本發(fā)明涉及新的抗葉酸劑接頭-藥物、包含這樣的抗葉酸劑接頭-藥物的綴合物，及其在治療疾病例如癌癥、自身免疫病和感染性疾病中的用途，所述抗葉酸劑接頭-藥物、包含這樣的抗葉酸劑接頭-藥物的綴合物任選地與另外的治療劑組合。

背景技術(shù)：

1、抗葉酸劑(antifolate)是一類拮抗葉酸(維生素b9)的作用的抗代謝化合物。

2、

3、葉酸充當(dāng)參與絲氨酸、甲硫氨酸、胸苷和嘌呤生物合成的多種甲基轉(zhuǎn)移酶的輔因子。因此，抗葉酸劑抑制細(xì)胞分裂、dna和rna合成和修復(fù)以及蛋白質(zhì)合成。大多數(shù)抗葉酸劑通過抑制二氫葉酸還原酶(dihydrofolatereductase，dhfr)發(fā)揮作用。

4、抗葉酸劑氯胍(proguanil)、乙胺嘧啶和甲氧芐啶在微生物例如細(xì)菌、原蟲和真菌中選擇性地抑制葉酸的作用。另一些抗葉酸劑(例如甲氨蝶呤(methotrexate)、培美曲塞(pemetrexed)、普拉曲沙(pralatrexate)和talotrexin)用于治療一些類型的癌癥和/或炎性病癥，例如自身免疫病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

5、甲氨蝶呤，以前稱為氨甲喋呤(amethopterin)，是最古老且最著名的葉酸類似物。其發(fā)現(xiàn)于20世紀(jì)50年代并且是化學(xué)治療劑和免疫系統(tǒng)抑制劑。其最初是為化學(xué)治療而開發(fā)的，單獨(dú)或與另一些藥劑組合使用，并且仍用于治療例如膀胱癌、乳腺癌、頭頸癌、白血病、肺癌、淋巴瘤、妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病和骨肉瘤。甲氨蝶呤也被用作一些自身免疫病的疾病修飾治療(disease-modifying?treatment)，所述自身免疫病包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年性皮肌炎、銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、狼瘡、結(jié)節(jié)病、克羅恩病(crohn′sdisease)、濕疹和血管炎。另一些用途包括治療異位妊娠和誘導(dǎo)藥物流產(chǎn)。

6、培美曲塞用于治療多種癌癥適應(yīng)證，包括間皮瘤、肺癌和頭頸癌。其在化學(xué)上與葉酸相似，并通過抑制dhfr、胸苷酸合酶(thymidylatesynthase，ts)和甘氨酰胺核糖核苷酸甲?；D(zhuǎn)移酶(glycinamideribonucleotide?formyltransferase，garft)來發(fā)揮作用，這三種酶用于嘌呤和嘧啶合成。通過抑制前體嘌呤和嘧啶核苷酸的形成，培美曲塞阻止了正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞二者生長和存活所需的dna和rna的形成。

7、普拉曲沙被批準(zhǔn)用于治療外周t細(xì)胞淋巴瘤。其被設(shè)計(jì)為對還原型葉酸載體1(reduced?folate?carrier?1，rfc-1)以及葉酸多聚谷氨酸合成酶具有提高的親和力，分別導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)攝取和細(xì)胞毒性代謝物的增加。

8、talotrexin是氨蝶呤(aminopterin)的抗代謝類似物，氨蝶呤是葉酸的4-氨基衍生物，并且也是蝶呤的合成衍生物。talotrexin表現(xiàn)出抗腫瘤活性，并結(jié)合dhfr和抑制dhfr的功能。水溶性talotrexin通過還原型葉酸載體(rfc)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞中，并因此不太可能與p-糖蛋白介導(dǎo)的多藥抗性相關(guān)。

9、

10、(a)甲氨蝶呤、(b)培美曲塞、(c)普拉曲沙和(d)talotrexin的分子結(jié)構(gòu)

