本發(fā)明涉及黃酮類化合物，尤其涉及曲克蘆丁酰胺類化合物及其制備方法和用途，屬藥物化學(xué)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

黃酮是一種多酚類化合物，廣泛存在于高等植物的根、莖、葉、花、果實中，這類化合物不僅對心腦血管以及消化系統(tǒng)異常有著良好的抑制作用和鎮(zhèn)痛作用，而且還具有清除自由基、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗突變、抗菌和調(diào)節(jié)免疫等方面的功能(harborne,jb；williams,ca.advancesinflavonoidresearchsince1992[j].phytochemistry,2000,55,481-504；劉星雨,孫體健,周敏.天然黃酮類化合物的藥理活性及分離提取[j].中國藥物與臨床,2014,14(5),621-624)。但由于其剛性平面結(jié)構(gòu)，分子間排列緊密，使大多數(shù)黃酮類天然產(chǎn)物水溶性或脂溶性較低，導(dǎo)致其生理活性利用率不高，限制了黃酮類天然產(chǎn)物的開發(fā)和應(yīng)用(延璽,劉會青,鄒永青,等.黃酮類化合物生理活性及合成研究進(jìn)展[j].有機(jī)化學(xué),2008,28(9),1534-1544)。改性的方法主要有取代反應(yīng)、mannich反應(yīng)、酯化反應(yīng)、羥基化反應(yīng)和糖基化反應(yīng)等。例如用不同碳鏈長的二溴烷烴與白楊素7-oh位發(fā)生親電取代反應(yīng)，引入活性基團(tuán)后與嗎啡啉、n-甲基哌嗪、哌嗪、n,n-二甲基胺氨解反應(yīng)合成新型白楊素的含氮衍生物(sureshbabuk,haribabut,srinivaspv,etal.synthesisandbiologicalevaluationofnovelc(7)modifiedchrysinanaloguesasantibacterialagents[j].bioorg.med.chem.lett.,2006,16,221-224)。zeng等同樣利用親電取代反應(yīng)合成了具有哌嗪取代基的黃酮類衍生物，體內(nèi)體外顯示了抗腫瘤性(zengs,liuw,nieff,etal.lyg-202,anewflavonoidwithapiperazinesubstitution,showsantitumoreffectsinvivoandinvitro[j].biochem.bioph.res.co.,2009,385,551-556)；babu等通過mannich反應(yīng)用甲醛和一級、二級胺與木蝴蝶素合成了一系列的8-胺甲基衍生物(babuth,ramasubbaraov,ashokk,etal.synthesisandbiologicalevaluationofnovel8-aminomethylatedoroxylinaanaloguesasa-glucosidaseinhibitors[j].bioorg.med.chem.let,2008,18,1659-1662)；bhullar等在丙酮和叔戊醇中，以novozym435催化異槲皮苷與脂肪酸的酯化反應(yīng)，選擇性合成了異槲皮苷-6”-o-酯基衍生物。其酯化產(chǎn)物脂溶性、抗氧化性、抗增殖活性都有了很大的提高(ziaullah；bhullar,khushwants.；warnakulasuriya,sumudun.etal.bhullarks,warnakulasuriyasn,rupasinghehv.biocatalyticsynthesis,structuralelucidation,antioxidantcapacityandtyrosinaseinhibitionactivityoflongchainfattyacidacylatedderivativesofphloridzinandisoquercitrin[j].bioorg.med.chem.let,2013,21(3):684-692)。韓天佼以6種黃酮(白楊素，芹菜素，大豆苷元等)為原料，與氨基磷酸酯在黃酮c-7羥基發(fā)生酯化反應(yīng)，合成的黃酮氨基磷酸酯衍生物經(jīng)hiv活性評價，可能具有抗腫瘤活性(韓天佼，六種黃酮7位氨基磷酸醋衍生物的設(shè)計與合成[d].大連,大連理工大學(xué),2012)；modolo等通過糖基轉(zhuǎn)移酶催化了黃酮和異黃酮進(jìn)行糖基化反應(yīng)。(modololv,lil,panh,etal.crystalstructuresofglycosyltransferaseugt78g1revealthemolecularbasisforglycosylationanddeglycosylationof(iso)flavonoids[j].j.mol.biology,2009,392(5):1292-1302)。

