本發(fā)明涉及化學(xué)藥物領(lǐng)域，特別涉及一種含硒二苯甲酮及其衍生物和制備方法以及在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

惡性腫瘤俗稱“癌癥”，是正常組織細(xì)胞在各種刺激因素下發(fā)生基因突變，引起惡性增殖的結(jié)果。癌癥細(xì)胞病理特征為：抗細(xì)胞死亡，無限復(fù)制，組織浸潤，細(xì)胞轉(zhuǎn)移，炎癥反應(yīng)和代謝異常等?；瘜W(xué)藥物是治療癌癥最主要的方法，很多小分子靶向藥物的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展，對(duì)延長癌癥病人的生存期和提高生存質(zhì)量，起到了明顯的作用。例如：bcr-abl激酶抑制劑伊馬替尼用于慢性骨髓性白血病(cml)和胃腸道間質(zhì)瘤(gista)的治療；表皮生長因子受體(egfr)激酶抑制劑吉非替尼，阿法替尼及莫西替尼等用于非小細(xì)胞肺癌(nsclc)的治療；多激酶抑制劑索拉非尼用于腎癌和肝癌；egfr抑制劑拉帕替尼二甲苯磺酸鹽用于乳腺癌；多激酶抑制劑舒尼替尼用于晚期腎癌；蛋白酶體抑制劑硼替佐米用于多發(fā)性骨髓瘤等。

由于惡性腫瘤日益升高的發(fā)病率及其治愈的難度，促使人們尋找一切可能的防治措施。其中，聯(lián)合用藥和綜合治療已經(jīng)發(fā)展成為腫瘤治療的主要手段，取代了原來的單一化療方法。聯(lián)合用藥能夠明顯延長病人的生命和提高患者生活質(zhì)量,在腫瘤治療中占據(jù)著非常重要的地位。

硒是人體必需的微量元素，對(duì)人體的正常生理功能發(fā)揮著重要作用。人體缺硒可引起克山病和西山病，兒童缺硒易引起關(guān)節(jié)僵硬、肌肉疼痛、生長遲緩以及人體色素缺失等，孕婦缺硒將影響嬰兒的正常生長發(fā)育。硒在人體內(nèi)最重要的功能，是作為抗氧化劑保護(hù)人體免受氧化損傷，增強(qiáng)免疫作用和神經(jīng)保護(hù)作用等。硒對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、細(xì)胞凋亡、dna修復(fù)和血管生成調(diào)節(jié)具有重要作用。流行病學(xué)研究表明：人體血漿中硒含量過低與胃腸道癌癥、肺癌、皮膚癌和前列腺癌之間存在相關(guān)性。因此含硒化合物在腫瘤的預(yù)防和治療中可以發(fā)揮重要作用。

微管是真核細(xì)胞骨架的重要組成部分，能夠與其他蛋白共同組裝成紡錘體、中心粒、鞭毛、神經(jīng)管等結(jié)構(gòu)，在維持細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞有絲分裂以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中均有著重要作用。微管蛋白靶向抑制劑通過抑制微管蛋白聚集或解聚干擾微管的功能來抑制癌細(xì)胞增殖，并最終誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡從而達(dá)到抗腫瘤的目的。近年來，微管已經(jīng)成為抗腫瘤藥物研發(fā)的重要靶點(diǎn)之一。一些以微管為靶點(diǎn)的藥物例如紫杉醇、長春新堿、秋水仙堿等已經(jīng)在臨床使用。1987年，美國癌癥研究所pettit等人從非洲灌木矮柳樹combretumcaffrum的樹皮中提取分離出來一系列具有順式二苯乙烯類結(jié)構(gòu)的活性組分combretastatins，其中，ca-4(combretastatina-4)活性最好。ca-4與秋水仙堿相似，作用于微管蛋白，可抑制腫瘤血管生成，具有很強(qiáng)的體外抗腫瘤活性，其結(jié)構(gòu)改造后的磷酸二鈉鹽前藥ca-4p已經(jīng)作為孤兒藥，得到fda的批準(zhǔn)，用于腫瘤的治療。由于ca-4分子結(jié)構(gòu)中的順式雙鍵結(jié)構(gòu)導(dǎo)致其容易轉(zhuǎn)化為反式構(gòu)型而失活，因此，尋找結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、抗腫瘤活性良好的新的化合物分子，是抗腫瘤藥物研究的重要方向之一。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)，提供一種含硒二苯甲酮及其衍生物，將抗腫瘤藥物分子isoca-4和微量元素硒結(jié)合于單一化學(xué)實(shí)體分子，從而實(shí)現(xiàn)具有二者協(xié)同作用的雙功能藥物分子。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種上述含硒二苯甲酮及其衍生物的制備方法。

