本發(fā)明屬于植物種子萃取
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體涉及一種超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法。
背景技術(shù):
:女貞子為木犀科植物女貞ligustrumlucidumait.的干燥成熟果實(shí),始載于東漢《神農(nóng)本草經(jīng)》列為上品,滋補(bǔ)肝腎,明目烏發(fā),用于肝腎陰虛,眩暈耳嗚,腰膝酸軟,須發(fā)早白,目暗不明,內(nèi)熱消渴,骨蒸潮熱。主要含有萜類、黃酮類、苯乙醇苷類、揮發(fā)油、磷脂、多糖、脂肪酸、氨基酸、微量元素等化學(xué)成分,具有保肝、免疫調(diào)節(jié)、抗動(dòng)脈粥樣硬化、降血糖、降血脂、抗炎、抗衰老,抗腫瘤等藥理作用。齊墩果酸是女貞子中主要的活性成分,毒性很低,具有多種生物活性,如抗病毒,消炎,鎮(zhèn)靜,增強(qiáng)免疫,控制血小板凝集,降血脂,降糖,保肝等多種藥理作用,在非處方藥齊墩果酸片和齊墩果酸膠囊等應(yīng)用廣泛,且效果顯著。女貞子產(chǎn)量大,成本低,含有較高含量的齊墩果酸,是極具開(kāi)發(fā)前景的藥食同源藥材。目前,女貞子萃取工藝主要為溶劑萃取法,存在著溶劑用量大、溶劑殘留、污染環(huán)境、萃取時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn)。雖然,關(guān)于超臨界萃取女貞子中齊墩果酸的方法也有報(bào)道,如,雷雪發(fā)表的碩士論文《超臨界co2萃取女貞子工藝研究》中分別考察了夾帶劑種類、萃取壓力、溫度、萃取時(shí)間、二氧化碳流量、物料粒度、夾帶劑用量、乙醇濃度、預(yù)處理等單因素對(duì)萃取結(jié)果的影響,得到齊墩果酸的最佳萃取率為0.55%,可見(jiàn)在添加夾帶劑的情況下所得收率不甚理想,且后續(xù)處理較為繁瑣,如何在不添加夾帶劑的情況下,提高齊墩果酸的萃取率仍是一大難題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題,本發(fā)明提供了一種超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法。本發(fā)明提供的超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法無(wú)需使用有機(jī)溶劑,不存在后續(xù)處理,提取效率高,顏色狀態(tài)較好,工藝穩(wěn)定,重復(fù)性好。本發(fā)明提供了一種超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法,包括以下步驟:(1)將女貞子粉碎后過(guò)篩50目,得女貞子粉末;(2)取步驟(1)所得女貞子粉末180-220g,加入至超臨界二氧化碳萃取裝置的萃取釜中,控制萃取釜的溫度為35-55℃,分離釜i的溫度均為35-55℃,分離釜ii的溫度均為45℃和分離釜iii的溫度均為45℃;(3)啟動(dòng)二氧化碳泵,設(shè)置二氧化碳流量為18-24kg/h,萃取釜壓力為15-40mpa,萃取時(shí)間為30-240min,萃取結(jié)束后,打開(kāi)分離釜i、分離釜ii和分離釜iii進(jìn)行分離,收集,即得。進(jìn)一步地,所述步驟(2)中女貞子粉末的加入量為200g。進(jìn)一步地,所述步驟(2)中萃取釜的溫度為50℃,分離釜i的溫度為55℃,分離釜ii的溫度為45℃,分離釜iii的溫度為45℃。進(jìn)一步地,所述步驟(3)中分離釜i壓力為8-15mpa,分離釜ii壓力為6-10mpa,分離釜iii壓力為6mpa。進(jìn)一步地,所述步驟(3)中萃取釜壓力為15mpa。進(jìn)一步地,所述分離釜i壓力為10mpa,分離釜ii壓力為6mpa。進(jìn)一步地,所述步驟(3)中二氧化碳流量為21kg/h,萃取時(shí)間為120min。發(fā)明人經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)壓力和溫度對(duì)超臨界萃取的影響最大,并考察了萃取壓力、萃取溫度、分離釜i壓力、分離釜i溫度對(duì)超臨界萃取的影響,得出四個(gè)因素對(duì)女貞子齊墩果酸的影響大小為:分離釜i溫度>萃取溫度>分離釜i壓力>萃取壓力;最佳工藝條件為萃取溫度為50℃,萃取壓力為15mpa,分離釜i溫度為55℃,分離釜i壓力為10mpa,分離釜ii壓力和溫度溫度分別為6mpa和45℃,分離釜iii壓力和溫度分別為6mpa和45℃,萃取時(shí)間為120min,萃取得到的齊墩果酸百分率為2.0117%。