離子液體作為一種綠色溶劑，因具有低蒸氣壓、廣泛的液態(tài)范圍、高離子電導(dǎo)性、高熱穩(wěn)定性和可溶解大多數(shù)化合物等良好的性質(zhì)，被廣泛應(yīng)用于有機(jī)合成中。近年來，離子液體作為溶劑，用于天然產(chǎn)物的改性也有報道，例如katsoura等研究了酶在離子液體[bmim][bf4]做溶劑時催化蘆丁和柚皮苷?；磻?yīng)，離子液體的使用大大提高了反應(yīng)轉(zhuǎn)化率和酶的區(qū)域選擇性(katsouramh,polyderaac,tsironisl,etal.useofionicliquidsasmediaforthebiocatalyticpreparationofflavonoidderivativeswithantioxidantpotency[j].j.biotechnol.,2006,123(4):491-503)。wang報道了離子液體與緩沖溶劑作為共溶劑，有利于酶通過選擇性地水解蘆丁，轉(zhuǎn)化得到異槲皮苷(wang,j,sun,gx,yu,letal.enhancementoftheselectiveenzymaticbiotransformationofrutintoisoquercitrinusinganionicliquidasaco-solvent[j].biores.technol.2012,128:156-163)。用離子液體催化合成曲克蘆丁酰胺類衍生物未見報道。相對于文獻(xiàn)報道的化學(xué)催化和酶催化改性黃酮類化合物而言，以離子液體既做溶劑、又作為催化劑的反應(yīng)體系，不僅能大大節(jié)省催化劑的用量，而且因離子液體制備簡單，價格較低，容易回收等特點，可降低合成成本，簡化后處理操作。用價廉的離子液體作為催化劑的反應(yīng)體系也為黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)修飾提供一條新的途徑。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供系列曲克蘆酰胺類衍生物；另一目的在于提供用離子液體做催化劑和溶劑、反應(yīng)條件溫和、簡單易行、副產(chǎn)物少的曲克蘆丁酰胺類衍生物制備方法。

本發(fā)明所述的曲克蘆丁酰胺類衍生物具有如下結(jié)構(gòu)：

n-(4-氟)苯乙基/芐基曲克蘆丁酰胺衍生物(ⅰ)

含四氫異喹啉曲克蘆丁酰胺類衍生物(ⅱ)

通式i、ii中n代表了亞甲基的個數(shù)，分別為2,3,4,5，6,7,8,10,11。通式i中r’分別是苯乙基、4-氟苯乙基、芐基；r1和r2分別為-h，-och3，相同或不同。

通式i中優(yōu)選如下化合物：

(1)n為3，4，5，7。

(2)n為3，4，5。

(3)n為3，4，5。

通式ii中優(yōu)選如下化合物：

(1)r1＝h，r2＝h，n為3，5，10，

(2)r1＝och3，r2＝och3，n為4，8，

(3)r1＝h，r2＝och3，n為3，5，7。

上述化合物合成路線如下：

n-(4-氟)苯乙基/芐基曲克蘆丁酰胺衍生物(ⅰ)其合成方法通過如下方式實現(xiàn)：

曲克蘆丁與脂肪酸二乙烯酯在枯草桿菌蛋白酶催化下，以吡啶為反應(yīng)介質(zhì)，40℃～60℃反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，過柱分離得到曲克蘆丁乙烯酯。

將不同鏈長的曲克蘆丁乙烯酯在離子液體存在下，分別與苯乙基胺、4-氟-苯乙基胺或芐胺化合物40～70℃反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后有機(jī)溶劑萃取，萃取液減壓濃縮，柱色譜分離，得到n-苯乙基/芐基曲克蘆丁酰胺衍生物(ⅰ)。

曲克蘆丁乙烯酯:胺類化合物摩爾比為1:2～10。

含四氫異喹啉曲克蘆丁酰胺類衍生物(ⅱ)其合成方法通過如下方式實現(xiàn)：

離子液體做反應(yīng)介質(zhì)，曲克蘆丁乙烯酯與1,2,3,4-四氫異喹啉類化合物為反應(yīng)底物，在40～70℃反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，有機(jī)溶劑萃取產(chǎn)物，濃縮后，柱色譜分離，得到含四氫異喹啉曲克蘆丁酰胺類衍生物(ⅱ)。

曲克蘆丁乙烯酯與1，2，3，4-四氫異喹啉類化合物摩爾比為1:1～12。

本專利所述離子液體由陽離子和陰離子組成，陽離子包括吡啶類陽離子

3-甲基咪唑類陽離子三辛基甲基銨陽離子(縮寫toma]⁺)，其中的r分別代表乙基、正丁基、正己基、正辛基；陰離子包括bf4^-、no3^-、pf6^-、tf2n^-(雙三氟甲磺酰亞胺負(fù)離子)、br^-或cl^-。