本發(fā)明的再一目的在于提供一種上述含硒二苯甲酮及其衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種含硒二苯甲酮及其衍生物，是以甲硒基代替isoca-4類分子中a環(huán)或b環(huán)中的一個(gè)或以上的甲氧基，得到具有微管蛋白抑制和硒化合物抗腫瘤活性的協(xié)同功能，化學(xué)結(jié)構(gòu)如式i所示：

其中：x1、x2、x3、x4為各自獨(dú)立的o或se，且至少有一個(gè)為se；y為o或ch2；r1、r2、r3為各自獨(dú)立的h、鹵素、ch3、oh、nh2、opo3na2或och3。

所述含硒二苯甲酮及其衍生物的制備方法，包括下述步驟：

(1)中間體1的制備：將1摩爾份的原料(結(jié)構(gòu)式ii)、1～2摩爾份的n-溴代琥珀酰亞胺(簡稱nbs)加入乙腈中，0～25℃攪拌，反應(yīng)完畢后用水和乙酸乙酯萃取，有機(jī)相干燥，過柱純化，得到中間體1(結(jié)構(gòu)式中間體1)；

(2)中間體2的制備：25～50℃下將1～2摩爾份的65％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))hno3緩慢滴加到1摩爾份的中間體1的乙酸溶液中，反應(yīng)完畢后加水抽濾，濾餅干燥，得到中間體2(結(jié)構(gòu)式中間體2)；

(3)中間體3的制備：將1摩爾份的中間體2、1～2摩爾份的碘甲烷、1～2摩爾份的四丁基碘化銨及2～4摩爾份的koh加入n,n-二甲基甲酰胺(簡稱dmf)中，25～50℃攪拌，反應(yīng)完畢后加水抽濾，濾餅干燥，得到中間體3(結(jié)構(gòu)式中間體3)；

(4)中間體4的制備：將1摩爾份的中間體3、3～10摩爾份的鐵粉及乙酸加入到乙醇中，25～70℃攪拌3～12小時(shí)，反應(yīng)完畢后用飽和碳酸氫鈉溶液和乙酸乙酯萃取，有機(jī)相干燥，過柱純化，得到中間體4(結(jié)構(gòu)式中間體4)；

(5)中間體5的制備：0～25℃下將1摩爾份的中間體4加入到1～5摩爾份的10％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))hcl中，緩慢加入1～2摩爾份的亞硝酸鈉，攪拌30～120分鐘后加入飽和乙酸鈉水溶液調(diào)節(jié)ph至6.0～8.0，然后緩慢加入硒氰酸鉀，反應(yīng)完畢后抽濾，濾餅干燥，得到中間體5(結(jié)構(gòu)式中間體5)；

(6)中間體6的制備：將1摩爾份的中間體5和1～3摩爾份的koh加入甲醇中，攪拌，反應(yīng)完畢后抽濾，濾餅干燥，得到中間體6(結(jié)構(gòu)式中間體6)；

(7)中間體7的制備：0～25℃將1摩爾份的中間體6、1～4摩爾份的nabh4、1～3摩爾份的碘甲烷加入乙醇/水(1:1體積比)中，反應(yīng)完畢后用水和乙酸乙酯萃取，有機(jī)相干燥，過柱純化，得到中間體7(結(jié)構(gòu)式中間體7)；

(8)中間體8的制備：氬氣保護(hù)下，將1摩爾份的中間體7溶于無水四氫呋喃中，然后將反應(yīng)液冷卻至-78～-40℃；將1～2摩爾份的正丁基鋰(簡稱n-buli)緩慢加入到反應(yīng)液中并攪拌0.5～3小時(shí)后，滴加1～2摩爾份的醛的四氫呋喃溶液；反應(yīng)完畢后加入飽和氯化銨溶液淬滅反應(yīng)，乙酸乙酯萃取，有機(jī)相干燥，過柱純化，得到中間體8(結(jié)構(gòu)式中間體8)；

