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      一種具有抗骨質(zhì)疏松功效的巴戟天多糖類成分提取方法與流程

      文檔序號:11766718閱讀:568來源:國知局

      技術(shù)領(lǐng)域:

      本發(fā)明涉及中藥提取技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種具有抗骨質(zhì)疏松功效的巴戟天多糖類成分提取方法。



      背景技術(shù):

      巴戟天,雙子葉植物茜草科,長3-13cm,寬1.5-5cm。巴戟天的干燥根呈扁圓柱形,略彎曲。到目前為止,已從巴戟天屬植物中分離和鑒定出的化學(xué)成分主要有蒽醌、環(huán)烯醚萜、低聚糖、多糖等。其中,多糖類成分在食品、醫(yī)藥、保健品等方面有著廣泛的應(yīng)用。

      目前,巴戟天多糖類成分提取方法主要包括水提法、熱浸提法和纖維素酶水解法。在這些方法中,熱浸提法具有設(shè)備投資少、工藝簡單、提取率較高的特點。而提取所得產(chǎn)品中多糖類成分的純度也屬于評價提取方法優(yōu)劣性的關(guān)鍵指標(biāo),所用提取方法不止要具有上述特點,還需通過相匹配的分離純化方法去除雜質(zhì),提高多糖類成分的純度,從而利于制成具有抗骨質(zhì)疏松功效的藥物制劑。



      技術(shù)實現(xiàn)要素:

      本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種清洗用水量少、目標(biāo)產(chǎn)品提取得率高且純度好的具有抗骨質(zhì)疏松功效的巴戟天多糖類成分提取方法。

      本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題采用以下的技術(shù)方案來實現(xiàn):

      一種具有抗骨質(zhì)疏松功效的巴戟天多糖類成分提取方法,包括如下步驟:

      (1)清洗:將巴戟天放入清洗液中浸泡5-10min,并用3-5倍巴戟天干重的清水清洗兩次,每次攪拌5-10min;

      (2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的巴戟天用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,并粉碎成粉末,過100目篩;

      (3)提?。簩⑸鲜鏊瓢完旆勰┗亓魉崛?,每次用水量為巴戟天干重的5-8倍,每次提取1-3h,并且每次加入巴戟天干重0.5-1%的促提劑,合并濾液,濾液經(jīng)減壓濃縮至比重達到1.11-1.15,待自然冷卻至室溫后加入95%乙醇,使所得混合液中乙醇濃度達到80%,充分?jǐn)嚢?,靜置5-8h,再次過濾,即得多糖粗品;

      (4)溶解:將上述所得多糖粗品加蒸餾水溶解,過濾,除去不溶性雜質(zhì),所得濾液即為待純化液;

      (5)一次純化:將所得待純化液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5-1ml/min;并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在1-2ml/min,收集洗脫液,即得一次洗脫液;

      (6)二次純化:將一次洗脫液經(jīng)減壓濃縮后上deae-纖維素陰離子柱,控制出液速度在0.5-1ml/min,并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在1-2ml/min,收集洗脫液,即得二次洗脫液;

      (7)干燥:將上述所得二次洗脫液經(jīng)噴霧干燥后粉碎,即得巴戟天多糖類成分。

      所述清洗液由如下重量份數(shù)的原料制成:殼寡糖/預(yù)膠化淀粉15-20份、微晶纖維素5-10份、醫(yī)藥級聚乙烯醇0.5-1份、大豆低聚糖0.5-1份、食品級滑石粉0.5-1份、氫化蓖麻油0.3-0.5份、水100-200份,其制備方法為:向微晶纖維素中加入醫(yī)藥級聚乙烯醇和氫化蓖麻油,升溫至110-115℃保溫研磨30min,即得改性微晶纖維素,待自然冷卻至室溫后再加入大豆低聚糖和食品級滑石粉,充分?jǐn)嚢韬笥?5-0℃環(huán)境中密封靜置1h,然后加入殼寡糖/預(yù)膠化淀粉和30-35℃水,攪拌均勻后送入球磨機中,球磨至出料粒度小于30μm。

