本發(fā)明屬于生物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種植物生長發(fā)育相關(guān)蛋白cnusmxy173及其編碼基因和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：擬南芥(arabidopsisthaliana)是生物學(xué)研究的模式植物，屬于十字花科。深入研究擬南芥基因的功能將有助于改良作物的生物性狀。植物的生長發(fā)育要經(jīng)歷種子萌發(fā)、植株生長、花的產(chǎn)生、受粉受精、結(jié)實(shí)、衰老等階段，通過每一階段體內(nèi)都要發(fā)生不同的代謝變化，同時環(huán)境條件對其過程會發(fā)生顯著的影響。對于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)來說，植物的生長發(fā)育是與作物的品質(zhì)和產(chǎn)量緊密相關(guān)。維生素c(vitaminc，vc)即l-抗壞血酸。維生素c對人類和動物的生長發(fā)育是必不可少的。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種植物生長發(fā)育相關(guān)蛋白cnusmxy173及其編碼基因和應(yīng)用。本發(fā)明提供的蛋白質(zhì)，來源于擬南芥(arabidopsisthaliana)，命名為cnusmxy173蛋白，是如下(a)或(b)或(c)或(d)：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物生長發(fā)育相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)；(c)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物抗壞血酸含量相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)。(d)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物抗蟲性相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)。為了使(b)或(c)或(d)中的蛋白質(zhì)便于純化和檢測，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標(biāo)簽。表1標(biāo)簽的序列標(biāo)簽殘基序列poly-arg5-6(通常為5個)rrrrrpoly-his2-10(通常為6個)hhhhhhflag8dykddddkstrep-tagii8wshpqfekc-myc10eqkliseedl上述(b)或(c)或(d)中的蛋白質(zhì)可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進(jìn)行生物表達(dá)得到。上述(b)或(c)或(d)中的蛋白質(zhì)的編碼基因可通過將序列表中序列2或序列3所示的dna序列中缺失一個或幾個氨基酸殘基的密碼子，和/或進(jìn)行一個或幾個堿基對的錯義突變，和/或在其5′端和/或3′端連上表1所示的標(biāo)簽的編碼序列得到。編碼cnusmxy173蛋白的基因(命名為cnusmxy173基因)也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。cnusmxy173基因具體可為如下1)至9)中任一所述的dna分子：1)編碼區(qū)如序列表中序列2所示的dna分子；2)序列表中序列3第923-2475位核苷酸所示的dna分子；3)序列表中序列3所示的dna分子；4)在嚴(yán)格條件下與1)或2)或3)限定的dna序列雜交且編碼植物生長發(fā)育相關(guān)蛋白的dna分子；5)與1)或2)或3)限定的dna序列具有90％以上同源性且編碼植物生長發(fā)育相關(guān)蛋白的dna分子；6)在嚴(yán)格條件下與1)或2)或3)限定的dna序列雜交且編碼植物抗壞血酸含量相關(guān)蛋白的dna分子；7)與1)或2)或3)限定的dna序列具有90％以上同源性且編碼植物抗壞血酸含量相關(guān)蛋白的dna分子；8)在嚴(yán)格條件下與1)或2)或3)限定的dna序列雜交且編碼植物抗蟲相關(guān)蛋白的dna分子；9)與1)或2)或3)限定的dna序列具有90％以上同源性且編碼植物抗蟲相關(guān)蛋白的dna分子。上述嚴(yán)格條件可為用0.1×sspe(或0.1×ssc)，0.1％sds的溶液，在dna或者rna雜交實(shí)驗(yàn)中65℃下雜交并洗膜。含有cnusmxy173基因的重組表達(dá)載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍?？捎矛F(xiàn)有的表達(dá)載體構(gòu)建含有cnusmxy173基因的重組表達(dá)載體。所述表達(dá)載體包括雙元農(nóng)桿菌載體和可用于微彈轟擊的載體等。使用cnusmxy173基因構(gòu)建重組表達(dá)載體時，可在其轉(zhuǎn)錄起始核苷酸前加上任何一種增強(qiáng)型、組成型、組織特異型或誘導(dǎo)型啟動子，它們可單獨(dú)使用或與其它的植物啟動子結(jié)合使用；此外，使用cnusmxy173基因構(gòu)建重組表達(dá)載體時，還可使用增強(qiáng)子，包括翻譯增強(qiáng)子或轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子，這些增強(qiáng)子區(qū)域可以是atg起始密碼子或鄰接區(qū)域起始密碼子等，但必需與編碼序列的閱讀框相同，以保證整個序列的正確翻譯。所述翻譯控制信號和起始密碼子的來源是廣泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻譯起始區(qū)域可以來自轉(zhuǎn)錄起始區(qū)域或結(jié)構(gòu)基因。為了便于對轉(zhuǎn)基因植物或轉(zhuǎn)基因微生物進(jìn)行鑒定及篩選，可對所用表達(dá)載體進(jìn)行加工，如加入在植物或微生物中表達(dá)可產(chǎn)生顏色變化的酶或發(fā)光化合物的基因、具有抗性的抗生素標(biāo)記物或是抗化學(xué)試劑標(biāo)記基因等。從轉(zhuǎn)基因安全性考慮，可不加任何選擇性標(biāo)記基因，直接以表型篩選轉(zhuǎn)化植物或微生物。