本發(fā)明優(yōu)點：以離子液體既做溶劑、又作為催化劑的反應(yīng)體系，無需額外添加催化劑、合成產(chǎn)率高，達(dá)70％以上，反應(yīng)工藝簡單、操作簡便，反應(yīng)條件溫和，后處理容易，離子液體容易回收、成本較低；同時，生成的產(chǎn)物具有抗腫瘤活性，對結(jié)腸癌和乳腺癌有較好的抑制活性，具有較好的開發(fā)應(yīng)用價值。

具體實施方式

下面通過實施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的闡述，但并不意味著本發(fā)明的內(nèi)容局限于實施例。

實施例1-1

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁140mg(0.18mmol)，戊二酸二乙烯酯138mg(0.75mmol)，10ml吡啶為溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶120mg后，放入50℃恒溫振蕩器中反應(yīng)，轉(zhuǎn)速250rev·min^-1。反應(yīng)72h結(jié)束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。柱色譜分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(15:3.6:0.5v/v)，得到黃色固體曲克蘆丁戊二酰乙烯酯103mg(0.12mmol)，產(chǎn)率65％。

¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm)：12.49(s,1h,oh5),7.85(s,1h,h2’),7.74(d,1h,j＝7.2hz,h6’),7.22(dd,1h,j＝6.4hz,j＝14.1hz,-och＝),7.17(d,1h,j＝6.6hz,h5’),6.75(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.35(d,1h,j＝7.6hz,h1”),4.89(m,1h,och＝ch2),4.65(m,1h,och＝ch2),4.47(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.32(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.12-4.05(m,4h,hofa),3.75(m,4h,hofb),3.71-3.04(10h,hofrhamnoglucosyl),2.47(m,2h,-ch2-cooch＝ch2),2.26(m,2h,-ch2-co-troxerutin),1.80(m,2h,otherch2ofglutaridioylpart),0.97(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3385(oh),1732(c＝o),1645(c＝c)；esi-ms(m/z):905.1(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯95mg(0.11mmol)、苯乙胺73mg(0.66mmol)，[omim]bf4(1-正辛基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽)10ml，50℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)24h。乙酸乙酯萃取，減壓濃縮后，柱層析分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)，得到含苯乙胺的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體79.1mg，產(chǎn)率為75％。

yellowpowder,rf＝0.21,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.82-7.83(m,1h,h2’),7.67-7.73(m,1h,h6’),7.10-7.24(m,6h,1hofh5’,5hofphenethylamine),6.68(s,1h,h8),6.36(s,1h,h6),5.31-5.36(m,1h,h1”),4.35-4.37(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.24-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.06-4.08(m,4h,hofa),3.66-3.74(m,4h,hofb),3.01-3.74(m,12h,10hofrhamnoglucosyl,2hofphenethylamine),2.63-2.67(t,j＝7.2hz,2h,hofphenethylamine),2.04-2.26(m,4h,2hofch2coo-troxerutin,2hofch2co-phenethylamine),1.67-1.71(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.89-0.91(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr):3380cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1454cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):982.3(m+na)⁺.

實施例1-2

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯95mg(0.11mmol)、4-氟苯乙胺153mg(1.10mmol)，[omim]br(1-正辛基-3-甲基咪唑溴鹽)10ml，50℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)24h。乙酸乙酯萃取，減壓濃縮后，柱層析分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)，得到含4-氟苯乙胺的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體91.4mg，產(chǎn)率為85％。

yellowpowder,rf＝0.3,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.82-7.83(m,1h,h2’),7.66-7.73(m,1h,h6’),7.00-7.19(m,5h,1hofh5’,5hofphenethylamine),6.66-6.68(m,1h,h8),6.35-6.36(m,1h,h6),5.32-5.37(m,1h,h1”),4.35-4.38(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.24-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.02-4.08(m,4h,hofa),3.67-3.76(m,4h,hofb),3.01-3.76(m,12h,10hofrhamnoglucosyl,2hofphenethylamine),2.62-2.66(t,j＝7.0hz,2h,hofphenethylamine),2.04-2.56(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-phenethylamine),1.65-1.73(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.90-0.91(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr):3334cm^-1(oh),1734cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1456cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1000.3(m+na)⁺.

