率同上；表2昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子的純度與活孢率實(shí)施例含孢量108/g活孢率(％)實(shí)施例118998.6實(shí)施例223199.4實(shí)施例349099.2實(shí)施例452198.9對(duì)比實(shí)施例116798.4對(duì)比實(shí)施例218590.3對(duì)比實(shí)施例318399.3對(duì)比實(shí)施例423889.6對(duì)比實(shí)施例542999.2對(duì)比實(shí)施例648591.7對(duì)比實(shí)施例745798.6對(duì)比實(shí)施例853590.9從表2可以看出：采用本發(fā)明收集的分生孢子的純度明顯高于采用分篩法(對(duì)比實(shí)施例1、3、5、7)收集的分生孢子的純度，增率為13.2％-26.2％；采用本發(fā)明收集的分生孢子油膏的分生孢子的活孢率可達(dá)99.4％，明顯高于采用旋風(fēng)收集法(對(duì)比實(shí)施例2、4、6、8)收集的分生孢子的活孢率90.2-92.7％，增率達(dá)到8.2-10.9％。回收率測(cè)試：測(cè)試依據(jù)，昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子的回收率＝(分生孢子油膏重量×分生孢子油膏含孢量)/(分生孢子收集前培養(yǎng)基×分生孢子收集前培養(yǎng)基含孢量)×100％。分別測(cè)量對(duì)比實(shí)施例1中分生孢子收集前培養(yǎng)基重量和培養(yǎng)基上的含孢量，收集后的分生孢子油膏重量，分生孢子油膏的含孢量，按照上述公式計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表3。分生孢子的含孢量測(cè)定：稱取物料1.0g，置于200ml燒杯中，然后新鮮沒(méi)有50ml后振蕩至孢子分散，得到懸浮液，再吸取1.0ml懸浮液，用新鮮沒(méi)有稀釋后，采用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下測(cè)定孢子數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表3。分別測(cè)定對(duì)比實(shí)施例2-8中收集前培養(yǎng)基物料和收集后孢子粉重量和含孢量，結(jié)果見(jiàn)表3；表3昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子的回收率從表3可以看出，采用本發(fā)明收集的昆蟲(chóng)病原真菌分生孢子的回收率在98％以上，明顯高于分篩法和旋風(fēng)收集法的回收率(88.6-91.9％)，表明其回收率很高。當(dāng)前第1頁(yè)12