所述重組表達(dá)載體具體可為：以pbi121載體為出發(fā)載體，hindiii和xbai酶切位點(diǎn)之間插入序列表的序列5所示的dna分子(cnusmxy172啟動子)，xbai和saci酶切位點(diǎn)之間插入序列表的序列2所示的dna分子(cnusmxy173基因的開放閱讀框)。本發(fā)明還保護(hù)cnusmxy173蛋白的應(yīng)用，為如下(d1)至(d10)中的至少一種：(d1)調(diào)控植物的花粉的萌發(fā)；(d2)調(diào)控植物的花粉管的伸長；(d3)調(diào)控植物的雄性育性；(d4)調(diào)控植物的籽粒產(chǎn)量；(d5)調(diào)控植物的株高；(d6)調(diào)控植物的蓮座葉大小；(d7)調(diào)控植物的生長；(d8)調(diào)控植物的衰老；(d9)調(diào)控植物的抗壞血酸含量；(d10)調(diào)控植物的抗蟲性。所述抗蟲性具體可為對夜蛾的抗性，更具體可為對甜菜夜蛾的抗性。任一所述植物可為單子葉植物或雙子葉植物。所述雙子葉植物具體可為十字花科植物，更具體可為擬南芥，更具體可為哥倫比亞生態(tài)型擬南芥或cnusmxy173純合突變體。本發(fā)明還保護(hù)一種制備轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括如下步驟：抑制出發(fā)植物中cnusmxy173基因的表達(dá)，得到轉(zhuǎn)基因植物；與所述出發(fā)植物相比，所述轉(zhuǎn)基因植物具有如下(f1)至(f8)中的至少一種表型：(f1)花粉萌發(fā)率降低；(f2)花粉管變短；(f3)雄性育性降低；(f4)籽粒數(shù)量減少；(f5)株高變矮；(f6)蓮座葉變??；(f7)抗壞血酸含量降低；(f8)抗蟲性增加。所述抗蟲性具體可為對夜蛾的抗性，更具體可為對甜菜夜蛾的抗性。所述出發(fā)植物可為單子葉植物或雙子葉植物。所述雙子葉植物具體可為十字花科植物，更具體可為擬南芥，更具體可為哥倫比亞生態(tài)型擬南芥。所述“抑制出發(fā)植物中cnusmxy173基因的表達(dá)”的實(shí)現(xiàn)方式為：在出發(fā)植物基因組dna中的序列表的序列3所示dna分子的第215位核苷酸與第216位核苷酸之間插入序列表的序列4所示的dna分子。本發(fā)明還保護(hù)一種制備轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括如下步驟：在出發(fā)植物中導(dǎo)入cnusmxy173基因，得到轉(zhuǎn)基因植物；與所述出發(fā)植物相比，所述轉(zhuǎn)基因植物具有如下(g1)至(g8)中的至少一種表型：(g1)花粉萌發(fā)率增高；(g2)花粉管變長；(g3)雄性育性增強(qiáng)；(g4)籽粒數(shù)量增多；(g5)株高變高；(g6)蓮座葉變大；(g7)抗壞血酸含量升高；(g8)抗蟲性降低。所述抗蟲性具體可為對夜蛾的抗性，更具體可為對甜菜夜蛾的抗性。所述出發(fā)植物可為單子葉植物或雙子葉植物。所述雙子葉植物具體可為十字花科植物，更具體可為擬南芥，更具體可為哥倫比亞生態(tài)型擬南芥或cnusmxy173純合突變體。所述cnusmxy173基因具體可通過以上任一所述重組表達(dá)載體導(dǎo)入所述目的植物。攜帶有cnusmxy173基因的重組表達(dá)載體可通過ti質(zhì)粒、ri質(zhì)粒、植物病毒載體、直接dna轉(zhuǎn)化、顯微注射、電導(dǎo)、農(nóng)桿菌介導(dǎo)等常規(guī)生物學(xué)方法轉(zhuǎn)化到出發(fā)植物中。以上任一所述cnusmxy173純合突變體可為：與哥倫比亞生態(tài)型擬南芥相比，cnusmxy173純合突變體的兩條染色體均在cnusmxy173基因的5’utr區(qū)域發(fā)生同樣的插入突變(插入位置為基因組dna中的序列表的序列3所示dna分子的第215位核苷酸與第216位核苷酸之間，插入片段如序列表的序列4所示)。本發(fā)明有助于促進(jìn)人們對植物生長發(fā)育、植物中抗壞血酸合成以及植物抗蟲性的研究，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景和市場價值。附圖說明圖1為哥倫比亞生態(tài)型擬南芥和cnusmxy173純合突變體中cnusmxy173基因的相對表達(dá)水平。圖2為顯微鏡下花粉萌發(fā)的照片。圖3為花粉萌發(fā)率。圖4為花粉管長度。圖5為顯微鏡下花粉管伸長情況的照片。圖6為角果的照片。圖7為每個角果中的種子數(shù)。圖8為在平行條件下培養(yǎng)的萌發(fā)50天的待測植株的照片。圖9為在平行條件下培養(yǎng)的萌發(fā)50天的待測植株的蓮座葉照片。圖10為植株中的抗壞血酸含量。圖11為單個幼蟲重量。具體實(shí)施方式以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無特殊說明，均為自常規(guī)生化試劑商店購買得到的。以下實(shí)施例中的定量試驗(yàn)，均設(shè)置三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果取平均值。哥倫比亞生態(tài)型擬南芥(columbia-0)：arabidopsisbiologicalresourcecenter(abrc),編號為cs6673。pbi121載體：clonetech公司。培養(yǎng)基質(zhì)：將草炭土和蛭石等體積混合。提及甜菜夜蛾的文獻(xiàn)：thebhlhsubgroupiiidfactorsnegativelyregulatejasmonate-mediatedplantdefenseanddevelopment.songs,qit,fanm,zhangx,gaoh,huangh,wud,guoh,xied.plosgenet.2013；9(7):e1003653.doi:10.1371/journal.pgen.1003653.epub2013jul25。cnusmxy173蛋白是本發(fā)明的發(fā)明人從哥倫比亞生態(tài)型擬南芥中發(fā)現(xiàn)的新蛋白，如序列表的序列1所示。編碼cnusmxy173蛋白的基因命名為cnusmxy173基因，其cdna中的開放閱讀框如序列表的序列2所示，其基因組dna中的序列如序列表的序列3所示(序列3中，第923-925位核苷酸為起始密碼子，第2473-2475位核苷酸為終止密碼子)。實(shí)施例1、gme純合突變體的獲得從擬南芥生物資源中心(arabidopsisbiologicalresourcecenter，abrc)獲取純合突變體(salk_008960)。經(jīng)全基因組測序，與哥倫比亞生態(tài)型擬南芥相比，純合突變體的兩條染色體均在cnusmxy173基因的5’utr區(qū)域發(fā)生同樣的插入突變(插入位置為基因組dna中的序列表的序列3所示dna分子的第215位核苷酸與第216位核苷酸之間，插入片段如序列表的序列4所示)，將該純合突變體命名為cnusmxy173純合突變體。