本發(fā)明涉及蛋白檢測，具體涉及免疫診斷材料領域。

背景技術：

1、蛋白結合表面(即免疫測定試劑體系中的固相載體的表面)的封閉在以固相載體為基礎的免疫診斷領域非常重要。在免疫診斷中，以化學發(fā)光、免疫層析、elisa、膠乳比濁等檢測手段所用的固相載體如免疫磁珠、多孔包被板、熒光微球、膠乳微粒、膠體金、玻璃、毛細管、尼龍和硝酸纖維素膜等的表面對雜質蛋白的非特異性吸附會導致信噪比，即檢測靈敏度的顯著下降，同時可能引起假陽性，對疾病及其進程的診斷造成失誤和醫(yī)療事故。

2、因此，蛋白結合表面的封閉在整個診斷流程中起重要作用。目前常用的封閉試劑主要成分為蛋白類試劑，如牛血清白蛋白、酪蛋白等；以及血清類，如胎牛血清、馬血清等；并且還包含一些小分子或大分子化合物(以下簡稱輔助試劑)，如明膠、聚乙二醇、三乙醇胺、三羥甲基氨基甲烷(tris)等等。上述蛋白類成分和上述輔助試劑可分別獨立作為封閉劑使用，也可整體作為封閉劑使用。在一些診斷過程，或如免疫印跡實驗中，對封閉劑有較大用量需求、較低成本要求和較高性能要求。

3、具體地，在化學發(fā)光平臺檢測、elisa平臺檢測、免疫層析平臺檢測、膠乳比濁平臺檢測等場景，通常采用往緩沖液加入牛血清白蛋白(bsa)的方式配置封閉劑，同時往緩沖液加入一些輔助試劑，即得到蛋白類封閉劑。這類封閉劑的特點是可以較好的封閉固相載體以及其它試劑分子表面的疏水位點，但是，bsa提純難度大、成本高，作為生物技術制品存在批間差難控制的問題。同時，因為蛋白附著于固相載體表面，也可能與樣本中其它蛋白類成分產(chǎn)生物理化學相互作用，降低其提升靈敏度的能力。最后，蛋白類試劑可能會阻擋應正常進行物理化學結合的位點，會導致檢測信號值降低。

4、另外，上述輔助試劑也可以單獨使用作為封閉劑，即為化合物封閉劑，當前主要應用的試劑以聚乙二醇、三乙醇胺和一些多糖類為主，這類封閉劑的特點是性能時好時差，各個檢測平臺(如免疫層析檢測平臺、化學發(fā)光檢測平臺、膠乳比濁檢測平臺等)和各個固相載體無法統(tǒng)一使用，大大限制了封閉劑的應用場景。

5、因此，亟需開發(fā)一種無蛋白類成分且可避免固相載體非特異性吸附的固相載體封閉試劑。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在至少一定程度上解決相關技術中的技術問題之一。為此，本發(fā)明的目的在于提供一種兩性多臂聚乙二醇衍生物及其在固相載體非特異性吸附封閉劑的用途。本發(fā)明提供的兩性多臂聚乙二醇衍生物的臂端具有疏水基團，可封閉固相載體表面的疏水位點，聚乙二醇骨架提供親水性能，防止樣本中干擾物質或免疫檢測體系試劑基于疏水作用的非特異性吸附，提升固相載體封閉效果，由其為主要成分配制的封閉劑使試劑靈敏度與bsa封閉劑(蛋白類封閉劑)相比，具有一定提升，可作為較低成本的蛋白類封閉劑替代品應用于實踐中。

2、為此，本發(fā)明第一方面提供一種化合物，所述化合物為式(i)所示化合物或式(i)所示化合物的互變異構體、立體異構體、水合物、溶劑化物：

3、

4、其中，

5、n，x為整數(shù)，2≤n≤10；1≤x≤10；

6、m獨立的選自酰胺鍵、醚鍵、碳氮單鍵；

7、所述化合物中每一個單體結構中的r獨立的選自下列基團：c2-c8烷基、c2-c8烯基、c2-c8炔基、c3-c8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、c6-c8芳基、5-8元雜芳基。

8、進一步地，2≤n≤6；進一步地，n為2、4或6；進一步地，n為2。

9、進一步地，1≤x≤8；進一步地，1≤x≤4；進一步地，x為2。

10、進一步地，m為酰胺鍵。

11、進一步地，所述化合物中每一個單體結構中的r獨立的選自下列基團：c4-c6烷基、c4-c6烯基、c4-c6炔基、c4-c6環(huán)烷基、4-6元雜環(huán)基、芳基；