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明提供的超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法,無(wú)需使用有機(jī)溶劑,不存在后續(xù)處理,提取效率高,工藝穩(wěn)定,重現(xiàn)性好。具體實(shí)施方式為更好地理解本發(fā)明,下面通過(guò)以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步具體的闡述,但不可理解為對(duì)本發(fā)明的限定,對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)上述
發(fā)明內(nèi)容所作的一些非本質(zhì)的改進(jìn)與調(diào)整,也視為落在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。本發(fā)明所用超臨界二氧化碳萃取裝置,由中山大學(xué)中藥集成制造與過(guò)程控制技術(shù)研究中心和南通睿智超臨界科技發(fā)展公司聯(lián)合制造,型號(hào)231-50-06。實(shí)施例1超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法所述超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法,包括以下步驟:(1)將女貞子粉碎后過(guò)篩50目,得女貞子粉末;(2)取步驟(1)所得女貞子粉末180g,加入至超臨界二氧化碳萃取裝置的萃取釜中,控制萃取釜的溫度為35℃,分離釜i的溫度為35℃、分離釜ii的溫度為45℃和分離釜iii的溫度為45℃;(3)啟動(dòng)二氧化碳泵,設(shè)置二氧化碳流量為18kg/h,萃取釜壓力為27mpa,萃取時(shí)間為30min,萃取結(jié)束后,打開(kāi)分離釜i(壓力為8mpa)、分離釜ii(壓力為8mpa)和分離釜iii(壓力為6mpa)進(jìn)行分離,收集,即得。實(shí)施例2超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法所述超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法,包括以下步驟:(1)將女貞子粉碎后過(guò)篩50目,得女貞子粉末;(2)取步驟(1)所得女貞子粉末200g,加入至超臨界二氧化碳萃取裝置的萃取釜中,控制萃取釜的溫度為50℃,分離釜i的溫度為55℃、分離釜ii的溫度為45℃和分離釜iii的溫度為45℃;(3)啟動(dòng)二氧化碳泵,設(shè)置二氧化碳流量為21kg/h,萃取釜壓力為15mpa,萃取時(shí)間為120min,萃取結(jié)束后,打開(kāi)分離釜i(壓力為10mpa)、分離釜ii(壓力為6mpa)和分離釜iii(壓力為6mpa)進(jìn)行分離,收集,即得。實(shí)施例3超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法所述超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法,包括以下步驟:(1)將女貞子粉碎后過(guò)篩50目,得女貞子粉末;(2)取步驟(1)所得女貞子粉末220g,加入至超臨界二氧化碳萃取裝置的萃取釜中,控制萃取釜的溫度為55℃,分離釜i的溫度為45℃、分離釜ii的溫度為45℃和分離釜iii的溫度為45℃;(3)啟動(dòng)二氧化碳泵,設(shè)置二氧化碳流量為24kg/h,萃取釜壓力為40mpa,萃取時(shí)間為240min,萃取結(jié)束后,打開(kāi)分離釜i(壓力為15mpa)、分離釜ii(壓力為10mpa)和分離釜iii(壓力為6mpa)進(jìn)行分離,收集,即得。對(duì)比例1超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法所述超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法與實(shí)施例2不同之處為:萃取中加入400ml的95%的乙醇作為夾帶劑,其他與實(shí)施例2相同。對(duì)比例2乙醇萃取方法所述乙醇萃取方法,包括以下步驟:(1)將女貞子粉碎,過(guò)篩50目,得女貞子粉末;(2)將步驟(1)所得女貞子粉末200g加入70%乙醇中回流萃取,萃取2h后,即得。試驗(yàn)例一、齊墩果酸的含量測(cè)定1.試驗(yàn)材料:實(shí)施例1-3萃取得到的齊墩果酸。2.