11、抗葉酸劑在dna和rna合成期間發(fā)揮特異性作用，并因此在細(xì)胞周期的s期期間主要具有細(xì)胞毒性。因此，它們對快速分裂的細(xì)胞(更頻繁地復(fù)制其dna)(例如惡性細(xì)胞和髓樣細(xì)胞)有更大的毒性作用。然而，它們不僅抑制腫瘤細(xì)胞的生長和增殖，而且抑制快速分裂的非癌性細(xì)胞例如骨髓細(xì)胞以及胃腸和口腔黏膜細(xì)胞的生長和增殖，這導(dǎo)致例如骨髓、腸、口腔黏膜、皮膚和毛中的不良事件。

12、由細(xì)胞毒性小分子藥物(例如抗葉酸劑)引起的全身性毒副作用可以通過將這樣的藥物經(jīng)由化學(xué)接頭與靶向分子(例如如抗體、抗原結(jié)合抗體片段或融合蛋白(例如與抗體fc融合的受體配體))綴合來減少。通過將這兩種組分即細(xì)胞毒性小分子藥物和靶向分子組合成單個(gè)的新分子實(shí)體，靶向分子可以特異性地將細(xì)胞毒性小分子藥物遞送至靶細(xì)胞或組織(在那里，它可以發(fā)揮其細(xì)胞毒性活性)，從而減少非靶組織向小分子的暴露。

13、為了提高甲氨蝶呤的靶向性和降低甲氨蝶呤的毒性，已經(jīng)在20世紀(jì)80年代后期制備了數(shù)種甲氨蝶呤的抗體-藥物綴合物(antibody-drugconjugate，adc)。這些賴氨酸綴合adc的藥物與抗體比率(drug-to-antibody?ratio，dar)為9.4至45。盡管adc的概念是成功的，但是在體外(shen?et?al，cancer?res.1986，46，3912-3916；umemoto?et?al，int.j.cancer?1989，43，677-684)和體內(nèi)(deguchi?et?al，cancer?res.1986，46，3751-3755；rowland?et?al，br.j.cancer?1990，61，702-708)獲得的這些adc的效力結(jié)果為中等到較差。即使在高dar下，甲氨蝶呤作為adc毒素也沒有顯示出足夠有效。

14、盡管已經(jīng)制備并測試了培美曲塞的短腫瘤靶向肽綴合物(miklán?et?al，j.pept.sci.2011，17，805-811)，但沒有進(jìn)一步探討這個(gè)概念。從未報(bào)道過更有效的抗葉酸劑(例如培美曲塞、普拉曲沙和talotrexin)的adc。

15、因此，需要新的和改善的靶特異性綴合物，其包含抗葉酸劑和抗體、抗原結(jié)合片段或其他靶向分子，適合于單獨(dú)或與另外的治療劑組合用于治療癌癥、自身免疫病和感染性疾病。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明涉及新的抗葉酸劑接頭-藥物、包含這樣的抗葉酸劑接頭-藥物的綴合物，及其在治療疾病例如癌癥、自身免疫病和感染性疾病中的用途，所述抗葉酸劑接頭-藥物、包含這樣的抗葉酸劑接頭-藥物的綴合物任選地與另外的治療劑組合。

2、在第一方面，本發(fā)明涉及式(i)的接頭-藥物化合物

3、

4、其中，

5、r1是o、nh2或oh；

6、r2和r2’獨(dú)立地是n、ch、cme、c-et、c-乙炔、c-乙烯基、c-cn、c-oh、c-ome、c-sh、c-sme、c-鹵素，其中鹵素優(yōu)選地是cl、c-chal3、c-chhal2或c-ch2hal，其中hal是鹵素，優(yōu)選f；

7、r3是o、s、nh、n(c1-5烷基)、n(c2-4烯基)、n(c2-4炔基)、n-ch2cn、n-ch2ch2hal、ch2、ch(c1-5烷基)、ch(c2-4烯基)、ch(c2-4炔基)、ch(c1-4烷氧基)、ch-ch2cn或ch-ch2ch2hal，其中hal是鹵素，優(yōu)選f；