      所述殼寡糖/預(yù)膠化淀粉由殼寡糖和預(yù)膠化淀粉復(fù)合而成,其制備方法為:攪拌下向殼寡糖中加入35-40℃水,待殼寡糖完全溶解后停止加水,于35-40℃下保溫攪拌10min,再加入氫化棕櫚油和丁基羥基茴香醚,升溫至回流狀態(tài)保溫攪拌5min,然后加入預(yù)膠化淀粉,繼續(xù)回流保溫攪拌10min,所得混合物以5℃/min的降溫速度降溫至0-5℃保溫靜置30min,最后送入冷凍干燥機中,干燥所得固體經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得殼寡糖/預(yù)膠化淀粉。

      所述殼寡糖、氫化棕櫚油、丁基羥基茴香醚和預(yù)膠化淀粉的質(zhì)量比為5-10:0.5-1:0.2-0.5:10-15。

      所述促提劑由如下重量份數(shù)的原料制成:田菁膠/多聚谷氨酸3-5份、糯米粉2-3份、泊洛沙姆0.5-1份、羥乙基纖維素0.5-1份、聚乙二醇40000.1-0.3份、甘草酸二鉀0.05-0.1份、小蘇打粉0.05-0.1份,其制備方法為:向糯米粉中加入泊洛沙姆和甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入聚乙二醇4000和小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入田菁膠/多聚谷氨酸和羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機制成粉末,過300目篩,即得促提劑。

      所述田菁膠/多聚谷氨酸由田菁膠和多聚谷氨酸復(fù)合而成,其制備方法為:將田菁膠和藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入多聚谷氨酸和橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。

      所述田菁膠、藻酸丙二醇酯、多聚谷氨酸、橄欖油和水的重量比為3-5:0.5-1:2-3:0.1-0.3:25-30。

      本發(fā)明的有益效果是:

      (1)通過清洗液的使用,在減少藥材清洗用水量的同時提高對藥材上附著雜質(zhì)的清除率,清除率達到99.9以上,同時該清洗液即使殘留在藥材上也不存在服用安全性隱患;

      (2)通過熱風(fēng)風(fēng)干操作,在降低烘干溫度保證藥材熱穩(wěn)定性的基礎(chǔ)上進一步提高藥材上附著雜質(zhì)的清除率,將清除率進一步提高到99.98%以上,同時有效清除藥材上殘留的清洗液成分;

      (3)利用水提醇沉法對巴戟天多糖類成分進行提取,并在促提劑協(xié)助下顯著提高多糖類成分的提取得率,經(jīng)分離、純化后的多糖類成分提取得率達到30mg/g以上;

      (4)利用聚酰胺柱和deae-纖維素陰離子柱對巴戟天多糖類成分進行分離純化,有效分離和去除其他藥物活性成分及雜質(zhì),從而提高所得多糖類成分的純度,最終產(chǎn)品中多糖類成分的純度達到80%以上;

      (5)利用所述提取方法制得的巴戟天多糖類成分經(jīng)試驗證明其具有優(yōu)異的抗骨質(zhì)疏松功效,試驗給藥組的股骨骨密度、骨灰重、骨鈣含量和骨磷含量與正常對照組處于近似水平。

      具體實施方式:

      為了使本發(fā)明實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達成目的與功效易于明白了解,下面結(jié)合具體實施例,進一步闡述本發(fā)明。

      實施例1

      (1)清洗:將巴戟天放入清洗液中浸泡10min,并用5倍巴戟天干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;

      (2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的巴戟天用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,并粉碎成粉末,過100目篩;

      (3)提?。簩⑸鲜鏊瓢完旆勰┗亓魉崛?,每次用水量為巴戟天干重的5倍,每次提取1.5h,并且每次加入巴戟天干重0.5%的促提劑,合并濾液,濾液經(jīng)減壓濃縮至比重達到1.11-1.15,待自然冷卻至室溫后加入95%乙醇,使所得混合液中乙醇濃度達到80%,充分?jǐn)嚢瑁o置5h,再次過濾,即得多糖粗品;