實施例1-3

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁140mg(0.18mmol)，壬二酸二乙烯酯180mg(0.75mmol)，10ml吡啶為溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶175mg后，放入60℃恒溫振蕩器中反應(yīng)，轉(zhuǎn)速250rev·min^-1。反應(yīng)148h結(jié)束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。后處理同上。得到黃色固體曲克蘆丁壬二酰乙烯酯101mg(0.10mmol)，產(chǎn)率57％。

¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm):12.50(s,1h,oh5),7.85(s,1h,h2’),7.75(d,1h,j＝8.4hz,h6’),7.21(dd,1h,j＝6.0hz,j＝13.8hz,-och＝),7.15(d,1h,j＝8.4hz,h5’),6.75(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.41(d,1h,j＝10.0hz,h1”),4.91(m,1h,och＝ch2),4.61(m,1h,och＝ch2),4.41(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.32(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.12-4.06(m,4h,hofa),3.75(m,4h,hofb),3.71-3.00(10h,hofrhamnoglucosyl),2.39(t,2h,j＝7.2hz,-ch2-cooch＝ch2),2.34(t,2h,j＝7.2hz,-ch2-co-troxerutin),1.52,1.25(m,10h,otherch2ofnonoanedioylpart),0.99(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3377(oh),1735(c＝o),1647(c＝c)；esi-ms(m/z):961.3(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁壬二酰乙烯酯101.4mg(0.11mmol)、4-氟苯乙胺123mg(0.88mmol)，[bmim]br(1-正丁基-3-甲基咪唑溴鹽)10ml，50℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)36h。乙酸乙酯萃取，減壓濃縮后，柱層析分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。淡黃色固體79.5mg，產(chǎn)率為70％。

yellowpowder,rf＝0.32,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.81(s,1h,h2’),7.63-7.70(m,1h,h6’),6.97-7.17(m,6h,1hofh5’,5hofphenethylamine),6.61(s,1h,h8),6.32(s,1h,h6),5.28-5.34(m,1h,h1”),4.35-4.36(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.23-4.26(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.00-4.06(m,4h,hofa),3.67-3.75(m,4h,hofb),3.01-3.75(m,12h,10hofrhamnoglucosyl,2hofphenethylamine),2.61-2.65(t,j＝6.6hz,2h,hofphenethylamine),1.90-2.28(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-phenethylamine),1.01-1.45(m,10h,otherch2ofazelaoylpart),0.89-0.91(d,j＝5.6hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr):3334cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1456cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1056.4(m+na)⁺.

實施例1-4

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯95mg(0.11mmol)、卞胺117mg(1.10mmol)，[opy]br(n-正辛基吡啶溴鹽)10ml，60℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)24h。乙酸乙酯萃取，減壓濃縮后，柱層析分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)，得到含卞胺的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體81.1mg，產(chǎn)率為78％。

yellowpowder,rf＝0.29,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):¹hnmr(400mhz,dmso-d6,δppm):7.81(s,1h,h2’),7.63-7.70(m,1h,h6’),7.23-7.27(m,2h,hofbenzylamine)7.16-7.18(m,3h,1hofh5’,2hofbenzylamine),7.07-7.09(m,1h,hofbenzylamine),6.63(s,1h,hofh8),6.32-6.33(d,j＝2.0hz,1h,h6),5.29-5.34(m,1h,h1”),4.32-4.37(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.20-4.26(m,4h,1hofh1”’,1hofbacylated,2hofbenzylamine),4.02-4.05(m,4h,hofa),3.67-3.75(m,4h,hofb),3.01-3.75(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.09-2.34(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-benzylamine),1.73-1.80(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.88-0.90(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr):3334cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1456cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):968.3(m+na)⁺.

實施例1-5

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯95mg(0.11mmol)、卞胺117mg(1.10mmol)，[hmim]bf4(1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽)10ml，50℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)24h。后處理同上。得到含卞胺的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體85.2mg，產(chǎn)率為82％。

