本實(shí)用新型涉及一種細(xì)胞富集芯片，主要適用于細(xì)胞的分選，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

循環(huán)稀有細(xì)胞包括三個主要亞型，分別是循環(huán)腫瘤細(xì)胞（Circulating Tumor Cells, CTCs），循環(huán)干細(xì)胞（Circulating Stem Cells, CSCs），及循環(huán)胎兒細(xì)胞（Circulating Fetal Cells,CFCs）。通過標(biāo)準(zhǔn)化、GMP級的生物試劑分離循環(huán)稀有細(xì)胞，這樣可獲得高純度和高活性的CRCs，用于下游蛋白表征，基因分析和細(xì)胞分析。有效的單細(xì)胞分離和收集，為CRCs在診斷和制藥工業(yè)開辟了新的應(yīng)用范圍，而有效的單細(xì)胞分離和收集就需要有一種免疫捕獲和分選的載體，即細(xì)胞富集芯片。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本實(shí)用新型的目的在于提供一種結(jié)構(gòu)設(shè)計合理、分選效果好的細(xì)胞富集芯片。

本實(shí)用新型解決上述問題所采用的技術(shù)方案是：該細(xì)胞富集芯片包括上蓋、下蓋、硅膠膜和玻片，其特征在于：所述的硅膠膜貼合在玻片上，所述的硅膠膜和玻片放置在上蓋和下蓋之間；所述硅膠膜貼合玻片的一面設(shè)置有甬道，甬道是硅膠膜上的凹陷結(jié)構(gòu)；所述的甬道內(nèi)有多個凸起，所述凸起的高度小于甬道的深度。所述細(xì)胞富集芯片的玻片和硅膠膜貼合的一面上包被有能和循環(huán)稀有細(xì)胞特異性結(jié)合的物質(zhì)，用于捕獲循環(huán)稀有細(xì)胞，主要是循環(huán)腫瘤細(xì)胞；凸起使樣本流過甬道時增加了阻力，但不影響樣本溶液向前流動，可使能與循環(huán)稀有細(xì)胞特異性結(jié)合的物質(zhì)和循環(huán)稀有細(xì)胞充分接觸，提高捕獲效率。

本實(shí)用新型優(yōu)選所述的甬道至少有兩條。所述的甬道優(yōu)選為一條分為兩條、由兩條分為四條、由四條分為八條，共八條通路，樣本溶液在甬道中分流，充分與玻片上的與循環(huán)稀有細(xì)胞特異性結(jié)合的物質(zhì)接觸，提高了循環(huán)稀有細(xì)胞捕獲效率。

本實(shí)用新型所述凸起的高度依液體流動方向逐漸增大。有層次的結(jié)構(gòu)可達(dá)到梯度過濾的效果，減少了體積較大的目標(biāo)細(xì)胞的流失。細(xì)胞團(tuán)或體積大的細(xì)胞會被分步擋住，而循環(huán)稀有細(xì)胞的體積大于正常的血液細(xì)胞，并且會形成細(xì)胞團(tuán)，這樣的結(jié)構(gòu)利于正常血液細(xì)胞通過，同時將循環(huán)稀有細(xì)胞攔截留在細(xì)胞富集芯片中，和與循環(huán)稀有細(xì)胞特異性結(jié)合的物質(zhì)協(xié)同作用，提高了循環(huán)稀有細(xì)胞捕獲效率。

本實(shí)用新型所述的多個凸起均呈人字形，且方向一致、間距相等，呈規(guī)則排列。規(guī)則排列的人字形凸起共同構(gòu)成鯡魚骨型結(jié)構(gòu)，利于樣本溶液翻滾流動，充分與玻片上的循環(huán)稀有細(xì)胞捕獲物質(zhì)接觸。

本實(shí)用新型所述的多個凸起中，每單個凸起為完整的條狀結(jié)構(gòu)。

本實(shí)用新型所述的多個凸起中，每單個凸起由多個凸起的點(diǎn)組成條狀結(jié)構(gòu)。

實(shí)際情況中，凸起可以是完整的條狀結(jié)構(gòu)或者由多個點(diǎn)組成的條狀結(jié)構(gòu)；所述的條狀結(jié)構(gòu)可呈上述的人字形，也可呈波浪形、圓弧形等。

本實(shí)用新型具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果：具有鯡魚骨型結(jié)構(gòu)的硅膠膜和循環(huán)稀有細(xì)胞特異性結(jié)合的物質(zhì)聯(lián)合使用，提高了循環(huán)稀有細(xì)胞的捕獲效率，具有很好的分離效果；并且在此基礎(chǔ)上，有層次的結(jié)構(gòu)還能進(jìn)一步起到過濾、按細(xì)胞體積分選循環(huán)稀有細(xì)胞的效果。本實(shí)用新型用于人外周血中稀有細(xì)胞的分離與鑒定，可得到高純度和具活性的稀有細(xì)胞，應(yīng)用于下游蛋白質(zhì)表征、基因分析和細(xì)胞檢測，聯(lián)合檢測結(jié)果具有疾病的診斷、預(yù)防、監(jiān)護(hù)等臨床輔助診斷作用。