12、進一步地，所述化合物中每一個單體結構中的r獨立的選自c4-c6烷基；

13、進一步地，每一個單體結構中的r為c6烷基。

14、相較于提純難度大、成本高、易與樣本中其他蛋白類成分產(chǎn)生相互作用的蛋白類封閉試劑，以及封閉效果差、易產(chǎn)生過度封閉的小分子封閉試劑，本發(fā)明的如式(ⅰ)所示化合物，其臂端具有疏水基團，可封閉固相載體表面的疏水位點，同時聚乙二醇骨架提供親水性能，阻擋干擾蛋白質吸附，同時盡可能少的影響抗體抗原的正常結合，提高檢測靈敏度。

15、本發(fā)明的第二方面提供一種封閉劑，其包括根據(jù)本發(fā)明第一方面所述的化合物。

16、進一步地，所述封閉劑還包括bsa或酪蛋白。

17、進一步地，所述封閉劑還包括選自以下的至少一種緩沖液：三羥甲基氨基甲烷緩沖液、磷酸緩沖液、硫酸銨緩沖液、硼酸緩沖液、2-(n-嗎啉)乙磺酸緩沖液、3-嗎啉丙磺酸緩沖液、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸緩沖液、三乙醇胺緩沖液。

18、本發(fā)明的第二方面還提供一種稀釋液，其包括根據(jù)本發(fā)明的化合物；優(yōu)選地，所述稀釋液選自磁珠稀釋液、膠體金稀釋液、膠乳稀釋液、ae標記物稀釋液、魯米諾標記物稀釋液、異魯米諾標記物稀釋液、ap標記物稀釋液、hrp標記物稀釋液、熒光材料標記物稀釋液、量子點材料標記物稀釋液、上轉發(fā)光材料標記物稀釋液、電化學發(fā)光材料標記物稀釋液或樣本稀釋液中的至少一種。進一步地，所述稀釋液還包括抗體或抗原。

19、本發(fā)明的第二方面還提供一種檢測試劑，其包括根據(jù)本發(fā)明的化合物，還包括選自磁珠、膠體金、膠乳、ae標記物(吖啶酯簡稱ae)、魯米諾標記物、異魯米諾標記物、ap標記物(堿性磷酸酶簡稱ap)、hrp標記物(辣根過氧化物酶簡稱hrp)、熒光材料標記物、量子點材料標記物、上轉發(fā)光材料標記物、電化學發(fā)光材料標記物中的至少一種。

20、熒光材料主要包括異硫氰酸熒光素、四乙烯基羅丹明、四甲基異硫氰酸羅丹明、與酶作用后產(chǎn)生熒光的物質和鑭系等。量子點材料主要選自硒化鎘膠體量子點、碲化鎘膠體量子點、硒化鎘/硫化鋅核殼結構膠體量子點、銫鉛溴鈣鈦礦量子點、銫鉛碘鈣鈦礦量子點等，其中，所述硒化鎘/硫化鋅核殼結構膠體量子點是以硒化鎘為核、硫化鋅為殼的核殼結構膠體量子點。上轉發(fā)光材料是一種由稀土元素摻雜于晶體的晶格中構成的特殊材料，其在近紅外光激發(fā)下，可以將所吸收的低能近紅外光子通過多光子吸收或者能量傳遞轉化為高能量可見光。電化學發(fā)光劑包括三聯(lián)吡啶釕等。

21、本發(fā)明命名的“××標記物”是指連接有前綴“××”材料的試劑成分，本發(fā)明命名的“××稀釋液”是指用于在免疫檢測過程/檢測試劑制備過程中溶解前綴“××”材料的試劑溶液。

22、ae標記物包括吖啶酯標記的抗體、吖啶酯標記的抗原、以及吖啶酯標記的其它檢測試劑中的材料，該材料可以例如是載體蛋白、載體聚合物、載體化合物等。同理，魯米諾標記物、異魯米諾標記物、ap標記物、hrp標記物、熒光材料標記物、量子點材料標記物、上轉發(fā)光材料標記物、電化學發(fā)光材料標記物也相應地如此理解。

23、本發(fā)明還提供一種試劑盒，其包括根據(jù)本發(fā)明所述的化合物。

24、本發(fā)明還提供一種根據(jù)本發(fā)明所述的化合物或所述的封閉劑或所述的稀釋液或所述的試劑盒在封閉固相載體中的應用；優(yōu)選地，所述固相載體選自微球、板和膜中的至少一種；更優(yōu)選地，所述固相載體選自磁性微球、塑料微球、膠乳微粒、熒光微球、膠體金、微孔板、玻璃、毛細管、尼龍和硝酸纖維素膜中的至少一種。

25、本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術具有以下有益效果：

26、本發(fā)明的化合物和包含其的封閉劑可作為一種通用性材料，應用在免疫檢測封閉固相載體的實踐中，提升整個檢測平臺的試劑性能。

27、本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。