本發(fā)明涉及一種燈盞花素中藥提取物的制備方法。技術(shù)背景燈盞花又名燈盞細(xì)辛、東菊，屬菊科植物短葶飛蓬erigeronbreviscapus(vant.)hand-mazz，主要分布于我國(guó)西南地區(qū)，尤以云南較多。燈盞花素是從燈盞細(xì)辛中提取的黃酮類(lèi)有效成分，其主要有效成分是燈盞乙素。燈盞花素具有增加血流量、改善微循環(huán)、擴(kuò)張血管、降低血粘度等作用，臨床已廣泛用于治療腦梗塞、缺血性心臟病、眩暈、老年性癡呆及腎病綜合征。目前燈盞花素主要以乙醇為溶劑提取。如：在現(xiàn)行《中華人民共和國(guó)藥典》2015版一部收載的兩種燈盞花素提取工藝，均為乙醇提取工藝，具體制法為：第一種：取燈盞細(xì)辛，粉碎成粗粉，加75％乙醇(6倍、4倍、4倍)加熱回流提取三次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液濃縮至無(wú)醇味，加等體積水?dāng)噭?，靜置過(guò)夜，濾過(guò)，濾液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(聚苯乙烯型)柱，用水洗脫，收集洗脫液，濃縮，沉淀，濾過(guò)，沉淀用10％硫酸溶液調(diào)ph值至2.0～2.5，靜置過(guò)夜，濾過(guò)，沉淀用乙醇洗滌，再用水洗至中性，干燥，干燥品用乙醇精制，重結(jié)晶，結(jié)晶用乙醇、丙酮洗滌，干燥，粉碎，混合，即得。第二種：取燈盞細(xì)辛粉碎成粗粉，加入2～6倍量75％乙醇，加熱回流提取三次，每次3小時(shí)，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度為1.2(80℃)的清膏，加水適量，攪勻，加熱至80℃，用5％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至8，攪拌使溶解，靜置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液用10％硫酸溶液調(diào)節(jié)ph值至1～3，攪拌，靜置48小時(shí)，抽濾，沉淀用水洗至中性，或先用3～4倍量乙醇洗2～3次，再用水洗滌至中性。加入20倍量85％～95％乙醇及1％量的活性炭，或加入適量甲醇溶解后，加0.1％量的活性炭，加熱回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至原體積的60％～80％，靜置使析出結(jié)晶，濾過(guò)，將所得結(jié)晶用45％乙醇洗滌5次，于50～80℃，減壓真空干燥。取結(jié)晶物，加水適量，用30％精氨酸溶液或10％碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至7.0～7.5，加熱使溶解，離心，取上清液，濾過(guò)，濾液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂(聚苯乙烯型)柱，用水洗脫，收集洗脫液，濾過(guò)；或用5％鹽酸調(diào)節(jié)ph值至1～3，靜置，濾過(guò)，沉淀用水洗至中性，取沉淀，加入適量的水?dāng)噭?，加熱，?0％～30％磷酸氫二鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至6.5～7，煮沸，冷卻至35～55℃；減壓濃縮，加入8～10倍量的丙酮，攪勻，靜置，抽濾，用丙酮洗滌沉淀。取沉淀，加入適量50％～70％丙酮溶液拾成混懸液，用10％鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph值至1～2，靜置，抽濾，取沉淀，用注射用水洗至中性，再用90％乙醇洗滌，烘干，即得。上述的兩種制備方法，燈盞花素原料精制時(shí)均需要使用丙酮，而丙酮對(duì)人體有較大的毒副作用，且使用丙酮后燈盞花素中會(huì)有部分丙酮?dú)埩?，患者使用后易產(chǎn)生不良反應(yīng)。如果不使用丙酮精制，按上述兩種方法，所生產(chǎn)的燈盞花素含量很難達(dá)到藥典要求的90％以上。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種只使用乙醇不使用丙酮，且用大孔樹(shù)脂柱吸附一次后，即能夠生產(chǎn)出含量在90％以上符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的合格的燈盞花素中藥提取物精制的制備方法。本發(fā)明所述的燈盞花素中藥提取物精制的制備方法由以下步驟組成：一、溶解：取含量70％以上的燈盞花素原料，加純化水配制成燈盞花素濃度在1％～5％的混懸液，加10～30％的磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀或檸檬酸鈉溶液中的一種或多種，調(diào)ph值至7，攪拌溶解，過(guò)濾；二、大孔樹(shù)脂柱吸附：將步驟一過(guò)濾后的藥液上hpd722大孔樹(shù)脂柱吸附，用純化水洗脫，流速為1～2倍柱體積，開(kāi)始流出的棕色液體棄之不要，從黃色的洗脫液開(kāi)始收集，洗至洗脫液接近無(wú)色；三、濃縮：將收集好的洗脫液減壓濃縮至洗脫液體積的20至40分之一；四、成鹽：將步驟三得到的濃縮液加入3倍以上體積的乙醇中，攪拌，靜置過(guò)夜；五、酸沉：將步驟四所得的混懸液過(guò)濾，沉淀物用乙醇洗滌一次，加入步驟四濃縮液體積2～3倍的30～70％乙醇中，攪拌，加酸將ph值調(diào)至1～3，靜置；六、過(guò)濾、干燥：將步驟五的混懸液過(guò)濾，用乙醇洗滌一次，再用純化水洗至中性，干燥，即可得到符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的燈盞花素中藥提取物。