試驗(yàn)方法:(1)通過(guò)高效液相色譜法對(duì)齊墩果酸進(jìn)行定量分析,色譜條件:色譜柱:sharpsil-hc18色譜柱(250×4.6mm,5μm);流動(dòng)相:乙腈-0.1%磷酸;洗脫梯度:0-10min,乙腈40-75%,10-23min,乙腈75-79%,23-31min,乙腈79-79.4%,31-40min,乙腈79.4-95%,40-50min,乙腈95%;柱溫:25℃;檢測(cè)波長(zhǎng):210nm;流速:1.0ml/min;進(jìn)樣量:20μl;(2)按外標(biāo)法計(jì)算齊墩果酸的含量:樣品中齊墩果酸的百分含量=齊墩果酸樣品濃度mg/ml×齊墩果酸樣品體積(ml)/樣品取樣量;齊墩果酸的百分率=樣品中齊墩果酸的百分含量×樣品所屬萃取物重量/女貞子投藥量(g)×100%。3.試驗(yàn)結(jié)果:計(jì)算所得齊墩果酸的百分率結(jié)果見(jiàn)表1。表1齊墩果酸的百分率結(jié)果項(xiàng)目實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3對(duì)比例1對(duì)比例2齊墩果酸的百分率/%0.39452.01170.70640.67210.6516通過(guò)觀察可知,本發(fā)明實(shí)施例1-3萃取所得齊墩果酸為黃色粘稠狀,具有清香氣味;對(duì)比例1萃取所得齊墩果酸為黃色稀薄狀,具有稍許刺激味;對(duì)比例2萃取所得齊墩果酸為墨綠色稀薄狀,具有焦味;且對(duì)比例1-2的后續(xù)處理復(fù)雜,有機(jī)溶劑殘留。由表1可知,本發(fā)明超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法中,未添加夾帶劑也可以萃取得到齊墩果酸。實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3相比,實(shí)施例1與實(shí)施例3中齊墩果酸的產(chǎn)率較低,說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例1齊墩果酸的萃取時(shí)間短萃取不完全,實(shí)施例3萃取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)不利于萃取,實(shí)施例2的萃取效果較好。與對(duì)比例1-2相比,本發(fā)明實(shí)施例2制備的齊墩果酸含量較高,說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例2超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法較好,后續(xù)以實(shí)施例2為基礎(chǔ),對(duì)萃取工藝條件優(yōu)化。試驗(yàn)例二、萃取工藝條件優(yōu)化影響超臨界二氧化碳萃取效率的因素有很多,但發(fā)明人經(jīng)過(guò)大量試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)中壓力和溫度對(duì)超臨界萃取的影響最大,并確定了影響萃取的主要因素為萃取壓力、萃取溫度、分離釜i壓力、分離釜i溫度(保持分離釜iii的壓力和設(shè)備回路一致、溫度45℃,萃取120min),并采用l9(3)4正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),以女貞子萃取物收率和外觀(顏色深淺,澄明度)為評(píng)價(jià)指標(biāo),在實(shí)施例2的基礎(chǔ)上,進(jìn)行優(yōu)化萃取工藝條件的試驗(yàn),正交試驗(yàn)參見(jiàn)表2。表2正交試驗(yàn)表從表2的極差分析可知,四個(gè)因素對(duì)女貞子齊墩果酸的影響大小為:分離釜i溫度>萃取溫度>分離釜i壓力>萃取壓力;根據(jù)表1的k值分析可知,四個(gè)影響因素下的最大均值分別為:分離釜i溫度0.906,萃取溫度0.519,分離釜i壓力0.450,萃取壓力0.180,所以超臨界二氧化碳萃取的最佳工藝組合理論上應(yīng)該為:a3b1c3d2;即萃取溫度為50℃,萃取壓力為15mpa,分離釜i溫度為55℃,分離釜i壓力為10mpa,分離釜ii壓力和溫度溫度分別為6mpa和45℃,分離釜iii壓力和溫度分別為6mpa和45℃,萃取時(shí)間為120min。本發(fā)明在最佳工藝條件下所得齊墩果酸的百分率高達(dá)2.0117%。綜上所述,由表1、2可知,本發(fā)明最佳工藝為實(shí)施例2,且齊墩果酸的萃取率遠(yuǎn)高于對(duì)比例1-2。說(shuō)明本發(fā)明超臨界二氧化碳萃取女貞子齊墩果酸的方法無(wú)需使用有機(jī)溶劑,不存在后續(xù)處理,顏色狀態(tài)較好,提取效率高。當(dāng)前第1頁(yè)12