8、r4是h、鹵素、-cooh、oh、nh2、-conh2、-conhr、-conr2、c1-4烷基、c1-4烷氧基、芐氧基、四唑、-so3h、-nso3h、-oso3h、-po3h2、-npo3h2、-opo3h2、-cn或疊氮基，其中r選自h和c1-5烷基，或者r4是選自以下的羧酸生物電子等排體：

9、

10、其中ra’選自h、ch2f、chf2、cf3和c1-6烷基，每個(gè)ra獨(dú)立地選自h、f、ch2f、chf2、cf3和c1-6烷基，并且兩個(gè)ra取代基可任選地連接形成環(huán)；

11、r5是h、鹵素、nh2、oh、sh、cf3、c1-4烷基、c2-4烯基、c2-4炔基、c1-4烷氧基或c1-4烷硫基，優(yōu)選h、f、ch3、cf3、ch2ch3、ch＝ch2、ch2cf3或cf2cf3，更優(yōu)選h或f，或者r3和r5任選地通過一個(gè)或更多個(gè)鍵連接以形成任選地經(jīng)取代的碳環(huán)或雜環(huán)，優(yōu)選任選地經(jīng)取代的5元或6元碳環(huán)或雜環(huán)；

12、r6是h、c1-4烷基、c2-4烯基、c3-6環(huán)烷基，優(yōu)選h；

13、r7是h或f；

14、n是1、2、3或4，優(yōu)選3；

15、q是不存在的，或者為-n(r8)-(c＝o)-、-(c＝o)-n(r8)-、-ch2n(r8)-、-n(r8)ch2-、-n(r8)so2-、或-so2n(r8)-，其中r8是h、c1-4烷基、c1-4烯基或c1-4炔基，優(yōu)選h，或者q是選自以下的酰胺鍵生物電子等排體：

16、

17、其中rb選自h和c1-5烷基，t1、t1’和t1”獨(dú)立地選自ch和n，并且w1、w1’和w1”獨(dú)立地選自c、ch、s、n、nh、n(c1-5烷基)和o；

18、v是芳基、雜芳基、雜環(huán)或環(huán)烷烴，其任選地被一個(gè)或更多個(gè)r4基團(tuán)取代，并且獨(dú)立地選自：

19、

20、其中u1、u1’、u1”、u2、u2’、u2”和u2”’獨(dú)立地選自c、ch、s、n、nh、n(c1-5烷基)和o，優(yōu)選地v是任選地被一個(gè)或更多個(gè)r4基團(tuán)取代的亞苯基，或者v選自：

21、

22、其中z是o、s、nh或nrc，并且rc選自h和c1-5烷基；

23、s是0或1，優(yōu)選1；

24、w是任選地被一個(gè)或更多個(gè)r5基團(tuán)取代的芳基或雜芳基；

25、x是選自o、nh、s、c1-5亞烷基、c1-5亞烯基和c1-5亞炔基的連接基團(tuán)；k是1、2、3或4，優(yōu)選1；

26、l是接頭部分；并且

27、意指所示的鍵可以是單鍵或非累積的、任選地離域的雙鍵。

28、在第二方面中，本發(fā)明涉及式(iii)的抗體-藥物綴合物ab-(l-d)y(iii)，

29、其中ab是抗體或其抗原結(jié)合片段；

30、l-d是根據(jù)本發(fā)明的接頭-藥物化合物；

31、y表示1至16的平均藥物與抗體比率；

32、并且其中根據(jù)本發(fā)明的接頭-藥物化合物與抗體或其抗原結(jié)合片段綴合，優(yōu)選地通過抗體或抗原結(jié)合片段的半胱氨酸殘基。

33、本發(fā)明的另一些方面包括包含本發(fā)明的接頭-藥物化合物或抗體-藥物綴合物的藥物組合物、它們的合成方法以及它們作為藥物的用途，特別是用于治療癌癥、自身免疫病或感染性疾病的用途。