本發(fā)明涉及藥品無菌檢測技術領域，具體地說涉及一種無菌檢測反應膜及制備方法及應用該反應膜的培養(yǎng)管。

背景技術：

藥品直接關系著人民群眾的身體健康和生命安全，確保藥品安全就是最大的民生。藥品是預防、治療、診斷人的疾病，有目的地調節(jié)人的生理機能并規(guī)定有適應證或者功能主治、用法和用量的物質作為一種特殊的商品，藥品的質量安全直接關系到人們的健康和生命。

藥品的雙重性，即治病又致病，致病的首要因素是藥品的不合格，在藥品不合格的因素中微生物不合格又是首要，因為微生物看不著摸不著，微乎其微，一旦增值就有致命危害，比如前幾年的烏蘇里江雙黃連注射液致死事故等，不僅表明了藥品安全方面存在著問題。更重要的是對人民的生命造成了損失。

盡管微生物指標在藥品質量中的重要性，但是歷次的藥典修訂中，無菌檢測依然采用連續(xù)14天目測渾濁的方法，對于生長快的微生物尚可易于觀察，但對于大部分生長緩慢的微生物不利于盡早觀察出微生物生長，以至于出現假陰性的可能性，甚至造成不合格產品按合格產品放行，并嚴重危害服用者的健康。

技術實現要素：

本發(fā)明的目的是克服現有技術中對藥品無菌檢測方法的缺陷，而提供了一種無菌檢測反應膜及應用該反應膜的培養(yǎng)管，基于微生物在生長代謝過程中，分解碳源，產出二氧化碳，二氧化碳溶于水，使溶液ph值降低，利用酸堿指示劑的顏色變化，進而判斷有無微生物生長繁殖，由此進行無菌檢測，可以更早、更快捷、更準確的檢測出樣品的帶菌情況。

本發(fā)明的另一目的是提供一種無菌檢測反應膜的制備方法。

本發(fā)明的另一目的是提供一種藥品無菌檢測的方法。

本發(fā)明的目的通過以下技術方案來實現：

一種無菌檢測培養(yǎng)管，其內壁附著無菌檢測反應膜；無菌檢測反應膜先固化在無菌檢測培養(yǎng)管內壁，不覆蓋全部培養(yǎng)管，留有一部分便于觀察檢測液體是否渾濁。

作為本發(fā)明的進一步改進，所述無菌檢測培養(yǎng)管具有圓筒形或方形的結構。

作為本發(fā)明的進一步改進，所述無菌檢測培養(yǎng)管為聚苯乙烯材質或玻璃材質。

本發(fā)明還進一步提供了一種無菌檢測反應膜，其為可變色的無菌檢測反應膜。

本發(fā)明還進一步提供了無菌檢測反應膜的制備方法：

（1）將80-120份的聚甲基硅氧烷、80-120份的正己烷，充分攪拌混合均勻，得到檢測液a；

（2）向上述檢測液a中，依次加入1-50g/l的顯色劑，0.2-1.5份的催化劑，2-10份的交聯劑，調ph值為6.5-7.5，攪拌均勻，得到檢測液b；

（3）將上述檢測液b注入傾斜的培養(yǎng)管，使之附著在培養(yǎng)管內壁，形成無菌檢測反應膜。

作為上述制備方法的進一步改進，所述顯色劑為對-硝基酚、酚酞、百里酚酞、α-萘酚酞、酚紅、溴酚藍、百里酚藍、溴甲酚紫、溴甲酚綠、麝香草酚藍、甲酚紅、二甲苯酚藍或間甲酚紫。

進一步地，所述催化劑為二丁基錫二月桂酸酯、二(十二烷基硫)二丁基錫、二辛基錫、二丁基錫、二烷基錫二馬來酸酯、二硫醇烷基錫或硫醇二辛基錫。

進一步地，所述偶聯劑為正硅酸乙酯、正硅酸甲酯、三甲氧基硅烷、對甲苯磺酸、對甲苯磺酰氯、二丙烯酸-1，4-丁二醇酯、二甲基丙烯酸乙二醇酯或丙烯酸丁酯。

本發(fā)明還進一步提供了一種對藥品無菌檢測的方法：向本發(fā)明的無菌檢測培養(yǎng)管中裝入相應的液體培養(yǎng)基，高溫滅菌后，加入檢測樣品，所述無菌檢測反應膜隨著培養(yǎng)基的ph值變化，其顏色發(fā)生變化；當ph值變化，引起無菌檢測反應膜顏色變化時，表明培養(yǎng)基中有微生物生長，即所加樣品無菌檢測不合格；當無菌檢測反應膜顏色無變化時，表明培養(yǎng)基中無微生物生長，即所加樣品無菌檢測合格。

與現有技術相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

（1）方便快捷、利于觀察，無菌檢測反應膜的顏色變化比檢測液渾濁度變化更明顯；

（2）更早得知無菌檢測結果，渾濁變化是菌體大量繁殖后濃度增加引起的，而顏色變化是液體ph值的變化引起的，如有微生物生長，時間縮短，提前得知無菌檢測結果；

（3）交聯劑的加入使無菌檢測反應膜附壁效果更好，不宜脫落；

（4）催化劑的加入使無菌檢測反應膜變色速度更快，由微生物生長產生的二氧化碳引起的ph值變化，更快反應到無菌檢測反應膜。

具體實施方式

下面結合具體實施例，對本發(fā)明的內容做進一步的解釋和說明。

一種圓筒形無菌檢測培養(yǎng)管，其為玻璃材質，其內壁附著無菌檢測反應膜；無菌檢測反應膜先固化在無菌檢測培養(yǎng)管內壁，不覆蓋全部培養(yǎng)管，留有一部分便于觀察檢測液體是否渾濁。