數(shù)據(jù)同實施例1-4。

實施例2-1

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯190mg(0.22mmol)、1,2,3,4-四氫異喹啉292.8mg(2.20mmol)，[omim]br20ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)24h。乙酸乙酯萃取，減壓旋蒸，除去大部分有機(jī)溶劑，柱層析分離得到產(chǎn)品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。得到含四氫異喹啉的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體產(chǎn)物160mg，產(chǎn)率為75％。

yellowsolid,rf＝0.1,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.81-7.83(m,1h,h2’),7.67-7.72(m,1h,h6’),7.08-7.12(m,5h,1hofh5’,4hoftetrahydroisoquinoline),6.69(s,1h,h8),6.36(s,1h,h6),5.33-5.37(m,1h,h1”),4.52-4.53(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.34-4.43(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.24-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.02-4.08(m,4h,hofa),3.70-3.78(m,4h,hofb),3.54-3.60(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),3.01-3.67(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.71-2.75(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.36-2.40(m,4h,2hofch2coo-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.73-1.78(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.90-0.91(d,j＝4.8hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.3(c＝o),171.0(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),156.9(c-5),151.4(c-2),150.7(c-4’),147.4(c-3’),135.2(tetrahydroisoquinoline),134.2(tetrahydroisoquinoline),133.7(c-3),128.9(tetrahydroisoquinoline),128.8(tetrahydroisoquinoline),126.8(tetrahydroisoquinoline),126.6(tetrahydroisoquinoline),123.3(c-1’),122.7(c-6’),115.3(c-5’),113.4(c-2’),105.5(c-10),101.7(c-1”),101.4(c-1”’),98.8(c-6),93.3(c-8),76.8(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),71.0(c-2”’),70.9(c-4”),70.8(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.4(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.7(c-b),46.7(tetrahydroisoquinoline),43.9(tetrahydroisoquinoline),42.9(tetrahydroisoquinoline),33.3((ch2)n),32.3((ch2)n),29.2((ch2)n),18.2(c-6”’)；ir(kbr):3369cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1452cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):995(m+na)⁺.

實施例2-2

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁140mg(0.18mmol)，十二二酸二乙烯酯172mg(0.75mmol)，10ml吡啶為溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶120mg后，放入50℃恒溫振蕩器中反應(yīng)，轉(zhuǎn)速250rev·min^-1。反應(yīng)96h結(jié)束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。柱色譜分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(15:3.6:0.5v/v)，得到黃色固體曲克蘆丁十二二酰乙烯酯89mg(0.092mmol)，產(chǎn)率51％。

yellowpowder，,rf0.34；¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm):12.50(s,1h,oh5),7.85(s,1h,h2’),7.74(d,1h,j＝8.7hz,h6’),7.22(dd,1h,j＝6.2hz,j＝14.0hz,-och＝),7.15(d,1h,j＝8.8hz,h5’),6.75(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.38(d,1h,j＝6.0hz,h1”),4.92(m,1h,och＝ch2),4.60(m,1h,och＝ch2),4.42(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.32(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.13-4.06(m,4h,hofa),3.75(m,4h,hofb),3.70-3.04(10h,hofrhamnoglucosyl),2.41(m,2h,-ch2-cooch＝ch2),2.33(m,2h,-ch2-co-troxerutin),1.52,1.21(m,16h,otherch2oftridecanoylpart),0.96(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3392(oh),1735(c＝o),1647(c＝c)；esi-ms(m/z):1003.3(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁十二二酰乙烯酯212.3mg(0.22mmol)、1,2,3,4-四氫異喹啉176mg(1.32mmol)，[omim]no320ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)48h。乙酸乙酯萃取，減壓旋蒸，除去大部分有機(jī)溶劑，柱層析分離得到產(chǎn)品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。淡黃色固體產(chǎn)物176mg，產(chǎn)率為75％。

yellowsolid,rf＝0.23,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.87(s,1h,h2’),7.72-7.79(m,1h,h6’),7.13-7.18(m,5h,1hofh5’,4hoftetrahydroisoquinoline),6.72(s,1h,h8),6.39(s,1h,h6),5.36-5.41(m,1h,h1”),4.58-4.62(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.35-4.44(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.28-4.32(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.07-4.12(m,4h,hofa),3.74-3.82(m,4h,hofb),3.63-3.66(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),3.05-3.73(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.75-2.84(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.29-2.36(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.16-1.49(m,16h,otherch2ofdodecanoylpart),0.95-0.96(d,j＝6hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.8(c-4),173.8(c＝o),172.2(c＝o),165.0(c-7),160.8(c-9),156.8(c-5),151.4(c-2),150.7(c-4’),147.8(c-3’),135.1(tetrahydroisoquinoline),134.2(tetrahydroisoquinoline),133.6(c-3),128.8(tetrahydroisoquinoline),127.0(tetrahydroisoquinoline),126.8(tetrahydroisoquinoline),126.6(tetrahydroisoquinoline),123.7(c-1’),122.6(c-6’),115.4(c-5’),114.9(c-2’),105.3(c-10),101.9(c-1”),101.2(c-1”’),98.7(c-6),93.3(c-8),76.5(c-3”),76.1(c-5”),74.3(c-2”),72.0(c-4”’),70.8(c-3”’),70.7(c-2”’),70.6(c-4”),70.5(c-a),70.4(c-a),68.6(c-5”’),67.5(c-6”),67.4(c-a),62.9(c-b),59.8(c-b),59.6(c-b),47.1(tetrahydroisoquinoline),44.0(tetrahydroisoquinoline),43.2(tetrahydroisoquinoline),33.9((ch2)n),33.2((ch2)n),32.9((ch2)n),31.1((ch2)n),29.2((ch2)n),29.0((ch2)n),28.8((ch2)n),28.2((ch2)n),25.1((ch2)n),24.7((ch2)n),17.9(c-6”’)；ir(kbr):3369cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1456cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1092.8(m+na)⁺.