步驟二中采用特定的hpd722大孔樹(shù)脂，hpd722大孔樹(shù)脂對(duì)黃酮類(lèi)物質(zhì)分離效果較好，并且結(jié)合本發(fā)明的其它步驟，能夠?qū)崿F(xiàn)大孔樹(shù)脂柱吸附一次后，即能夠生產(chǎn)出含量在90％以上符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的合格的燈盞花素中藥提取物。步驟四中所用乙醇的優(yōu)選量是3～6倍。步驟五所使用的酸主要用于調(diào)整ph值，常用的酸都可以使用，如：鹽酸、硝酸、硫酸、磷酸等無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸如冰醋酸中的一種或幾種。酸液濃度無(wú)特別要求，但不宜過(guò)高，鹽酸、硝酸、硫酸的濃度不宜高于10％，磷酸的濃度不宜高于30％，對(duì)有機(jī)酸酸度沒(méi)有要求。否則會(huì)破壞燈盞花素分子結(jié)構(gòu)。本發(fā)明與現(xiàn)行工藝的區(qū)別在于：現(xiàn)行工藝采用碳酸氫鈉或l-精氨酸溶解上柱，因兩種物料極性較強(qiáng)，柱分離時(shí)對(duì)其他黃酮類(lèi)雜質(zhì)分離效果較差，大孔樹(shù)脂吸附后原料還需要使用丙酮將其他黃酮類(lèi)雜質(zhì)除去，才能確保燈盞花素含量符合國(guó)家藥典90％以上的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明的獨(dú)特之處在于使用極性較弱的磷酸氫二鈉(或磷酸氫二鉀、檸檬酸鈉)溶解燈盞花素，而大孔樹(shù)脂也采用弱極性的hpd722，柱分離時(shí)大孔樹(shù)脂對(duì)燈盞花素吸附效果好，相對(duì)于現(xiàn)行工藝，可有效的去除其他黃酮類(lèi)雜質(zhì)60％以上，洗脫液濃縮、成鹽、酸沉后含量即可符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。工藝簡(jiǎn)單，由于沒(méi)有采用丙酮，大大地降低了對(duì)人體的危害。雜質(zhì)的鑒別及定量分析：分別取兩組樣品，每組均為燈盞花素中藥提取物1克，其中樣品1為實(shí)施例1所得產(chǎn)品，樣品2為現(xiàn)有技術(shù)得到的燈盞花素中藥提取物。樣品2的制備方法為：取10kg含量為76％的燈盞花素粗品，加入100kg的純化水中，用10％碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至7.0，攪拌溶解，離心，取上清液，濾過(guò)，濾液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，用純化水洗脫，開(kāi)始階段棕色的洗脫液不要，收集黃色洗脫液，用純化水洗脫至洗脫液基本無(wú)色，收集洗脫液濃縮至150升，加入600升的乙醇中，靜置，過(guò)濾，用乙醇洗滌一次，將沉淀加入400升50％的乙醇中，用5％鹽酸調(diào)節(jié)ph值至1，攪拌，靜置，濾過(guò)，沉淀用90％乙醇洗滌，再用純化水洗至中性，烘干，即得。取樣，按2015版藥典項(xiàng)下燈盞花素質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)，燈盞花素含量88.6％。燈盞花素含量及雜質(zhì)對(duì)比分析：1、燈盞花素含量：分別取1、2樣品，按中國(guó)藥典項(xiàng)下燈盞花素檢測(cè)方法，檢測(cè)結(jié)果如下：2、雜質(zhì)對(duì)比分析：分別取1、2樣品，以蘆丁為對(duì)照品，用紫外分光光度法測(cè)定總黃酮含量，檢測(cè)結(jié)果如下：樣品序號(hào)總黃酮含量196.3％295.9％其他黃酮類(lèi)雜質(zhì)含量：附圖說(shuō)明圖1為本發(fā)明實(shí)施例1高效液相色譜圖。圖2為樣品2高效液相色譜圖。圖1中：序號(hào)保留時(shí)間峰面積備注12.5013.05622.7385.41234.8697.538410.2693.654513.20815.479615.5171689.056燈盞花素吸收峰，含量93.7％716.9982.652836.8182.165圖2中：具體實(shí)施方式實(shí)施例1：取10kg含量為76％的燈盞花素粗品，加200kg純化水?dāng)嚢?，?0％磷酸氫二鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至7.0，攪拌溶解，離心，取上清液，濾過(guò)，濾液通過(guò)hpd722大孔吸附樹(shù)脂柱，用純化水洗脫，開(kāi)始階段深棕色的洗脫液不要，收集黃色洗脫液，繼續(xù)用純化水洗脫至洗脫液基本無(wú)色，收集洗脫液濃縮至150升，加入600升的乙醇中，靜置過(guò)夜，過(guò)濾，用乙醇洗滌一次，將沉淀加入400升50％的乙醇中，用5％鹽酸調(diào)節(jié)ph值至1，攪拌，靜置，濾過(guò)，沉淀用90％乙醇洗滌，再用純化水水洗至中性，烘干，即得。取樣，按2015版藥典項(xiàng)下燈盞花素標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)，燈盞花素含量93.7％。文中所述的乙醇百分比為體積百分比，其它均為重量百分比。當(dāng)前第1頁(yè)12