本實用新型涉及分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種分離核酸的試劑盒,特別涉及一種從血漿樣品中分離游離核酸的試劑盒。
背景技術(shù):
1970年,歐洲學(xué)者首次報道腫瘤病人的血漿或血漿中存在游離DNA,其含量為健康人群的10倍左右,其為雙鏈DNA分子,長度基本在500bp以下,大部分以核小體形式存在。大量研究證明,游離DNA與腫瘤基因組DNA具有相同的遺傳變異,例如,基因突變、基因啟動子甲基化等,因此,游離核酸可被用于一種預(yù)測腫瘤發(fā)生的新型標(biāo)記物。存在于血漿或血清中來源于腫瘤細(xì)胞的游離DNA主要來源于:腫瘤細(xì)胞的凋亡、壞死釋放到血液中和腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、增殖釋放到血液中。
近年來,游離DNA研究成為基因組分子診斷研究的一個熱門領(lǐng)域,首先其可作為一種無創(chuàng)診斷方法,可以隨時采集患者樣本進(jìn)行相關(guān)檢測分析。其次,其可作為一類新型生物標(biāo)志物,因其具有與腫瘤細(xì)胞基因組相同的遺傳變異,具有顯著的特異性,可以對腫瘤進(jìn)行分型及早期篩查。因此,循環(huán)游離DNA的檢測在臨床診斷上具有非常重要的應(yīng)用價值,如癌癥早期篩查、腫瘤復(fù)發(fā)、療效監(jiān)控等。游離DNA研究的主要障礙為:游離DNA的分離純化和高靈敏度檢測。因游離DNA在血液中的含量低,且片段長度短,為游離DNA研究帶來比較大的困難。
目前核酸提取方法主要有酚氯仿抽提、磁珠法和離心柱法。酚氯仿抽提因大量使用有毒溶劑,對操作者健康有一定危險。磁珠法提取核酸技術(shù),其采用磁性納米顆粒,利用在高鹽低pH下吸附核酸,然后在低鹽高pH下分離核酸的原理進(jìn)行樣本核酸的分離純化,但因其操作過于復(fù)雜,并且需要一定溫度下使用ProteinaseK進(jìn)行孵育,同時需要多步洗滌等步驟,導(dǎo)致核酸提取的重復(fù)性差及提取效率低。離心柱法因其該方法簡單快速,無需有機(jī)提取,高效回收DNA和RNA碎片,能有效的去除樣本中的各種PCR抑制物,純化效率高、重現(xiàn)性好、產(chǎn)量高。
這樣目前就提出了一種從血漿中分離游離核酸的方法,包括如下步驟:
1)向血漿樣本中加入裂解緩沖液、Proteinase K、Acryl Carrier,混勻;
2)向步驟1)的得到的混合液中加二氧化硅基質(zhì)膜離心柱,離心,棄廢液,將離心柱放回收集管中;
3)向步驟2)所得的離心柱中加入Wash BufferⅠ,離心,棄廢液,將吸附柱放回收集管中;
4)向步驟3)所得的離心柱中加入Wash BufferⅡ,離心,棄廢液,晾干離心柱,將離心柱放回收集管中;所述Wash BufferⅡ為CH3(CH2)nOH,n=0-3;
5)向步驟4)所得離心柱加入洗脫緩沖液,室溫放置2-5min,離心,收集洗脫液,所得洗脫液即為分離的游離核酸,所述洗脫緩沖液包含三羥甲基氨基甲烷、EDTA。
要完成上述的方法,所述裂解緩沖液、Proteinase K、Wash BufferⅠ、洗脫緩沖液和Wash BufferⅡ這樣的反應(yīng)液往往需要分開保存在不同的容器中,另外棄廢液要通過回收廢液的裝置回收廢液,且還需要離心管和二氧化硅基質(zhì)膜離心柱這樣的處理裝置,然而目前這樣的容器、回收廢液的裝置以及處理裝置往往是各自以散件的形式來散亂的放置,這樣在使用的過程中會因為這些散件散亂的放置而沒有集中在一起,運作的時候很不方便并且影響效率,特別是要去偏遠(yuǎn)的醫(yī)療條件不好的地區(qū)來從血漿樣品中分離游離核酸就更為嚴(yán)重,這樣的散件在攜帶和使用方面更不方便,于是就將所述容器、回收廢液的裝置和處理裝置放置在盒體里來方便攜帶,但是在盒體中的所述容器與回收廢液的裝置由于存放著試劑和廢液,在攜帶所述盒體在行走顛簸時常常發(fā)生傾斜從而無法保持所述容器與回收廢液的裝置的豎直狀態(tài)而使得所述容器與回收廢液的裝置也產(chǎn)生傾斜,這樣就會導(dǎo)致試劑的漏出所述容器與回收廢液的裝置之外而產(chǎn)生污損的缺陷。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