實施例2-3

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁140mg(0.18mmol)，已二酸二乙烯酯172mg(0.75mmol)，10ml吡啶為溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶120mg后，放入55℃恒溫振蕩器中反應(yīng)，轉(zhuǎn)速250rev·min^-1。反應(yīng)96h結(jié)束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。柱色譜分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(15:3.6:0.5v/v)，得到黃色固體曲克蘆丁己二酰乙烯酯96.8mg(0.108mmol)，產(chǎn)率60％。

yellowpowder,rf0.32；¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm):12.49(s,1h,oh5),7.84(s,1h,h2’),7.73(d,1h,j＝7.2hz,h6’),7.20(dd,1h,j＝6.24hz,j＝14.0hz,-och＝),7.14(d,1h,j＝7.6hz,h5’),6.73(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.34(d,1h,j＝7.3hz,h1”),4.89(m,1h,och＝ch2),4.64(m,1h,och＝ch2),4.40(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.31(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.12-4.06(m,4h,hofa),3.74(m,4h,hofb),3.7-3.1(10h,hofrhamnoglucosyl),2.44(m,2h,-ch2-cooch＝ch2),2.38(m,2h,-ch2-co-troxerutin),1.58(m,4h,otherch2ofhexanedioylpart),0.99(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3412(oh),1726(c＝o),1648(c＝c)；esi-ms(m/z):919.1(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁已二酰乙烯酯193mg(0.22mmol)、6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉424.8mg(2.20mmol)，[opy]bf420ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)24h。乙酸乙酯萃取，減壓旋蒸，除去大部分有機(jī)溶劑，柱層析分離得到產(chǎn)品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。得到含雙二甲氧基四氫異喹啉的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體產(chǎn)物165.5mg，產(chǎn)率為72％。

yellowsolid,rf＝0.15,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.82-7.84(m,1h,h2’),7.66-7.72(m,1h,h6’),7.09-7.12(m,1h,h5’),6.67-6.71(m,3h,1hofh8,2hoftetrahydroisoquinoline),6.35(s,1h,h6),5.32-5.37(m,1h,h1”),4.43-4.47(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.32-4.37(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.23-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.02-4.08(m,4h,hofa),3.72-3.73(m,4h,hofb),3.65-3.66(m,6h,hoftetrahydroisoquinoline-och3),3.53-3.57(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),3.00-3.66(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.60-2.68(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.29-2.38(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.43-1.58(m,4h,otherch2ofhexanadioylpart),0.90-0.91(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.4(c＝o),171.2(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),156.9(c-5),151.5(c-2),150.8(c-4’),148.1(tetrahydroisoquinoline),147.7(tetrahydroisoquinoline),147.5(c-3’),134.2(c-3),126.9(tetrahydroisoquinoline),125.8(tetrahydroisoquinoline),123.4(c-1’),122.8(c-6’),115.5(c-5’),113.8(c-2’),112.2(tetrahydroisoquinoline),110.4(tetrahydroisoquinoline),105.5(c-10),101.9(c-1”),101.4(c-1”’),98.9(c-6),93.3(c-8),76.8(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),70.9(c-2”’),70.8(c-4”),70.8(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.4(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.8(c-b),55.9(-och3),46.6(tetrahydroisoquinoline),43.7(tetrahydroisoquinoline),43.1(tetrahydroisoquinoline),33.7((ch2)n),32.5((ch2)n),28.8((ch2)n),27.9((ch2)n),18.1(c-6”’)；ir(kbr):3367cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1452cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1069(m+na)⁺.