      (4)溶解:將上述所得多糖粗品加蒸餾水溶解,過濾,除去不溶性雜質(zhì),所得濾液即為待純化液;

      (5)一次純化:將所得待純化液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次洗脫液;

      (6)二次純化:將一次洗脫液經(jīng)減壓濃縮后上deae-纖維素陰離子柱,控制出液速度在0.5ml/min,并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次洗脫液;

      (7)干燥:將上述所得二次洗脫液經(jīng)噴霧干燥后粉碎,即得巴戟天多糖類成分。

      清洗液的制備:向5kg微晶纖維素中加入0.5kg醫(yī)藥級聚乙烯醇和0.3kg氫化蓖麻油,升溫至110-115℃保溫研磨30min,即得改性微晶纖維素,待自然冷卻至室溫后再加入0.5kg大豆低聚糖和0.5kg食品級滑石粉,充分?jǐn)嚢韬笥?5-0℃環(huán)境中密封靜置1h,然后加入15kg殼寡糖/預(yù)膠化淀粉和200kg30-35℃水,攪拌均勻后送入球磨機中,球磨至出料粒度小于30μm。

      殼寡糖/預(yù)膠化淀粉的制備:攪拌下向10kg殼寡糖中加入35-40℃水,待殼寡糖完全溶解后停止加水,于35-40℃下保溫攪拌10min,再加入0.5kg氫化棕櫚油和0.2kg丁基羥基茴香醚,升溫至回流狀態(tài)保溫攪拌5min,然后加入15kg預(yù)膠化淀粉,繼續(xù)回流保溫攪拌10min,所得混合物以5℃/min的降溫速度降溫至0-5℃保溫靜置30min,最后送入冷凍干燥機中,干燥所得固體經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得殼寡糖/預(yù)膠化淀粉。

      促提劑的制備:向20g糯米粉中加入5g泊洛沙姆和0.5g甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入1g聚乙二醇4000和0.5g小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入30g田菁膠/多聚谷氨酸和5g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機制成粉末,過300目篩,即得促提劑。

      田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將50g田菁膠和5g藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入30g多聚谷氨酸和2g橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。

      實施例2

      (1)清洗:將巴戟天放入清洗液中浸泡10min,并用5倍巴戟天干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;

      (2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的巴戟天用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,并粉碎成粉末,過100目篩;

      (3)提?。簩⑸鲜鏊瓢完旆勰┗亓魉崛?,每次用水量為巴戟天干重的5倍,每次提取1.5h,并且每次加入巴戟天干重0.5%的促提劑,合并濾液,濾液經(jīng)減壓濃縮至比重達到1.11-1.15,待自然冷卻至室溫后加入95%乙醇,使所得混合液中乙醇濃度達到80%,充分?jǐn)嚢?,靜置5h,再次過濾,即得多糖粗品;

      (4)溶解:將上述所得多糖粗品加蒸餾水溶解,過濾,除去不溶性雜質(zhì),所得濾液即為待純化液;

      (5)一次純化:將所得待純化液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次洗脫液;

      (6)二次純化:將一次洗脫液經(jīng)減壓濃縮后上deae-纖維素陰離子柱,控制出液速度在0.5ml/min,并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次洗脫液;

      (7)干燥:將上述所得二次洗脫液經(jīng)噴霧干燥后粉碎,即得巴戟天多糖類成分。

      清洗液的制備:向10kg微晶纖維素中加入1kg醫(yī)藥級聚乙烯醇和0.3kg氫化蓖麻油,升溫至110-115℃保溫研磨30min,即得改性微晶纖維素,待自然冷卻至室溫后再加入0.5kg大豆低聚糖和0.5kg食品級滑石粉,充分?jǐn)嚢韬笥?5-0℃環(huán)境中密封靜置1h,然后加入20kg殼寡糖/預(yù)膠化淀粉和200kg30-35℃水,攪拌均勻后送入球磨機中,球磨至出料粒度小于30μm。