(9)含硒二苯甲酮的制備：將1摩爾份的中間體8和1～3摩爾份的2-碘?；郊姿?簡稱ibx)加入到四氫呋喃中，反應(yīng)完畢后濾出沉淀，濾液干燥，過柱純化，得到含硒二苯甲酮(結(jié)構(gòu)式i-1)；

(10)含硒二苯甲酮衍生物的制備：氬氣保護(hù)下，將1～3摩爾份的甲基三苯基溴化鏻溶于無水四氫呋喃中，然后將反應(yīng)液冷卻至-78～-40℃；將1～3摩爾份的正丁基鋰緩慢加入到反應(yīng)液中，升溫至25～50℃并攪拌0.5～3小時(shí)；將反應(yīng)液再次冷卻至-78～-40℃，滴加1～2摩爾份的含硒二苯甲酮的四氫呋喃溶液，升溫至25～50℃；反應(yīng)完畢后加入飽和氯化銨溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，有機(jī)相干燥，過柱純化，得到含硒二苯甲酮衍生物(結(jié)構(gòu)式i-2)。

上述含硒二苯甲酮及其衍生物的合成路線如下所示：

所述含硒二苯甲酮及其衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，是以二苯甲酮及其衍生物為活性成分，可以有效地治療肺癌、宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、肝癌或結(jié)腸癌等惡性腫瘤。

所述含硒二苯甲酮及其衍生物是以藥用的溶劑化物的形式使用，所述溶劑化物優(yōu)選水合物。

本發(fā)明還提供一種用于治療惡性腫瘤的藥物組合物，其中含有治療有效量的上述含硒二苯甲酮及其衍生物和藥學(xué)上可接受的輔助劑；還可以包含表皮生長因子受體激酶抑制劑、dna烷化劑、組蛋白去乙?；敢种苿┗蛄蜓踹€蛋白還原酶抑制劑。所述藥物組合物可以制成注射劑、片劑、膠囊劑、丸劑、懸浮劑或乳劑的形式使用；其給藥途徑可為口服、經(jīng)皮、靜脈或肌肉注射。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點(diǎn)和效果：

(1)本發(fā)明提供的含硒二苯甲酮及其衍生物是一種新型的腫瘤微管蛋白抑制劑，同進(jìn)還具有有機(jī)硒化合物的腫瘤預(yù)防和治療功能。

(2)本發(fā)明對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有顯著的抑制作用。

(3)裸鼠移植瘤抗腫瘤試驗(yàn)顯示，本發(fā)明的含硒二苯甲酮及其衍生物11a-p的抑瘤率為72.9％，而對(duì)照組陽性藥物二苯甲酮衍生物isoca-4p組的腫瘤抑瘤率為52.2％，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明硒的引入有明顯的協(xié)同效應(yīng)。

附圖說明

圖1為處死的裸鼠。

圖2為處死的裸鼠中剝離出來的腫瘤。

圖3為腫瘤體積變化曲線。

圖4為腫瘤重量。

圖5為裸鼠體重。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。

實(shí)施例1：(3,4-二甲氧基-5-(甲硒基)苯基)(3-羥基-4-甲氧基苯基)甲酮(結(jié)構(gòu)式10a)的制備

(1)4-溴-2-甲氧基苯酚(結(jié)構(gòu)式2)的制備。

0℃下將n-溴代琥珀酰亞胺(180mg，1mmol)加入到愈創(chuàng)木酚(124mg，1mmol，結(jié)構(gòu)式1)的乙腈溶液(20ml)中；攪拌30分鐘后，反應(yīng)體系用飽和硫代硫酸鈉溶液淬滅，乙酸乙酯萃取三次；合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑得粗產(chǎn)物，柱層析分離(乙酸乙酯：石油醚，10：1)，得到產(chǎn)物4-溴-2-甲氧基苯酚，產(chǎn)率：95％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.06–6.91(m,2h),6.80(d,j＝8.3hz,1h),5.55(s,1h),3.88(s,3h)。