實施例2-4

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁282mg(0.38mmol)，癸二酸二乙烯酯378mg(1.5mmol)，10ml吡啶作溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶300mg后，放入60℃恒溫振蕩器中反應(yīng)，轉(zhuǎn)速250rev·min^-1。反應(yīng)120h結(jié)束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。純化同上。得到黃色固體曲克蘆丁癸二酰乙烯酯200mg(0.21mmol)，產(chǎn)率55％。

¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm):12.49(s,1h,oh5),7.84(s,1h,h2’),7.72(d,1h,j＝7.0hz,h6’),7.20(dd,1h,j＝6.21hz,j＝14.0hz,-och＝),7.14(d,1h,j＝7.4hz,h5’),6.73(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.34(d,1h,j＝7.3hz,h1”),4.89(m,1h,och＝ch2),4.63(m,1h,och＝ch2),4.39(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.31(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.12-4.06(m,4h,hofa),3.74(m,4h,hofb),3.7-3.1(10h,hofrhamnoglucosyl),2.40(t,2h,j＝7.2hz,-ch2-cooch＝ch2),2.33(t,2h,j＝6.9hz,-ch2-co-troxerutin),1.58,1.22(m,12h,otherch2ofdecanedioylpart),0.99(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3410(oh),1728(c＝o),1649(c＝c)；esi-ms(m/z):975.2(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁癸二酰乙烯酯209mg(0.22mmol)、6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉424.8mg(2.20mmol)，[bpy]cl(n-正丁基吡啶氯鹽)20ml，70℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)36h。乙酸乙酯萃取，減壓旋蒸，除去大部分有機(jī)溶劑，柱層析分離得到產(chǎn)品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。淡黃色固體產(chǎn)物181.3mg，產(chǎn)率為75％。

yellowsolid,rf＝0.2,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.83(s,1h,h2’),7.67-7.74(m,1h,h6’),7.09-7.13(s,1h,h5’),6.68-6.73(m,3h,1hofh8,2hoftetrahydroisoquinoline),6.35(s,1h,h6),5.32-5.38(m,1h,h1”),4.43-4.48(m,2h,hoftetrahydroisoquinolined),4.35-4.37(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.24-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.03-4.08(m,4h,hofa),3.71-3.73(m,4h,hofb),3.67-3.68(m,6h,hoftetrahydroisoquinoline-och3),3.53-3.58(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),3.01-3.68(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.61-2.70(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.26-2.33(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.12-1.46(m,12h,otherch2ofdecanedioylpart),0.91-0.92(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.4(c＝o),171.5(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),156.9(c-5),151.5(c-2),150.8(c-4’),147.8(tetrahydroisoquinoline),147.7(tetrahydroisoquinoline),147.5(c-3’),134.3(c-3),126.9(tetrahydroisoquinoline),125.8(tetrahydroisoquinoline),123.7(c-1’),123.0(c-6’),115.5(c-5’),113.5(c-2’),112.2(tetrahydroisoquinoline),110.4(tetrahydroisoquinoline),105.5(c-10),101.9(c-1”),101.3(c-1”’),98.9(c-6),93.3(c-8),76.9(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),70.9(c-2”’),70.8(c-4”),70.6(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.5(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.8(c-b),56.0(-och3),46.7(tetrahydroisoquinoline),43.7(tetrahydroisoquinoline),43.2(tetrahydroisoquinoline),33.9((ch2)n),32.9((ch2)n),29.2((ch2)n),29.1((ch2)n),28.9((ch2)n),27.9((ch2)n),25.2((ch2)n),24.9((ch2)n),18.1(c-6”’)；ir(kbr):3369cm^-1(oh),1730cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1452cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1125(m+na)⁺.

實施例2-5

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯190mg(0.22mmol)、6-甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉359mg(2.20mmol)，[toma][tf2n](n-己基吡啶雙三氟甲磺酰亞胺鹽)20ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)30h。乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮后，柱層析分離得到產(chǎn)品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)，得到含甲氧基四氫異喹啉的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體產(chǎn)物155mg，產(chǎn)率為71％。