為解決上述問題,本實用新型提供了一種分離核酸的試劑盒,有效避免了現(xiàn)有技術(shù)中在攜帶所述盒體行走顛簸時常常無法保持所述容器與回收廢液的裝置的豎直狀態(tài)而產(chǎn)生傾斜的缺陷。
為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足,本實用新型提供了一種分離核酸的試劑盒的解決方案,具體如下:
一種分離核酸的試劑盒,包括設(shè)有外周壁的盒體30和放置在該盒體中的容納容器和回收廢液的裝置的保存裝置31,所述保存裝置通過樞轉(zhuǎn)裝置32與所述外周壁樞轉(zhuǎn)連接,所述保存裝置的底部設(shè)有配重33使得所述試劑盒傾斜時該保存裝置仍保持水平位置。
進(jìn)一步地,所述保存裝置包括設(shè)置有多個槽口的支撐板22,所述樞轉(zhuǎn)裝置設(shè)置在該支撐板22的兩端,所述樞轉(zhuǎn)裝置的樞軸平行于攜帶所述盒體時盒體發(fā)生樞轉(zhuǎn)的樞軸34。
進(jìn)一步地,所述槽口中的卡接口與所述容器外壁設(shè)有的卡接頭相卡接,所述回收廢液的裝置與所述槽口中的插孔相過渡配合。
進(jìn)一步地,所述盒體1還容納有處理反應(yīng)液的處理裝置,所述處理反應(yīng)液的處理裝置包括離心管和二氧化硅基質(zhì)膜離心柱。
進(jìn)一步地,所述盒體1帶有頂部開口,所述頂部開口由頂蓋9覆蓋,所述頂蓋9的底壁上連接有覆蓋在所述回收廢液的裝置的頂部上的襯墊8。所述盒體與頂蓋均由白色泡沫制作,且盒體與頂蓋是可分離的。
本實用新型的有益效果為:
通過包括設(shè)有外周壁的盒體和放置在該盒體中的容納容器和回收廢液的裝置的保存裝置,所述保存裝置通過樞轉(zhuǎn)裝置與所述外周壁樞轉(zhuǎn)連接,所述保存裝置的底部設(shè)有配重使得所述試劑盒傾斜時該保存裝置仍保持水平位置,這樣在手握提手?jǐn)y帶該試劑盒行走顛簸而使得所述試劑盒發(fā)生傾斜時,所述配重牽引所述樞轉(zhuǎn)裝置產(chǎn)生樞轉(zhuǎn)使得該保存裝置和回收廢液的裝置仍保持水平位置,從而保證了所述容器和回收廢液的裝置保持豎直,這樣就防止了所述容器和回收廢液的裝置由于傾斜發(fā)生試劑漏出所述容器之外而產(chǎn)生污損的問題。
附圖說明
圖1是本實用新型的分離核酸的試劑盒的整體結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2是本實用新型的盒體的立體結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實施方式
下面將結(jié)合附圖和實施例對本實用新型做進(jìn)一步地說明。
實施例1
根據(jù)附圖1-圖2可知,本實施例的分離核酸的試劑盒,包括設(shè)有外周壁的盒體30和放置在該盒體中的容納容器和回收廢液的裝置的保存裝置31,所述保存裝置通過樞轉(zhuǎn)裝置32與所述外周壁樞轉(zhuǎn)連接,所述保存裝置的底部設(shè)有配重33使得所述試劑盒傾斜時該保存裝置仍保持水平位置。
通過包括設(shè)有外周壁的盒體和放置在該盒體中的容納容器和回收廢液的裝置的保存裝置,所述保存裝置通過樞轉(zhuǎn)裝置與所述外周壁樞轉(zhuǎn)連接,所述保存裝置的底部設(shè)有配重使得所述試劑盒傾斜時該保存裝置仍保持水平位置,這樣在手握提手?jǐn)y帶該試劑盒行走顛簸而使得所述試劑盒發(fā)生傾斜時,所述配重牽引所述樞轉(zhuǎn)裝置產(chǎn)生樞轉(zhuǎn)使得該保存裝置和回收廢液的裝置仍保持水平位置,從而保證了所述容器和回收廢液的裝置保持豎直,這樣就防止了所述容器和回收廢液的裝置由于傾斜發(fā)生試劑漏出所述容器之外而產(chǎn)生污損的問題。
實施例2
根據(jù)附圖1-圖2可知,本實施例的分離核酸的試劑盒,包括設(shè)有外周壁的盒體30和放置在該盒體中的容納容器和回收廢液的裝置的保存裝置31,所述保存裝置通過樞轉(zhuǎn)裝置32與所述外周壁樞轉(zhuǎn)連接,所述保存裝置的底部設(shè)有配重33使得所述試劑盒傾斜時該保存裝置仍保持水平位置。