      殼寡糖/預(yù)膠化淀粉的制備:攪拌下向5kg殼寡糖中加入35-40℃水,待殼寡糖完全溶解后停止加水,于35-40℃下保溫攪拌10min,再加入0.5kg氫化棕櫚油和0.2kg丁基羥基茴香醚,升溫至回流狀態(tài)保溫攪拌5min,然后加入10kg預(yù)膠化淀粉,繼續(xù)回流保溫攪拌10min,所得混合物以5℃/min的降溫速度降溫至0-5℃保溫靜置30min,最后送入冷凍干燥機中,干燥所得固體經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得殼寡糖/預(yù)膠化淀粉。

      促提劑的制備:向30g糯米粉中加入10g泊洛沙姆和0.5g甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入3g聚乙二醇4000和0.5g小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入50g田菁膠/多聚谷氨酸和10g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機制成粉末,過300目篩,即得促提劑。

      田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將30g田菁膠和5g藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入20g多聚谷氨酸和2g橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。

      對照例1

      (1)清洗:將巴戟天放入清洗液中浸泡10min,并用5倍巴戟天干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;

      (2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的巴戟天用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,并粉碎成粉末,過100目篩;

      (3)提?。簩⑸鲜鏊瓢完旆勰┗亓魉崛?,每次用水量為巴戟天干重的5倍,每次提取1.5h,并且每次加入巴戟天干重0.5%的促提劑,合并濾液,濾液經(jīng)減壓濃縮至比重達到1.11-1.15,待自然冷卻至室溫后加入95%乙醇,使所得混合液中乙醇濃度達到80%,充分?jǐn)嚢?,靜置5h,再次過濾,即得多糖粗品;

      (4)溶解:將上述所得多糖粗品加蒸餾水溶解,過濾,除去不溶性雜質(zhì),所得濾液即為待純化液;

      (5)純化:將所得待純化液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液;

      (6)干燥:將上述所得洗脫液經(jīng)噴霧干燥后粉碎,即得巴戟天多糖類成分。

      清洗液的制備:向10kg微晶纖維素中加入0.5kg大豆低聚糖和0.5kg食品級滑石粉,充分?jǐn)嚢韬笥?5-0℃環(huán)境中密封靜置1h,然后加入20kg殼寡糖/預(yù)膠化淀粉和200kg30-35℃水,攪拌均勻后送入球磨機中,球磨至出料粒度小于30μm。

      殼寡糖/預(yù)膠化淀粉的制備:攪拌下向5kg殼寡糖中加入35-40℃水,待殼寡糖完全溶解后停止加水,于35-40℃下保溫攪拌10min,再加入0.5kg氫化棕櫚油和0.2kg丁基羥基茴香醚,升溫至回流狀態(tài)保溫攪拌5min,然后加入10kg預(yù)膠化淀粉,繼續(xù)回流保溫攪拌10min,所得混合物以5℃/min的降溫速度降溫至0-5℃保溫靜置30min,最后送入冷凍干燥機中,干燥所得固體經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得殼寡糖/預(yù)膠化淀粉。

      促提劑的制備:向30g糯米粉中加入10g泊洛沙姆和0.5g甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入3g聚乙二醇4000和0.5g小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入50g田菁膠/多聚谷氨酸和10g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機制成粉末,過300目篩,即得促提劑。

      田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將30g田菁膠和5g藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入20g多聚谷氨酸和2g橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。

      對照例2

      (1)清洗:將巴戟天放入清水中浸泡10min,并用5倍巴戟天干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;

      (2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的巴戟天用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,并粉碎成粉末,過100目篩;

      (3)提取:將上述所制巴戟天粉末回流水提三次,每次用水量為巴戟天干重的5倍,每次提取1.5h,并且每次加入巴戟天干重0.5%的促提劑,合并濾液,濾液經(jīng)減壓濃縮至比重達到1.11-1.15,待自然冷卻至室溫后加入95%乙醇,使所得混合液中乙醇濃度達到80%,充分?jǐn)嚢?,靜置5h,再次過濾,即得多糖粗品;

      (4)溶解:將上述所得多糖粗品加蒸餾水溶解,過濾,除去不溶性雜質(zhì),所得濾液即為待純化液;

      (5)純化:將所得待純化液上deae-纖維素陰離子柱,控制出液速度在0.5ml/min,并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得洗脫液;