分別提取哥倫比亞生態(tài)型擬南芥和cnusmxy173純合突變體的葉片的總rna，采用f1和r1組成的引物對通過real-timepcr檢測cnusmxy173基因的相對表達(dá)量。以哥倫比亞生態(tài)型擬南芥中cnusmxy173基因的相對表達(dá)量為1，哥倫比亞生態(tài)型擬南芥和cnusmxy173純合突變體中cnusmxy173基因的相對表達(dá)水平見圖1。f1：5’-ggagctggaggtttcattgc-3’；r1：5’-cgtaatgaccttcgtgcttcaa-3’。實(shí)施例2、回補(bǔ)植株的獲得一、構(gòu)建重組質(zhì)粒1、取哥倫比亞生態(tài)型擬南芥的葉片，提取基因組dna。2、以步驟1得到的基因組dna為模板，采用f2和r2組成的引物對進(jìn)行pcr擴(kuò)增，回收pcr擴(kuò)增產(chǎn)物。f2：5’-cccaagcttgatcaagatgactaatttaac-3’；r2：5’-ctagtctagatctacattaacaaaacaaatctg-3’。3、取步驟2得到的pcr擴(kuò)增產(chǎn)物，用限制性內(nèi)切酶hindiii和xbai進(jìn)行雙酶切，回收酶切產(chǎn)物。4、取pbi121載體，用限制性內(nèi)切酶hindiii和xbai進(jìn)行雙酶切，回收約13.9kb的載體骨架。5、將步驟3的酶切產(chǎn)物和步驟4的載體骨架連接，得到重組質(zhì)粒。6、取哥倫比亞生態(tài)型擬南芥的葉片，提取總rna并反轉(zhuǎn)錄為cdna。7、以步驟6得到的cdna為模板，采用f3和r3組成的引物對進(jìn)行pcr擴(kuò)增，回收pcr擴(kuò)增產(chǎn)物。f3：5’-tgctctagaatgggaactaccaatggaacag-3’；r3：5’-atcgagctctcactcttttccatcagccgc-3’。8、取步驟7得到的pcr擴(kuò)增產(chǎn)物，用限制性內(nèi)切酶xbai和saci進(jìn)行雙酶切，回收酶切產(chǎn)物。9、取步驟5得到的重組質(zhì)粒，用限制性內(nèi)切酶xbai和saci進(jìn)行雙酶切，回收約16.9kb的載體骨架。10、將步驟8的酶切產(chǎn)物和步驟9的載體骨架連接，得到重組質(zhì)粒pbi121-cnusmxy172。根據(jù)測序結(jié)果，對重組質(zhì)粒pbi121-cnusmxy172進(jìn)行結(jié)構(gòu)描述如下：以pbi121載體為出發(fā)載體，hindiii和xbai酶切位點(diǎn)之間插入了序列表的序列5所示的dna分子(cnusmxy172啟動子)，xbai和saci酶切位點(diǎn)之間插入了序列表的序列2所示的dna分子(cnusmxy173基因的開放閱讀框)。二、回補(bǔ)植株的獲得1、將重組質(zhì)粒pbi121-cnusmxy172導(dǎo)入農(nóng)桿菌gv3101，得到重組農(nóng)桿菌。2、取步驟1得到的重組農(nóng)桿菌，采用蘸花法對哥倫比亞生態(tài)型擬南芥進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化，然后培養(yǎng)植株(t0代植株)，收獲種子，即為t0代植株的種子。3、將t0代植株的種子播種于含50mg/l卡那霉素的ms培養(yǎng)基平板上，可以萌發(fā)并正常生長的植株為抗生素陽性植株。4、抗生素陽性植株生長至4-6片葉子時，移栽到培養(yǎng)基質(zhì)中培養(yǎng)45天(培養(yǎng)條件：24℃，16小時光照/8小時黑暗)。5、完成步驟4后，分別取植株的葉片，提取基因組dna，采用f3和r3組成的引物對進(jìn)行pcr鑒定。如果得到約1152bp的擴(kuò)增產(chǎn)物，鑒定結(jié)果為陽性，該植株為轉(zhuǎn)基因植株。6、取步驟5得到的轉(zhuǎn)基因植株，自交并獲得后代植株。7、取步驟6得到的后代植株，提取基因組dna，采用f3和r3組成的引物對進(jìn)行pcr鑒定。如果得到約1152bp的擴(kuò)增產(chǎn)物且沒有得到1571bp的擴(kuò)增產(chǎn)物，該植株為純合的轉(zhuǎn)基因植株。將該純合的轉(zhuǎn)基因植株命名為回補(bǔ)植株。實(shí)施例3、性狀鑒定一、花粉萌發(fā)特性待測植株分別為：10株cnusmxy173純合突變體、10株哥倫比亞生態(tài)型擬南芥、10株回補(bǔ)植株。將待測植株的花粉涂于花粉萌發(fā)培養(yǎng)基上，22℃避光靜置培養(yǎng)10小時，然后在顯微鏡下觀察萌發(fā)情況并統(tǒng)計萌發(fā)率同時測量花粉管長度?；ǚ勖劝l(fā)培養(yǎng)基(ph7.5)：含10g/100ml蔗糖、0.01g/100ml硼酸、1mmmgso4、5mmcacl2、5mmkcl、1.5g/100ml瓊脂，余量為水。顯微鏡下的照片見圖2?；ǚ勖劝l(fā)率(平均值)見圖3。cnusmxy173純合突變體的花粉萌發(fā)率為約65％，哥倫比亞生態(tài)型擬南芥的花粉萌發(fā)率為約80％，回補(bǔ)植株的花粉萌發(fā)率為約80％。結(jié)果表明，抑制cnusmxy173基因表達(dá)造成花粉萌發(fā)率下降，回補(bǔ)基因后花粉萌發(fā)率恢復(fù)?；ǚ酃荛L度(平均值)見圖4。二、花粉發(fā)育特性待測植株分別為：10株cnusmxy173純合突變體、10株哥倫比亞生態(tài)型擬南芥、10株回補(bǔ)植株。將待測植株的花粉授予哥倫比亞生態(tài)型擬南芥的柱頭上，24小時后在顯微鏡下觀察花粉管伸長情況。顯微鏡下的照片見圖5。哥倫比亞生態(tài)型擬南芥花粉的花粉管能夠正常伸長至子房底部。cnusmxy173純合突變體花粉的花粉管不能正常伸長，最多伸長到子房的中上部?；匮a(bǔ)植株花粉的花粉管能夠正常伸長至子房底部。三、果實(shí)特性待測植株分別為：10株cnusmxy173純合突變體、10株哥倫比亞生態(tài)型擬南芥、10株回補(bǔ)植株。將待測植株自體的花粉授予自體的柱頭上，正常培養(yǎng)，觀察角果統(tǒng)計每個角果中的種子數(shù)。角果的照片見圖6。每個角果中的種子數(shù)(平均值)見圖7。哥倫比亞生態(tài)型擬南芥上的角果充滿種子。與哥倫比亞生態(tài)型擬南芥上的角果相比，cnusmxy173純合突變體上的角果長度明顯變短，種子數(shù)量明顯減少。回補(bǔ)植株上的角果的外型以及種子數(shù)量與哥倫比亞生態(tài)型擬南芥上的角果無顯著差異。