所述盒體4帶有頂部開口,所述保存裝置包括設(shè)置有多個槽口的支撐板22,所述樞轉(zhuǎn)裝置設(shè)置在該支撐板22的兩端,所述樞轉(zhuǎn)裝置的樞軸平行于攜帶所述盒體時盒體發(fā)生樞轉(zhuǎn)的樞軸34。
通過包括設(shè)有外周壁的盒體和放置在該盒體中的容納容器和回收廢液的裝置的保存裝置,所述保存裝置通過樞轉(zhuǎn)裝置與所述外周壁樞轉(zhuǎn)連接,所述保存裝置的底部設(shè)有配重使得所述試劑盒傾斜時該保存裝置仍保持水平位置,這樣在手握提手?jǐn)y帶該試劑盒行走顛簸而使得所述試劑盒發(fā)生傾斜時,所述配重牽引所述樞轉(zhuǎn)裝置的樞軸產(chǎn)生樞轉(zhuǎn)使得該保存裝置和回收廢液的裝置仍保持水平位置,從而保證了所述容器和回收廢液的裝置保持豎直,這樣就防止了所述容器和回收廢液的裝置由于傾斜發(fā)生試劑漏出所述容器之外而產(chǎn)生污損的問題。
實施例3
根據(jù)附圖1-圖2可知,本實施例的分離核酸的試劑盒,包括設(shè)有外周壁的盒體30和放置在該盒體中的容納容器和回收廢液的裝置的保存裝置31,所述保存裝置通過樞轉(zhuǎn)裝置32與所述外周壁樞轉(zhuǎn)連接,所述保存裝置的底部設(shè)有配重33使得所述試劑盒傾斜時該保存裝置仍保持水平位置。
所述盒體4帶有頂部開口,所述保存裝置包括設(shè)置有多個槽口的支撐板22,所述樞轉(zhuǎn)裝置設(shè)置在該支撐板22的兩端,所述樞轉(zhuǎn)裝置的樞軸平行于攜帶所述盒體時盒體發(fā)生樞轉(zhuǎn)的樞軸34。
所述槽口中的卡接口與所述容器外壁設(shè)有的卡接頭相卡接,所述回收廢液的裝置與所述槽口中的插孔相過渡配合。
所述盒體1還容納有處理反應(yīng)液的處理裝置,所述處理反應(yīng)液的處理裝置包括離心管和二氧化硅基質(zhì)膜離心柱。所述槽口數(shù)量為4個,自左到右分別為第一槽口3、第二槽口20、第三槽口17和第四槽口12,所述第一槽口3中設(shè)有五個卡接口,所述五個卡接口分別與裝有裂解緩沖液的容器2的外壁上設(shè)有的卡接頭、裝有Proteinase K的容器5的外壁上設(shè)有的卡接頭、裝有Wash BufferⅠ的容器6的外壁上設(shè)有的卡接頭、裝有洗脫緩沖液的容器7的外壁上設(shè)有的卡接頭和裝有Wash BufferⅡ的容器21的外壁上設(shè)有的卡接頭相卡接,所述回收廢液的裝置包括多個燒杯19,所述第二槽口20中設(shè)有與燒杯數(shù)量一致的插孔,所述燒杯19一一對應(yīng)的以過渡配合的方式連接在插孔中,所述離心管插接在所述第三槽口中的插孔內(nèi),二氧化硅基質(zhì)膜離心柱11設(shè)置在第四槽口中,所述離心管包括5ml離心管10、10ml離心管13、15ml離心管14、50ml離心管15和25ml離心管16。
所述盒體1帶有頂部開口,所述頂部開口由頂蓋9覆蓋,所述頂蓋9的底壁上連接有覆蓋在所述回收廢液的裝置的頂部上的襯墊8,這樣很好的起到了遮蓋所述回收廢液的裝置的作用。所述盒體與頂蓋均由白色泡沫制作,且盒體與頂蓋是可分離的。
提手35同所述盒體發(fā)生樞轉(zhuǎn)的樞軸相連接,所述盒體發(fā)生樞轉(zhuǎn)的樞軸同盒體的上部相連接。所述容器和回收廢液的裝置為豎直排列。
通過包括設(shè)有外周壁的盒體和放置在該盒體中的容納容器和回收廢液的裝置的保存裝置,所述保存裝置通過樞轉(zhuǎn)裝置與所述外周壁樞轉(zhuǎn)連接,所述保存裝置的底部設(shè)有配重使得所述試劑盒傾斜時該保存裝置和回收廢液的裝置仍保持水平位置,這樣在手握提手?jǐn)y帶該試劑盒行走顛簸而使得所述試劑盒發(fā)生傾斜時,所述配重牽引所述樞轉(zhuǎn)裝置的樞軸產(chǎn)生樞轉(zhuǎn)使得該保存裝置和回收廢液的裝置仍保持水平位置,從而保證了所述容器和回收廢液的裝置保持豎直,這樣就防止了所述容器和回收廢液的裝置由于傾斜發(fā)生試劑漏出所述容器之外而產(chǎn)生污損的問題。
以上以附圖說明的方式對本實用新型作了描述,本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解,本公開不限于以上描述的實施例,在不偏離本實用新型的范圍的情況下,可以做出各種變化、改變和替換。