附圖說明

圖1是本實(shí)用新型的整體結(jié)構(gòu)示意圖。

圖2是本實(shí)用新型的拆分結(jié)構(gòu)示意圖。

圖3是本實(shí)用新型硅膠膜貼合玻片一面的結(jié)構(gòu)示意圖。

圖4是圖3其中一條甬道的A-A截面局部示意圖。

圖中：細(xì)胞富集芯片1，硅膠膜11，玻片12，上蓋13，下蓋14，甬道111，凸起112。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖并通過實(shí)施例對本實(shí)用新型作進(jìn)一步說明。

實(shí)施例一。

參見圖1-4，本實(shí)施例包括：細(xì)胞富集芯片1，硅膠膜11，玻片12，上蓋13，下蓋14，甬道111和凸起112。

參見圖1-4，在本實(shí)施例中，細(xì)胞富集芯片1為四層結(jié)構(gòu)，從上至下為上蓋13、硅膠膜11、玻片12和下蓋14，其中，硅膠膜11貼合在玻片12的上面，上蓋13蓋在下蓋14上，形成一個空腔，硅膠膜11和玻片12放置在這個空腔內(nèi)；硅膠膜11貼合玻片12的一面即硅膠膜11的下表面上有甬道111，甬道111為凹陷的細(xì)長條狀結(jié)構(gòu)，甬道111內(nèi)有凸起112，凸起112的高度小于甬道111的深度；硅膠膜11為PDMS（聚二甲基硅氧烷）材料，甬道111和凸起112采用蝕刻工藝加工而成；玻片12貼合硅膠膜11的一面上包被有能和循環(huán)稀有細(xì)胞特異性結(jié)合的物質(zhì)，在樣本流經(jīng)甬道111時，樣本中的循環(huán)稀有細(xì)胞會被捕獲留在細(xì)胞富集芯片1中。

在本實(shí)施例中，甬道111由一分二、由二分四、由四分八，共形成八條通路，提高效率；八條通路中均有凸起112，凸起112為完整的條狀結(jié)構(gòu)，且所有凸起112均呈人字形結(jié)構(gòu)、方向一致、相鄰間距相等，共同構(gòu)成鯡魚骨型結(jié)構(gòu)；同時，依液體流動方向，從液體入口到出口，凸起112的高度逐漸增加，形成一種有層次的鯡魚骨型結(jié)構(gòu)，可達(dá)到梯度過濾的效果，即細(xì)胞團(tuán)或體積大的細(xì)胞會被分步擋住，而循環(huán)稀有細(xì)胞的體積大于正常的血液細(xì)胞，并且會形成細(xì)胞團(tuán)，這樣的結(jié)構(gòu)利于正常血液細(xì)胞通過，同時將循環(huán)稀有細(xì)胞攔截留在細(xì)胞富集芯片1中。

本實(shí)用新型的工作過程如下：

樣本注入，樣本緩慢流過細(xì)胞富集芯片1，由于有層次的鯡魚骨型結(jié)構(gòu)和能與循環(huán)稀有細(xì)胞特異性結(jié)合的物質(zhì)兩者聯(lián)合作用，循環(huán)稀有細(xì)胞被捕獲和富集在細(xì)胞富集芯片1中；注入清洗液，再注入細(xì)胞染色前處理劑，細(xì)胞染色預(yù)處理完成；注入清洗液再注入染色劑，孵育，細(xì)胞染色完成；可直接采用倒置熒光顯微鏡觀察。另外，循環(huán)稀有細(xì)胞被捕獲完成后，也可注入清洗液清洗后拆開細(xì)胞富集芯片1，即拆分上蓋13和下蓋14，分離硅膠膜11和玻片12，循環(huán)稀有細(xì)胞被捕獲在玻片12上和甬道111中，可進(jìn)行后續(xù)染色觀察或挑取活細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)和分析。

本說明書中沒有詳細(xì)描述的部分均采用本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的結(jié)構(gòu)和原理，均為現(xiàn)有技術(shù)。

通過上述描述，本領(lǐng)域的技術(shù)人員已能實(shí)施。

此外，需要說明的是，本說明書中所描述的具體實(shí)施例，只要其部件未明確說明具體規(guī)格的，則該部件可以為與其功能相適應(yīng)的任何規(guī)格；同時，部件所取的名稱也可以不同。凡依本實(shí)用新型構(gòu)思所述的構(gòu)造、特征及原理所做的等效或簡單變化，均包括于本實(shí)用新型專利的保護(hù)范圍內(nèi)。