一種無菌檢測反應膜，其為可變色的無菌檢測反應膜。

此外，所述無菌檢測培養(yǎng)管還可是方形結構，不應限于上述的圓筒形結構；其材質還可是聚苯乙烯材質，不應限于上述玻璃材質。

無菌檢測反應膜制備實施例

本發(fā)明無菌檢測反應膜的制備方法：

實施例1

（1）將100份的聚甲基硅氧烷、100份的正己烷，充分攪拌混合均勻，得到檢測液a；

（2）向上述檢測液a中，依次加入20g/l的對-硝基酚，1份的二月桂肉酸丁基錫，6份的正硅酸乙酯，調ph值為6.5-7.5，攪拌均勻，得到檢測液b；

（3）將上述檢測液b注入傾斜的培養(yǎng)管，使之附著在培養(yǎng)管內壁，得到無菌檢測反應膜，為樣品1。

實施例2

（1）將80份的聚甲基硅氧烷、80份的正己烷，充分攪拌混合均勻，得到檢測液a；

（2）向上述檢測液a中，依次加入50g/l的酚酞，1.5份的二丁基錫二月桂酸酯，10份的正硅酸甲酯，調ph值為6.5-7.5，攪拌均勻，得到檢測液b；

（3）將上述檢測液b注入傾斜的培養(yǎng)管，使之附著在培養(yǎng)管內壁，得到無菌檢測反應膜，為樣品2。

實施例3

（1）將120份的聚甲基硅氧烷、120份的正己烷，充分攪拌混合均勻，得到檢測液a；

（2）向上述檢測液a中，依次加入30g/l的百里酚酞，0.2份的二(十二烷基硫)二丁基錫，2份的三甲氧基硅烷，調ph值為6.5-7.5，攪拌均勻，得到檢測液b；

（3）將上述檢測液b注入傾斜的培養(yǎng)管，使之附著在培養(yǎng)管內壁，得到無菌檢測反應膜，為樣品3。

實施例4

（1）將90份的聚甲基硅氧烷、90份的正己烷，充分攪拌混合均勻，得到檢測液a；

（2）向上述檢測液a中，依次加入10g/l的α-萘酚酞，0.8份的二辛基錫，6份的對甲苯磺酸，調ph值為6.5-7.5，攪拌均勻，得到檢測液b；

（3）將上述檢測液b注入傾斜的培養(yǎng)管，使之附著在培養(yǎng)管內壁，得到無菌檢測反應膜，為樣品4。

實施例5

（1）將110份的聚甲基硅氧烷、110份的正己烷，充分攪拌混合均勻，得到檢測液a；

（2）向上述檢測液a中，依次加入1g/l的酚紅，0.2份的二丁基錫，2份的對甲苯磺酰氯，調ph值為6.5-7.5，攪拌均勻，得到檢測液b；

（3）將上述檢測液b注入傾斜的培養(yǎng)管，使之附著在培養(yǎng)管內壁，得到無菌檢測反應膜，為樣品5。

此外，聚甲基硅氧烷在80-120份的范圍內取任意值、正己烷在80-120份的范圍內取任意值、顯色劑在1-50g/l的范圍內取任意值、催化劑在0.2-1.5份的范圍內取任意值、交聯劑在2-10份的范圍內取任意值均可形成其他新的實施例，不應局限于上述實施例列舉的情況；顯色劑還可選自甲酚紅、溴酚藍、百里酚藍、溴甲酚紫、溴甲酚綠、麝香草酚藍、甲酚紅、二甲苯酚藍或間甲酚紫中的任一個；催化劑還可選自二烷基錫二馬來酸酯、二硫醇烷基錫、二丁基錫二月桂酸酯或硫醇二辛基錫中的任一個；偶聯劑還可選自二丙烯酸-1，4-丁二醇酯、二甲基丙烯酸乙二醇酯或丙烯酸丁酯中的任一個，不應局限于上述實施例中列舉的情況。

無菌檢測實施例

向本發(fā)明的樣品1-5的無菌檢測培養(yǎng)管中裝入相應的液體培養(yǎng)基，形成樣品瓶1-5，高溫滅菌后，加入檢測樣品，培養(yǎng)管中的無菌檢測反應膜隨著培養(yǎng)基的ph值變化，其顏色由原始的藍黑色向棕黃色變化；當ph值變化，引起無菌檢測反應膜顏色變化時，表明培養(yǎng)基中有微生物生長，即所加樣品無菌檢測不合格；當無菌檢測反應膜顏色無變化時，表明培養(yǎng)基中無微生物生長，即所加樣品無菌檢測合格。

本發(fā)明中藥品無菌檢測實驗的觀察時間為7天，具體無菌檢測結果見表1。

表1實施例1-5無菌檢測結果

由表1無菌檢測現象及結果可知，本發(fā)明的無菌檢測反應膜附著在無菌檢測培養(yǎng)管中，利用本發(fā)明的無菌檢測方法，對藥品帶菌情況的檢測，無論是檢測時間，還是檢測準確度上都明顯好于現有技術中的渾濁度判斷法。

需要注意的上述實施例僅是本發(fā)明的較佳實施例，并不是全部的實施例，應當理解，上述實施例僅是對本發(fā)明的進一步解釋和說明，并不是用于限制本發(fā)明；凡是在本發(fā)明的構思基礎上，進行的任何不具創(chuàng)造性的簡單修改或替換，均應視為落入本發(fā)明的保護范圍內。