(2)4-溴-2-甲氧基-6-硝基苯酚(結(jié)構(gòu)式3)的制備。

室溫下將65％hno3(0.097ml，1.2mmol)緩慢滴加到4-溴-2-甲氧基苯酚(203mg，1mmol)的乙酸溶液(5ml)中；攪拌10分鐘后，將反應(yīng)體系倒入冰水中，產(chǎn)生大量沉淀；濾出所得沉淀，水洗滌三次，真空干燥，得到產(chǎn)物4-溴-2-甲氧基-6-硝基苯酚，產(chǎn)率：96％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.70(s,1h),7.86(d,j＝2.2hz,1h),7.21(d,j＝2.2hz,1h),3.95(s,3h).

(3)4-溴-2-甲氧基-6-硝基苯酚(結(jié)構(gòu)式4)的制備。

將碘甲烷(141mg，1mmol)緩慢滴加到4-溴-2-甲氧基-6-硝基苯酚(248mg，1mmol)、四丁基碘化銨(369mg，1mmol)及koh(112mg，2mmol)的dmf溶液(10ml)中，40℃攪拌并通過tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)；反應(yīng)完成后，將反應(yīng)體系倒入冰水中，抽濾，濾餅干燥得到4-溴-2-甲氧基-6-硝基苯酚，產(chǎn)率：78％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.76(d,j＝2.2hz,1h),7.49(d,j＝2.2hz,1h),3.89(d,j＝8.8hz,6h).

(4)5-溴-2,3-二甲氧基苯胺(結(jié)構(gòu)式5)的制備。

室溫下將鐵粉(280mg，5mmol)加入到4-溴-2-甲氧基-6-硝基苯酚(260mg，1mmol)的乙醇(15ml)及乙酸(8ml)混合溶液中，攪拌3小時(shí)；然后用飽和碳酸氫鈉溶液中和至中性，乙酸乙酯萃取三次；合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑得粗產(chǎn)物，柱層析分離(乙酸乙酯：石油醚，10：1)，得到5-溴-2,3-二甲氧基苯胺，產(chǎn)率：68％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.53(d,j＝2.1hz,1h),6.45(d,j＝2.1hz,1h),3.88(s,2h),3.82(d,j＝1.7hz,3h),3.79(d,j＝1.8hz,3h).

(5)5-溴-1,2-二甲氧基-3-硒代苯異氰酸酯(結(jié)構(gòu)式6)的制備。

0℃下將5-溴-2,3-二甲氧基苯胺(232mg，1mmol)加入到10％hcl(2.5ml)中，緩慢加入亞硝酸鈉(83mg，1.2mmol)，攪拌30分鐘后加入飽和乙酸鈉水溶液調(diào)節(jié)ph至6.0；然后緩慢加入硒氰酸鉀(220mg，1.5mmol)；反應(yīng)1小時(shí)后抽濾，濾餅水洗三次，得到產(chǎn)物5-溴-1,2-二甲氧基-3-硒代苯異氰酸酯，產(chǎn)率：78％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.33(d,j＝2.0hz,1h),7.02(d,j＝2.1hz,1h),3.90(s,3h),3.87(s,3h).

(6)1-(5-溴-2,3-二甲氧基苯基)-2-(4-溴-2,6-二甲氧基苯基)二硒(結(jié)構(gòu)式7)的制備

將koh(112mg，2mmol)加入到5-溴-1,2-二甲氧基-3-硒代苯異氰酸酯(321mg，1mmol)的甲醇溶液(5ml)中；反應(yīng)1小時(shí)后抽濾，濾餅甲醇洗三次，得到產(chǎn)物1-(5-溴-2,3-二甲氧基苯基)-2-(4-溴-2,6-二甲氧基苯基)二硒，產(chǎn)率：72％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.23(d,j＝2.2hz,1h),6.92(d,j＝2.1hz,1h),3.92(s,3h),3.85(s,3h).

(7)(5-溴-2,3-二甲氧基苯基)(甲基)硒(結(jié)構(gòu)式8)的制備

將nabh4(76mg，2.0mmol)分批加入到1-(5-溴-2,3-二甲氧基苯基)-2-(4-溴-2,6-二甲氧基苯基)二硒(590mg，1mmol)的乙醇/水(1:1,8ml)溶液中。反應(yīng)液攪拌20分鐘，加入碘甲烷(141mg，1mmol)；室溫?cái)嚢?小時(shí)后，加入水，乙酸乙酯萃取；合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑得粗產(chǎn)物，柱層析分離(乙酸乙酯：石油醚，10：1)得到產(chǎn)物(5-溴-2,3-二甲氧基苯基)(甲基)硒，產(chǎn)率：89％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.88(q,j＝2.2hz,2h),3.84(s,3h),3.83(s,3h),2.26(s,3h).

(8)(5-((3,4-二甲氧基-5-(硒甲基)苯基)(羥基)甲基)-2-甲氧基苯酚(結(jié)構(gòu)式9)的制備。

氬氣保護(hù)下，將(5-溴-2,3-二甲氧基苯基)(甲基)硒(403mg，1.3mmol)溶于無水四氫呋喃(20ml)中，然后將溶液冷卻至-78℃；將n-buli(1.3mmol)緩慢加入到混合物中并攪拌0.5小時(shí)；然后，滴加3-羥基-4-甲氧基苯甲醛(1mmol)的四氫呋喃溶液；繼續(xù)攪拌12小時(shí)后，加入飽和氯化銨溶液淬滅反應(yīng)，乙酸乙酯萃取；合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑得粗產(chǎn)物，柱層析分離(乙酸乙酯：石油醚，3：1)得到產(chǎn)物(5-((3,4-二甲氧基-5-(硒甲基)苯基)(羥基)甲基)-2-甲氧基苯酚，產(chǎn)率：69％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.92(ddd,j＝20.1,2.0,1.1hz,2h),6.84(ddd,j＝7.3,2.0,1.0hz,1h),6.79(dd,j＝2.1,1.0hz,1h),6.67(d,j＝7.5hz,1h),5.98–5.94(m,1h),5.92(s,1h),3.90(s,3h),3.85(s,6h),2.22(s,3h).

(9)(3,4-二甲氧基-5-(甲硒基)苯基)(3-羥基-4-甲氧基苯基)甲酮(結(jié)構(gòu)式10a)的制備

將2-碘?；郊姿?(560mg，2mmol)分批加入到(5-((3,4-二甲氧基-5-(硒甲基)苯基)(羥基)甲基)-2-甲氧基苯酚(1mmol)的四氫呋喃(10ml)溶液中。反應(yīng)液攪拌3小時(shí)后，濾出沉淀；濾液濃縮得粗產(chǎn)物，柱層析分離(乙酸乙酯：石油醚，3：1)得到產(chǎn)物(3,4-二甲氧基-5-(甲硒基)苯基)(3-羥基-4-甲氧基苯基)甲酮，產(chǎn)率：69％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.45(d,j＝2.1hz,1h),7.39(dd,j＝8.3,2.1hz,1h),7.21(q,j＝1.9hz,2h),6.92(d,j＝8.4hz,1h),5.76(d,j＝1.0hz,1h),3.99(s,3h),3.95(s,3h),3.89(s,3h),2.24(s,3h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ194.5,151.8,150.3,149.5,145.3,134.5,131.0,127.6,123.8,122.1,116.2,111.5,109.7,60.2,56.13,56.05,5.1.hrms(esi)(m/z)[m+h]⁺calcdforc17h18o5se,383.0393；found,383.0408.purity:96.1％(byhplc).

實(shí)施例2：5-(1-(3,4-二甲氧基-5-(甲硒基)苯基)乙烯基)-2-甲氧基苯酚(結(jié)構(gòu)式11a)的制備

氬氣保護(hù)下，將甲基三苯基溴化鏻(176mg，2mmol)溶于無水四氫呋喃(30ml)中，然后將混合物冷卻至-78℃；將n-buli(2mmol)緩慢加入到混合物中，升溫至室溫并攪拌0.5小時(shí)；將混合物再次冷卻至-78℃，滴加(3,4-二甲氧基-5-(甲硒基)苯基)(3-羥基-4-甲氧基苯基)甲酮(1mmol)的四氫呋喃(5ml)溶液，攪拌0.5小時(shí)后，升至室溫并攪拌12小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后加入飽和氯化銨溶液淬滅，乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑得粗產(chǎn)物，柱層析分離(乙酸乙酯：石油醚，3：1)得到產(chǎn)物5-(1-(3,4-二甲氧基-5-(甲硒基)苯基)乙烯基)-2-甲氧基苯酚，產(chǎn)率：72％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.97(d,j＝1.9hz,1h),6.84–6.78(m,3h),6.70(d,j＝1.8hz,1h),5.59(s,1h),5.39(d,j＝1.2hz,1h),5.30(d,j＝1.2hz,1h),3.92(s,3h),3.89(s,3h),3.80(s,3h),2.21(s,3h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)δ151.8,149.1,146.4,146.1,145.2,138.6,134.6,127.0,120.2,112.0,114.4,113.0,110.6,110.1,60.1,56.0,55.9,5.0.hrms(esi)(m/z)[m+h]⁺calcdforc18h20o4se,381.0600；found,381.0621.purity:98.6％(byhplc).

實(shí)施例3：含硒二苯甲酮及其衍生物對(duì)癌細(xì)胞的生長抑制作用

本發(fā)明采用mtt法【mtt的中文名稱為3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽】評(píng)價(jià)目標(biāo)化合物對(duì)癌細(xì)胞的生長抑制作用。檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性mtt還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(formazan)并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(dmso)能溶解活細(xì)胞中產(chǎn)生的甲瓚，最后用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在570nm波長處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。經(jīng)此方法所測(cè)得的結(jié)果如下表所示：

表1.含硒二苯甲酮及其衍生物的體外抗腫瘤活性

本發(fā)明制備的含硒二苯甲酮及其衍生物對(duì)全部五種細(xì)胞表現(xiàn)出優(yōu)異的細(xì)毒性。絕大多數(shù)化合物ic50在亞微摩爾級(jí)別以下。其中化合物5(1-(3,4-二甲氧基-5-(甲硒基)苯基)乙烯基)-2-甲氧基苯酚(11a)活性最好，ic50為2-11nm。

實(shí)施例4：含硒二苯甲酮衍生物裸鼠移植瘤抗腫瘤抑制活性

本發(fā)明采用裸鼠a549移植瘤模型評(píng)價(jià)含硒二苯甲酮衍生物即5-(1-(3,4-二甲氧基-5-(甲硒基)苯基)乙烯基)-2-甲氧基苯酚(11a)的體內(nèi)抗腫瘤抑制活性。取培養(yǎng)至3-5代的對(duì)數(shù)生長期的a549細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后用不含血清的培養(yǎng)基配制成1*10⁷個(gè)/ml濃度的細(xì)胞懸液，用注射器快速接種至裸鼠右肢靠近腋窩處皮下組織中(每只裸鼠0.1ml)。待裸鼠體內(nèi)瘤塊長到1000mm³時(shí)，處死裸鼠，剝離瘤塊，在冰上清除結(jié)締組織后，剪切成約4-6mm³的組織塊，皮下接種至裸鼠右肢靠近腋窩處。

待上述接種的裸鼠瘤塊長到100-200mm³時(shí)，將裸鼠隨機(jī)分為對(duì)照組，給藥組，陽性藥物ca-4組及陽性藥物isoca-4組，每組9只。將藥物用生理鹽水溶解后，按30mg/kg的用量，隔天腹腔注射給藥。給藥時(shí)記錄裸鼠體重和腫瘤體積，一月后處死裸鼠，如圖1所示；剝離腫瘤，如圖2所示；記錄體積，如圖3所示；記錄重量，如圖4所示，計(jì)算抑瘤率。結(jié)果顯示，對(duì)照組的腫瘤塊平均重量為1.595g。11a-p給藥組的腫瘤塊平均重量為0.432克，抑瘤率為72.9％。陽性藥物ca-4組的腫瘤塊平均重量為0.835克，抑瘤率為47.6％。陽性藥物異ca-4組的腫瘤塊平均重量為0.765g，抑瘤率為52.2％。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)記錄各組平均體重，如圖5所示；幾乎無差別，說明11a-p無明顯毒性。