yellowsolid,rf＝0.13,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):¹hnmr(400mhz,dmso-d6,δppm):7.81-7.83(m,1h,h2’),7.65-7.71(m,1h,h6’),7.00-7.10(m,2h,1hofh5’,1hoftetrahydroisoquinoline),6.61-6.74(m,3h,1hofh8,2hoftetrahydroisoquinoline),6.34(s,1h,h6),5.32-5.38(m,1h,h1”),4.41-4.54(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.31-4.41(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.23-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),3.99-4.13(m,4h,hofa),3.68-3.82(m,4h,hofb),3.59-3.68(m,3h,hoftetrahydroisoquinoline-och3),3.48-3.59(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.96-3.73(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.66-2.76(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.25-2.45(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.66-1.86(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.90(s,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.3(c＝o),170.9(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),158.1(tetrahydroisoquinoline),156.9(c-5),151.5(c-2),150.8(c-4’),147.5(c-3’),136.3(tetrahydroisoquinoline),134.2(c-3),127.9(tetrahydroisoquinoline),126.1(tetrahydroisoquinoline),123.4(c-1’),122.8(c-6’),115.4(c-5’),113.7(c-2’),113.4(tetrahydroisoquinoline),112.9(tetrahydroisoquinoline),105.5(c-10),101.9(c-1”),101.3(c-1”’),98.8(c-6),93.3(c-8),76.8(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),71.0(c-2”’),70.8(c-4”),70.6(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.4(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.7(c-b),55.4(-och3),46.2(tetrahydroisoquinoline),43.4(tetrahydroisoquinoline),42.8(tetrahydroisoquinoline),33.3((ch2)n),32.0((ch2)n),29.5((ch2)n),18.2(c-6”’)；ir(kbr):3367cm^-1(oh),1728cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1455cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1024.8(m+na)⁺.

實施例2-6

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁壬二酰乙烯酯202.8mg(0.22mmol)、6-甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉359mg(2.20mmol)，[hpy]bf4(n-正己基吡啶四氟硼酸鹽)20ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應(yīng)36h。乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮后，柱層析分離得到產(chǎn)品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。淡黃色固體產(chǎn)物170mg，產(chǎn)率為73％。

yellowsolid,rf＝0.18,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):¹hnmr(400mhz,dmso-d6,δppm):7.82(s,1h,h2’),7.64-7.71(m,1h,h6’),6.99-7.09(m,2h,1hofh5’,1hoftetrahydroisoquinoline),6.64-6.71(m,3h,1hofh8,2hoftetrahydroisoquinoline),6.33(s,1h,h6),5.30-5.35(m,1h,h1”),4.41-4.45(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.32-4.40(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.20-4.29(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.04-4.10(m,4h,hofa),3.68-3.80(m,4h,hofb),3.62-3.68(m,3h,hoftetrahydroisoquinoline-och3),3.48-3.59(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.99-3.66(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.62-2.77(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.22-2.26(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.02-1.52(m,10h,otherch2ofazelaoylpart),0.89-0.91(d,j＝5.9hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.4(c＝o),171.5(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),158.1(tetrahydroisoquinoline),156.9(c-5),151.5(c-2),150.8(c-4’),147.5(c-3’),136.3(tetrahydroisoquinoline),134.2(c-3),127.8(tetrahydroisoquinoline),126.2(tetrahydroisoquinoline),123.7(c-1’),122.8(c-6’),115.4(c-5’),113.5(c-2’),113.5(tetrahydroisoquinoline),112.9(tetrahydroisoquinoline),105.5(c-10),101.9(c-1”),101.3(c-1”’),98.8(c-6),93.3(c-8),76.8(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),70.9(c-2”’),70.8(c-4”),70.6(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.4(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.8(c-b),55.4(-och3),46.4(tetrahydroisoquinoline),43.4(tetrahydroisoquinoline),42.9(tetrahydroisoquinoline),33.8((ch2)n),32.9((ch2)n),29.6((ch2)n),29.0((ch2)n),28.8((ch2)n),25.2((ch2)n),24.8((ch2)n),18.2(c-6”’)；ir(kbr):3369cm^-1(oh),1730cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1452cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1080.8(m+na)⁺.

生物活性測試：采用mtt法測定了曲克蘆丁及化合物(ⅰ)和(ⅱ)對ht-29(人結(jié)腸癌細(xì)胞),mcf-7(人乳腺癌細(xì)胞)的細(xì)胞毒活性。

部分測試結(jié)果如下表：

以上數(shù)據(jù)顯示了化合物(ⅰ)和(ⅱ)對ht-29、mcf-7有明顯的抑制作用，優(yōu)于曲克蘆丁，可將其作為抗結(jié)腸癌和乳腺癌潛在藥物開發(fā)。