      (6)干燥:將上述所得洗脫液經(jīng)噴霧干燥后粉碎,即得巴戟天多糖類成分。

      促提劑的制備:向30g糯米粉中加入10g泊洛沙姆和0.5g甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入3g聚乙二醇4000和0.5g小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入50g田菁膠/多聚谷氨酸和10g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機制成粉末,過300目篩,即得促提劑。

      田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將30g田菁膠和5g藻酸丙二醇酯升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入20g多聚谷氨酸和2g橄欖油,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。

      對照例3

      (1)清洗:將巴戟天放入清洗液中浸泡10min,并用5倍巴戟天干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;

      (2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的巴戟天用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,并粉碎成粉末,過100目篩;

      (3)提?。簩⑸鲜鏊瓢完旆勰┗亓魉崛危看斡盟繛榘完旄芍氐?倍,每次提取1.5h,并且每次加入巴戟天干重0.5%的促提劑,合并濾液,濾液經(jīng)減壓濃縮至比重達到1.11-1.15,待自然冷卻至室溫后加入95%乙醇,使所得混合液中乙醇濃度達到80%,充分?jǐn)嚢?,靜置5h,再次過濾,即得多糖粗品;

      (4)溶解:將上述所得多糖粗品加蒸餾水溶解,過濾,除去不溶性雜質(zhì),所得濾液即為待純化液;

      (5)一次純化:將所得待純化液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次洗脫液;

      (6)二次純化:將一次洗脫液經(jīng)減壓濃縮后上deae-纖維素陰離子柱,控制出液速度在0.5ml/min,并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次洗脫液;

      (7)干燥:將上述所得二次洗脫液經(jīng)噴霧干燥后粉碎,即得巴戟天多糖類成分。

      清洗液的制備:向10kg微晶纖維素中加入1kg醫(yī)藥級聚乙烯醇和0.3kg氫化蓖麻油,升溫至110-115℃保溫研磨30min,即得改性微晶纖維素,待自然冷卻至室溫后再加入0.5kg大豆低聚糖和0.5kg食品級滑石粉,充分?jǐn)嚢韬笥?5-0℃環(huán)境中密封靜置1h,然后加入20kg殼寡糖/預(yù)膠化淀粉和200kg30-35℃水,攪拌均勻后送入球磨機中,球磨至出料粒度小于30μm。

      殼寡糖/預(yù)膠化淀粉的制備:攪拌下向5kg殼寡糖中加入35-40℃水,待殼寡糖完全溶解后停止加水,于35-40℃下保溫攪拌10min,再加入0.5kg氫化棕櫚油和0.2kg丁基羥基茴香醚,升溫至回流狀態(tài)保溫攪拌5min,然后加入10kg預(yù)膠化淀粉,繼續(xù)回流保溫攪拌10min,所得混合物以5℃/min的降溫速度降溫至0-5℃保溫靜置30min,最后送入冷凍干燥機中,干燥所得固體經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得殼寡糖/預(yù)膠化淀粉。

      促提劑的制備:向30g糯米粉中加入10g泊洛沙姆和0.5g甘草酸二鉀,升溫至75-80℃保溫研磨10min,然后加入3g聚乙二醇4000和0.5g小蘇打粉,繼續(xù)升溫至105-110℃保溫研磨15min,即得改性糯米粉,待自然冷卻至室溫后再加入50g田菁膠/多聚谷氨酸和10g羥乙基纖維素,充分混合后經(jīng)真空壓縮成塊,并于0-5℃環(huán)境中密封靜置1h,最后經(jīng)粉碎機制成粉末,過300目篩,即得促提劑。

      田菁膠/多聚谷氨酸的制備:將30g田菁膠升溫至80-85℃保溫研磨5min,再加入20g多聚谷氨酸,繼續(xù)在80-85℃保溫研磨15min,向所得混合物中加入300g15-20℃水,充分?jǐn)嚢韬笥?5-20℃下保溫靜置30min,然后將所得混合液送入噴霧干燥機中,干燥所得顆粒經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得田菁膠/多聚谷氨酸。