四、生長特性待測植株分別為：10株cnusmxy173純合突變體、10株哥倫比亞生態(tài)型擬南芥、10株回補(bǔ)植株。在平行條件下培養(yǎng)的萌發(fā)50天的待測植株的照片見圖8。在平行條件下培養(yǎng)的萌發(fā)50天的待測植株的蓮座葉照片見圖9。哥倫比亞生態(tài)型擬南芥和回補(bǔ)植株的株高、蓮座葉表型均無顯著差異。與哥倫比亞生態(tài)型擬南芥相比，cnusmxy173純合突變體株高顯著變小，蓮座葉直徑顯著變小，并且蓮座葉有早衰現(xiàn)象。實(shí)施例4、抗壞血酸含量檢測待測植株分別為：10株cnusmxy173純合突變體、10株哥倫比亞生態(tài)型擬南芥、10株回補(bǔ)植株。在平行條件下培養(yǎng)的萌發(fā)50天的待測植株，取全植株，檢測抗壞血酸含量(參考文獻(xiàn)：analbiochem1995，225：165-167)。植株中的抗壞血酸含量(平均值)見圖10。哥倫比亞生態(tài)型擬南芥和回補(bǔ)植株的抗壞血酸含量無顯著差異。與哥倫比亞生態(tài)型擬南芥相比，cnusmxy173純合突變體的抗壞血酸含量為三分之一以下。實(shí)施例5、抗蟲性鑒定待測植株分別為：10株cnusmxy173純合突變體、10株哥倫比亞生態(tài)型擬南芥、10株回補(bǔ)植株。將萌發(fā)5周的待測植株轉(zhuǎn)移至裝有培養(yǎng)基質(zhì)的花盆中，每個花盆1株，然后將剛孵化出的甜菜夜蛾幼蟲放在植株的葉片上(每個花盆放置6個甜菜夜蛾幼蟲)，正常管理，6天后取植株上的甜菜夜蛾幼蟲并稱重。結(jié)果見圖11，縱坐標(biāo)為單個幼蟲重量(平均值)。與哥倫比亞生態(tài)型擬南芥上的甜菜夜蛾幼蟲相比，回補(bǔ)植株上的甜菜夜蛾幼蟲重量沒有顯著差異。與哥倫比亞生態(tài)型擬南芥上的甜菜夜蛾幼蟲相比，cnusmxy173純合突變體上的甜菜夜蛾幼蟲重量更低。結(jié)果表明，與哥倫比亞生態(tài)型擬南芥上的甜菜夜蛾幼蟲相比，cnusmxy173純合突變體上的甜菜夜蛾幼蟲生長更為緩慢，即抑制cnusmxy173基因表達(dá)可以增加植物對甜菜夜蛾的抗性。sequencelisting<110>首都師范大學(xué)<120>植物生長發(fā)育相關(guān)蛋白cnusmxy173及其編碼基因和應(yīng)用<130>gncyx171540<160>5<170>patentinversion3.5<210>1<211>377<212>prt<213>擬南芥（arabidopsisthaliana）<400>1metglythrthrasnglythrasptyrglyalatyrthrtyrlysglu151015leugluarggluglntyrtrpprosergluasnleulysileserile202530thrglyalaglyglypheilealaserhisilealaargargleulys354045hisgluglyhistyrvalilealaserasptrplyslysasngluhis505560metthrgluaspmetphecysaspgluphehisleuvalaspleuarg65707580valmetgluasncysleulysvalthrgluglyvalasphisvalphe859095asnleualaalaaspmetglyglymetglypheileglnserasnhis100105110servalilemettyrasnasnthrmetileserpheasnmetileglu115120125alaalaargileasnglyilelysargphephetyralaserserala130135140cysiletyrprogluphelysglnleugluthrthrasnvalserleu145150155160lysgluseraspalatrpproalagluproglnaspalatyrglyleu165170175glulysleualathrglugluleucyslyshistyrasnlysaspphe180185190glyileglucysargileglyargphehisasniletyrglyprophe195200205glythrtrplysglyglyargglulysalaproalaalaphecysarg210215220lysalaglnthrserthraspargpheglumettrpglyaspglyleu225230235240glnthrargserphethrpheileaspglucysvalgluglyvalleu245250255argleuthrlysseraspphearggluprovalasnileglyserasp260265270glumetvalsermetasnglumetalaglumetvalleuserpheglu275280285glulyslysleuproilehishisileproglyprogluglyvalarg290295300glyargasnseraspasnasnleuilelysglulysleuglytrpala305310315320proasnmetargleulysgluglyleuargilethrtyrphetrpile325330335lysgluglnileglulysglulysalalysglyseraspvalserleu340345350tyrglyserserlysvalvalglythrglnalaprovalglnleugly355360365serleuargalaalaaspglylysglu370375<210>2<211>1134<212>dna<213>擬南芥（arabidopsisthaliana）<400>2atgggaactaccaatggaacagactatggagcatacacatacaaggagctagaaagagag60caatattggccatctgagaatctcaagatatcaataacaggagctggaggtttcattgca120tctcacattgctcgtcgtttgaagcacgaaggtcattacgtgattgcttctgactggaaa180aagaatgaacacatgactgaagacatgttctgtgatgagttccatcttgttgatcttagg240gttatggagaattgtctcaaagttactgaaggagttgatcatgtttttaacttagctgct300gatatgggtggtatgggttttatccagagtaatcactctgtgattatgtataataatact360atgattagtttcaatatgattgaggctgctaggatcaatgggattaagaggttcttttat420gcttcgagtgcttgtatctatccagagtttaagcagttggagactactaatgtgagcttg480aaggagtcagatgcttggcctgcagagcctcaagatgcttatggtttggagaagcttgct540acggaggagttgtgtaagcattacaacaaagattttggtattgagtgtcgaattggaagg600ttccataacatttatggtccttttggaacatggaaaggtggaagggagaaggctccagct660gctttctgtaggaaggctcagacttccactgataggtttgagatgtggggagatgggctt720cagacccgttcttttacctttatcgatgagtgtgttgaaggtgtactcaggttgacaaaa780tcagatttccgtgagccggtgaacatcggaagcgatgagatggtgagcatgaatgagatg840gctgagatggttctcagctttgaggaaaagaagcttccaattcaccacattcctggcccg900gaaggtgttcgtggtcgtaactcagacaacaatctgatcaaagaaaagcttggttgggct960cctaatatgagattgaaggaggggcttagaataacctacttctggataaaggaacagatc1020gagaaagagaaagcaaagggaagcgatgtgtcgctttacgggtcatcaaaggtggttgga1080actcaagcaccggttcagctaggctcactccgcgcggctgatggaaaagagtga1134<210>3<211>2931<212>dna<213>擬南芥（arabidopsisthaliana）<400>3aggattttattagttataaaataaatttaacagaaagaggcacaaataccaataggagtt60ggaaaactaaaacaacgagtggtgttgctctctccatcttcctcttcatcttcttctgtt120ctctctctataaatacaagtttactcttcctcttcctcaaatctctgactcttctctgca180ttatctcttcgatctctccaactctccaaaaccttcctcaggtaaaagatccaatcttcc240ttacaattccactaatctagggttttaaaatcccagattcctgaatcaaaacttctctga300gatccgaatttcgcaattctgtgtttttggctaatttacgcctcgcaattttgtgttttt360cgctaacttacgccgaatccaatgcatcctctgtcaaaactctctaaatcccaaatcttt420ttacagaaatttatcacaaattaggattccacagtgatttctagctttcgcatgagagat480cttattgtgtttaacatatttctttgcaattttgtgtgtttttggctaacttaagcgtcg540caattttgtgtgttttcactaacttacaccgaatccaatgcattctctgtcaaaactctc600taaatcccaaatctttttacagaaattaatcacaaattaggattctacagtgatttctag660cttttgcatgagagatcttattgtgtttaacagatttgttttgcaattttgtgtgttttt720ggctaacttacgcctcgcagttttgtgtttttcgctaacttacgccggaatccaatgcat780caataatcttacctctgtcaaaactctctaaatcccaaatcttttttatagaaatttatc840acaaattaggactctacagtgatgtctagcttttgcatgagagatcttattgtttttaac900agatttgttttgttaatgtagaatgggaactaccaatggaacagactatggagcatacac960atacaaggagctagaaagagagcaatattggccatctgagaatctcaagatatcaataac1020aggagctggaggtttcattgcatctcacattgctcgtcgtttgaagcacgaaggtcatta1080cgtgattgcttctgactggaaaaagaatgaacacatgactgaagacatgttctgtgatga1140gttccatcttgttgatcttagggttatggagaattgtctcaaagttactgaaggagttga1200tcatgtttttaacttagctgctgatatgggtggtatgggttttatccagagtaatcactc1260tgtgattatgtataataatactatgattagtttcaatatgattgaggctgctaggatcaa1320tgggattaagaggttagttagattttgttttcttcggttttcgcagtttacggtttctta1380aaacaagttaaaaagattggattttttgtttgctttaggttcttttatgcttcgagtgct1440tgtatctatccagagtttaagcagttggagactactaatgtgagcttgaaggagtcagat1500gcttggcctgcagaggtttgtgattattttttatatgttcttgctaaagatttatgagtc1560ttttcttatgtgatgttttgatgctgatatagcctcaagatgcttatggtttggagaagc1620ttgctacggaggagttgtgtaagcattacaacaaagattttggtattgagtgtcgaattg1680gaaggttccataacatttatggtccttttggaacatggaaaggtagtatacagataaaca1740gtttccgtactttgtgtgaatgattagttgtttactattgggattaatatttgcttggat1800caacttaggtggaagggagaaggctccagctgctttctgtaggaaggctcagacttccac1860tgataggtttgagatgtggggagatgggcttcagacccgttcttttacctttatcgatga1920gtgtgttgaaggtgtactcaggtgagggtatctcctgatgttgatgaagttgtatgttag1980acgtaattggctgatattttcgtcatttttgttttataggttgacaaaatcagatttccg2040tgagccggtgaacatcggaagcgatgagatggtgagcatgaatgagatggctgagatggt2100