      對照例4

      (1)清洗:將巴戟天放入清洗液中浸泡10min,并用5倍巴戟天干重的清水清洗兩次,每次攪拌5min;

      (2)干燥粉碎:將經(jīng)清洗后的巴戟天用45-50℃熱風(fēng)風(fēng)干,并粉碎成粉末,過100目篩;

      (3)提?。簩⑸鲜鏊瓢完旆勰┗亓魉崛危看斡盟繛榘完旄芍氐?倍,每次提取1.5h,合并濾液,濾液經(jīng)減壓濃縮至比重達到1.11-1.15,待自然冷卻至室溫后加入95%乙醇,使所得混合液中乙醇濃度達到80%,充分?jǐn)嚢?,靜置5h,再次過濾,即得多糖粗品;

      (4)溶解:將上述所得多糖粗品加蒸餾水溶解,過濾,除去不溶性雜質(zhì),所得濾液即為待純化液;

      (5)一次純化:將所得待純化液上聚酰胺柱,控制出液速度在0.5ml/min;并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得一次洗脫液;

      (6)二次純化:將一次洗脫液經(jīng)減壓濃縮后上deae-纖維素陰離子柱,控制出液速度在0.5ml/min,并用蒸餾水洗脫至無多糖類成分流出,控制出液速度在2ml/min,收集洗脫液,即得二次洗脫液;

      (7)干燥:將上述所得二次洗脫液經(jīng)噴霧干燥后粉碎,即得巴戟天多糖類成分。

      清洗液的制備:向10kg微晶纖維素中加入1kg醫(yī)藥級聚乙烯醇和0.3kg氫化蓖麻油,升溫至110-115℃保溫研磨30min,即得改性微晶纖維素,待自然冷卻至室溫后再加入0.5kg大豆低聚糖和0.5kg食品級滑石粉,充分?jǐn)嚢韬笥?5-0℃環(huán)境中密封靜置1h,然后加入20kg殼寡糖/預(yù)膠化淀粉和200kg30-35℃水,攪拌均勻后送入球磨機中,球磨至出料粒度小于30μm。

      殼寡糖/預(yù)膠化淀粉的制備:攪拌下向5kg殼寡糖中加入35-40℃水,待殼寡糖完全溶解后停止加水,于35-40℃下保溫攪拌10min,再加入0.5kg氫化棕櫚油和0.2kg丁基羥基茴香醚,升溫至回流狀態(tài)保溫攪拌5min,然后加入10kg預(yù)膠化淀粉,繼續(xù)回流保溫攪拌10min,所得混合物以5℃/min的降溫速度降溫至0-5℃保溫靜置30min,最后送入冷凍干燥機中,干燥所得固體經(jīng)粉碎機制成粉末,過200目篩,即得殼寡糖/預(yù)膠化淀粉。

      實施例3

      分別對實施例1、實施例2、對照例1和對照例2中巴戟天的雜質(zhì)清洗率與提取所得多糖類成分的純度、以及實施例1、實施例2、對照例3和對照例4提取所得多糖類成分的收率進行測定,結(jié)果如表1所示。

      表1巴戟天雜質(zhì)清洗率和多糖類成分提取得率與純度

      實施例4

      對實施例1和實施例2提取所得巴戟天多糖類成分進行大鼠骨質(zhì)疏松癥治療療效測試。

      試驗對象:選取體重在320-400g大鼠100只,隨機分為5組,每組20只,即正常對照組、模型對照組、陽性對照組(羥乙基膦酸鈉)、實施例1提取物試驗組、實施例2提取物試驗組;

      試驗方法:除正常對照組外,各組大鼠均灌喂維甲酸0.5ml/kg,每天1次,連續(xù)14天,第15天對各組按表2中給藥劑量灌喂給藥,每天1次,連續(xù)30天,試驗結(jié)果如表2所示。

      表2本發(fā)明提取所得巴戟天多糖類成分對骨質(zhì)疏松癥的療效

      以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解,本發(fā)明不受上述實施例的限制,上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理,在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下,本發(fā)明還會有各種變化和改進,這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。

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