tctcagctttgaggaaaagaagcttccaattcaccacattcctggcccggaaggtgttcg2160tggtcgtaactcagacaacaatctgatcaaagaaaagcttggttgggctcctaatatgag2220attgaaggtaccaacattatttacttaagtagctcaaagacaagataataatctaattct2280tttattactgatattgttttgaccataatcgttaaacaggaggggcttagaataacctac2340ttctggataaaggaacagatcgagaaagagaaagcaaagggaagcgatgtgtcgctttac2400gggtcatcaaaggtggttggaactcaagcaccggttcagctaggctcactccgcgcggct2460gatggaaaagagtgaagttcaccaaagtataagtcaagctcaaatatggccttttaagtt2520cagcaaaatgtttagatatatttttaggtagcttcctattaaaaaagcaataataagtgt2580tttggattttggttccttctattctgctaatccttgtttatgtttagttgaaaaagtttg2640cttgcattgttaagtctgttatcatattattgtggtcctttcattcacagtatgtatgtt2700tatcatcatagtcaagttgatgtcgtggtcctctcacggaccagtacaagtaagtggctt2760gtgttttttcttgcatcttatcatctattcacacatctctagaggttagggatcactcac2820ggtgactcaccattctttctcttccatccacttctttatcccattcctcggtcaaaaatg2880tcacacgtaataaatcataaggttttaagtttatatattgctttttttatg2931<210>4<211>4485<212>dna<213>人工序列<400>4cctgtggttggcatgcacatacaaatggacgaacggataaaccttttcacgcccttttaa60atatccgattattctaataaacgctcttttctcttaggtttacccgccaatatatcctgt120caaacactgatagtttaaactgaaggcgggaaacgacaatctgatcatgagcggagaatt180aagggagtcacgttatgacccccgccgatgacgcgggacaagccgttttacgtttggaac240tgacagaaccgcaacgttgaaggagccactcagccgcgggtttctggagtttaatgagct300aagcacatacgtcagaaaccattattgcgcgttcaaaagtcgcctaaggtcactatcagc360tagcaaatatttcttgtcaaaaatgctccactgacgttccataaattcccctcggtatcc420aattagagtctcatattcactctcaatccaaataatctgcaccggatctggatcgtttcg480catgattgaacaagatggattgcacgcaggttctccggccgcttgggtggagaggctatt540cggctatgactgggcacaacagacaatcggctgctctgatgccgccgtgttccggctgtc600agcgcaggggcgcccggttctttttgtcaagaccgacctgtccggtgccctgaatgaact660gcaggacgaggcagcgcggctatcgtggctggccacgacgggcgttccttgcgcagctgt720gctcgacgttgtcactgaagcgggaagggactggctgctattgggcgaagtgccggggca780ggatctcctgtcatctcaccttgctcctgccgagaaagtatccatcatggctgatgcaat840gcggcggctgcatacgcttgatccggctacctgcccattcgaccaccaagcgaaacatcg900catcgagcgagcacgtactcggatggaagccggtcttgtcgatcaggatgatctggacga960agagcatcaggggctcgcgccagccgaactgttcgccaggctcaaggcgcgcatgcccga1020cggcgatgatctcgtcgtgacccatggcgatgcctgcttgccgaatatcatggtggaaaa1080tggccgcttttctggattcatcgactgtggccggctgggtgtggcggaccgctatcagga1140catagcgttggctacccgtgatattgctgaagagcttggcggcgaatgggctgaccgctt1200cctcgtgctttacggtatcgccgctcccgattcgcagcgcatcgccttctatcgccttct1260tgacgagttcttctgagcgggactctggggttcgaaatgaccgaccaagcgacgcccaac1320ctgccatcacgagatttcgattccaccgccgccttctatgaaaggttgggcttcggaatc1380gttttccgggacgccggctggatgatcctccagcgcggggatctcatgctggagttcttc1440gcccacgggatctctgcggaacaggcggtcgaaggtgccgatatcattacgacagcaacg1500gccgacaagcacaacgccacgatcctgagcgacaatatgatcgggcccggcgtccacatc1560aacggcgtcggcggcgactgcccaggcaagaccgagatgcaccgcgatatcttgctgcgt1620tcggatattttcgtggagttcccgccacagacccggatgatccccgatcgttcaaacatt1680tggcaataaagtttcttaagattgaatcctgttgccggtcttgcgatgattatcatataa1740tttctgttgaattacgttaagcatgtaataattaacatgtaatgcatgacgttatttatg1800agatgggtttttatgattagagtcccgcaattatacatttaatacgcgatagaaaacaaa1860atatagcgcgcaaactaggataaattatcgcgcgcggtgtcatctatgttactagatcgg1920gcctcctgtcaatgctggcggcggctctggtggtggttctggtggcggctctgagggtgg1980tggctctgagggtggcggttctgagggtggcggctctgagggaggcggttccggtggtgg2040ctctggttccggtgattttgattatgaaaagatggcaaacgctaataagggggctatgac2100cgaaaatgccgatgaaaacgcgctacagtctgacgctaaaggcaaacttgattctgtcgc2160tactgattacggtgctgctatcgatggtttcattggtgacgtttccggccttgctaatgg2220taatggtgctactggtgattttgctggctctaattcccaaatggctcaagtcggtgacgg2280tgataattcacctttaatgaataatttccgtcaatatttaccttccctccctcaatcggt2340tgaatgtcgcccttttgtctttggcccaatacgcaaaccgcctctccccgcgcgttggcc2400gattcattaatgcagctggcacgacaggtttcccgactggaaagcgggcagtgagcgcaa2460cgcaattaatgtgagttagctcactcattaggcaccccaggctttacactttatgcttcc2520ggctcgtatgttgtgtggaattgtgagcggataacaatttcacacaggaaacagctatga2580ccatgattacgccaagcttgcatgcctgcaggtccccagattagccttttcaatttcaga2640aagaatgctaacccacagatggttagagaggcttacgcagcaggtctcatcaagacgatc2700tacccgagcaataatctccaggaaatcaaataccttcccaagaaggttaaagatgcagtc2760aaaagattcaggactaactgcatcaagaacacagagaaagatatatttctcaagatcaga2820agtactattccagtatggacgattcaaggcttgcttcacaaaccaaggcaagtaatagag2880attggagtctctaaaaaggtagttcccactgaatcaaaggccatggagtcaaagattcaa2940atagaggacctaacagaactcgccgtaaagactggcgaacagttcatacagagtctctta3000cgactcaatgacaagaagaaaatcttcgtcaacatggtggagcacgacacacttgtctac3060tccaaaaatatcaaagatacagtctcagaagaccaaagggcaattgagacttttcaacaa3120agggtaatatccggaaacctcctcggattccattgcccagctatctgtcactttattgtg3180aagatagtggaaaaggaaggtggctcctacaaatgccatcattgcgataaaggaaaggcc3240atcgttgaagatgcctctgccgacagtggtcccaaagatggacccccacccacgaggagc3300atcgtggaaaaagaagacgttccaaccacgtcttcaaagcaagtggattgatgtgatatc3360tccactgacgtaagggatgacgcacaatcccactatccttcgcaagacccttcctctata3420taaggaagttcatttcatttggagagaacacgggggactctagaggatccccgggtaccg3480agctcgaatttccccgatcgttcaaacatttggcaataaagtttcttaagattgaatcct3540gttgccggtcttgcgatgattatcatataatttctgttgaattacgttaagcatgtaata3600attaacatgtaatgcatgacgttatttatgagatgggtttttatgattagagtcccgcaa3660ttatacatttaatacgcgatagaaaacaaaatatagcgcgcaaactaggataaattatcg3720cgcgcggtgtcatctatgttactagatcgggaattcactggccgtcgttttacaacgtcg3780tgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgc3840cagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcct3900gaatggcgcccgctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttc3960cccgtcaagctctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacc4020tcgaccccaaaaaacttgatttgggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgataga4080cggtttttcgccctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaa4140ctggaacaacactcaaccctatctcgggctattcttttgatttataagggattttgccga4200tttcggaaccaccatcaaacaggattttcgcctgctggggcaaaccagcgtggaccgctt4260gctgcaactctctcagggccaggcggtgaagggcaatcagctgttgcccgtctcactggt4320gaaaagaaaaaccaccccagtacattaaaaacgtccgcaatgtgttattaagttgtctaa4380gcgtcaatttgtttacaccacaatatatcctgccaccagccagccaacagctccccgacc4440ggcagctcggcacaaaatcaccactcgatacaggcagcccatcag4485<210>5<211>2990<212>dna<213>擬南芥（arabidopsisthaliana）<400>5gatcaagatgactaatttaactaattacaagctatttttaaatttacacagtttttgcaa60ttagttcaaactaattctctaaatttattcacattaaactatctcttagttttatgatat120tgttaagatttgtttcttgaagttaagaaagtttatcaaataaattcaaatatatatatt180tgattaattatatattatatcaacaagaggatttctggatttgagataatatatcaagtc240ggtgtttatttatttatattaaatagtaaatataattttgttttcatatatgtgcacgta300cacaagaacaaatgtatgagtatgacatattatagttgatagatcatttattttttcaat360ttgttttcatgttttaatttatggtatgtttacaaattttaacaaagcatatgttaatcc420ccaaaagttacagctgtatctggtattgtgtttaaagataagtaaaaatgaactcggaac480atgatatttaatgtaatataacgagaataggaatgacgaaaaaggaacgacatagaagga540gccaacacgggataaaaacatagcttttagattacaacaagttacaatttaagcaaatta600acgtttgcaatcaaatatgtaacatgtgttttcaatttatacagcataaaaatgctcaaa660ataataaatgttattatagtatgctttataatagttaaaatttaaaaataaacaaatgta720atttaatatttatgaacaaaatattaaacaataagaagaaagaagtcaattaattttgta780atatttttattatatcatatcatataaaaatatacatgaattatatttgtgtttgtccca840aacaggatatagagaatttttgcttccatcacgttctgtttctaatcggaatacaaattt900tttctcatattagaaatgcattctcttatgagaaataaattggagaacgagtaagatata960atggaacatgataaaattgaatgagaattacgcctatctctaaatatttatatttctcgc1020aaacgtatttaatcattttaatggttttatatacggtttgatagtttacaagtttaataa1080aaatctacctgaccattaactcgaatcagtttgatctcggttcgaccgtttgattgttat1140gaactttaaaatactactaaaatcattattatttcaaatatttcaaccaactaatatagt1200ttaggttatatatatactataactatataaataatttttaacatcaatctaacttatatt1260atattttaatttaagatttttttttctaatttactcttcagtttcaaactccaaaaatgg1320acttatggttgctcttatgtcataaacaaacataaataatattttatatttttatgtgta1380cattataattattcaatacagtatatatcactaaaataacaaaataattatatatttaat1440aaaaatttattacaacacatttcttaatatatgaagatgtactattatttgcaaatacaa1500aatatgttaaatagtgttttagttaattagaaaataacaaaaattaaagtaatttttctc1560aaaataataattatttaaagattaattgcttaattatttgaattttataagaatttcctt1620ttaatgtgtattatatatatgtatgaataagactaattgaaaaatctgtaataatctagt1680aaaatttggacaattatttaaatggattagaatcacaacatgacggtttcgttaataaca1740cgccaatataaatattttattaaaaaaacttctcaattaatatatagaatatacatatat1800ttattatttacaaatatttttatatattgaagctagaaaataaaaaaattatgaaattgt1860ttggtgcaccaataaagaaaatatttagtttttttttttttctaaactaaaacatttctt1920attatctatctaaatacgattcaacaaatagtaaaaataatatgcataatataaatcatc1980aaacctaataaaaagtaataaatcttctataaaatctcctattttctaaaaaactctcta2040caaaagaagtattaattttttttttcgaaggattttattagttataaaataaatttaaca2100gaaagaggcacaaataccaataggagttggaaaactaaaacaacgagtggtgttgctctc2160tccatcttcctcttcatcttcttctgttctctctctataaatacaagtttactcttcctc2220ttcctcaaatctctgactcttctctgcattatctcttcgatctctccaactctccaaaac2280cttcctcaggtaaaagatccaatcttccttacaattccactaatctagggttttaaaatc2340ccagattcctgaatcaaaacttctctgagatccgaatttcgcaattctgtgtttttggct2400aatttacgcctcgcaattttgtgtttttcgctaacttacgccgaatccaatgcatcctct2460gtcaaaactctctaaatcccaaatctttttacagaaatttatcacaaattaggattccac2520agtgatttctagctttcgcatgagagatcttattgtgtttaacatatttctttgcaattt2580tgtgtgtttttggctaacttaagcgtcgcaattttgtgtgttttcactaacttacaccga2640atccaatgcattctctgtcaaaactctctaaatcccaaatctttttacagaaattaatca2700caaattaggattctacagtgatttctagcttttgcatgagagatcttattgtgtttaaca2760gatttgttttgcaattttgtgtgtttttggctaacttacgcctcgcagttttgtgttttt2820cgctaacttacgccggaatccaatgcatcaataatcttacctctgtcaaaactctctaaa2880tcccaaatcttttttatagaaatttatcacaaattaggactctacagtgatgtctagctt2940ttgcatgagagatcttattgtttttaacagatttgttttgttaatgtaga2990當(dāng)前第1頁12