本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種鈣結(jié)合蛋白s100a1作為肺癌免疫治療生物標志物的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、近年來，以免疫檢查點抑制劑(immune?checkpoint?inhibitors,icis)為代表的免疫治療在腫瘤綜合治療方面取得了前所未有的突破，尤其是在非小細胞肺癌(non-smallcell?lung?cancer,nsclc)、黑色素瘤、乳腺癌等實體腫瘤中，免疫治療單藥或聯(lián)合治療已成為標準方案。然而，其治療效果表現(xiàn)出明顯的個體差異，仍有部分患者未能有效響應(yīng)。關(guān)于腫瘤免疫治療響應(yīng)和耐藥的分子機制，目前尚不完全清楚。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤自身介導(dǎo)的免疫逃逸在免疫治療響應(yīng)中扮演著重要角色。因此，從腫瘤介導(dǎo)免疫逃逸的角度出發(fā)，尋找免疫治療響應(yīng)的關(guān)鍵調(diào)控因素和生物標志物，具有重要的臨床意義。

2、鈣離子(ca2+)是細胞內(nèi)重要的第二信使，在細胞增殖、分化、死亡以及多種細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面發(fā)揮至關(guān)重要的作用。同時，ca2+信號調(diào)控和其在腫瘤發(fā)生、進展、轉(zhuǎn)移以及腫瘤微環(huán)境(tumor?microenvironment,tme)中的影響受到了廣泛關(guān)注。越來越多的證據(jù)表明，腫瘤細胞通過改變ca2+信號促進腫瘤生存、增殖和免疫逃逸等多種惡性生物學(xué)行為。鈣穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)涉及ca2+結(jié)合蛋白、鈣泵以及鈣通道等多種分子調(diào)控機制，其中ca2+結(jié)合蛋白是ca2+執(zhí)行生理功能過程中至關(guān)重要的載體。值得一提的是，s100鈣結(jié)合蛋白a1(s100?calciumbindingprotein?a1,s100a1)在調(diào)節(jié)細胞內(nèi)ca2+信號及ca2+穩(wěn)態(tài)中具有關(guān)鍵作用。s100a1由94個氨基酸殘基組成，包含兩個ef-手型(ef-handtype)ca2+結(jié)合結(jié)構(gòu)域，能夠響應(yīng)細胞內(nèi)外鈣濃度變化并通過改變自身構(gòu)象進而與靶蛋白相互作用發(fā)揮多種生物學(xué)功能。近有研究發(fā)現(xiàn)，s100a1在多種類型的腫瘤中異常表達，涉及細胞周期調(diào)控、凋亡、惡性侵襲及轉(zhuǎn)移和免疫逃逸等生物學(xué)過程，并與患者預(yù)后不良密切相關(guān)。然而，s100a1在肺癌免疫治療響應(yīng)中的具體作用和機制尚未明確，仍需探索。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明為了解決上述技術(shù)問題，提供一種鈣結(jié)合蛋白s100a1作為肺癌免疫治療生物標志物的應(yīng)用。

2、第一方面，本發(fā)明提供鈣結(jié)合蛋白s100a1的第一種用途，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

3、一種檢測鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)在制備評價肺癌免疫治療療效和/或肺癌預(yù)后評估產(chǎn)品中的應(yīng)用。

4、進一步的，檢測鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的樣本來源于血液或細胞上清液。

5、進一步的，所述肺癌包括非小細胞肺癌和小細胞肺癌；非小細胞肺癌包括肺腺癌、肺鱗癌。

6、進一步的，所述檢測鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)包括化學(xué)發(fā)光法、放射免疫檢測法、熒光免疫檢測法、質(zhì)譜、蛋白免疫印跡或酶聯(lián)免疫吸附法中所用試劑。

7、第二方面，本發(fā)明提供一種評價肺癌免疫治療療效的試劑盒，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

8、一種評價肺癌免疫治療療效的試劑盒，包括檢測鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)。

9、進一步的，檢測鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的樣本來源于血液或細胞上清液。

10、進一步的，所述肺癌包括非小細胞肺癌和小細胞肺癌；非小細胞肺癌包括肺腺癌、肺鱗癌。

11、進一步的，所述檢測鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)包括化學(xué)發(fā)光法、放射免疫檢測法、熒光免疫檢測法、質(zhì)譜、蛋白免疫印跡或酶聯(lián)免疫吸附法中所用試劑。

12、第三方面，本發(fā)明提供一種評估肺癌預(yù)后的試劑盒，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

13、一種評估肺癌預(yù)后的試劑盒，包括檢測鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)。

14、進一步的，檢測鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的樣本來源于血液或細胞上清液。

15、進一步的，所述肺癌包括非小細胞肺癌和小細胞肺癌；非小細胞肺癌包括肺腺癌、肺鱗癌。

16、進一步的，所述檢測鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)包括化學(xué)發(fā)光法、放射免疫檢測法、熒光免疫檢測法、質(zhì)譜、蛋白免疫印跡或酶聯(lián)免疫吸附法中所用試劑。

17、第四方面，本發(fā)明提供鈣結(jié)合蛋白s100a1的第二種用途，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

18、一種降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)在制備以下至少一種藥物中的應(yīng)用：

19、a.治療肺癌；

20、b.增強肺癌患者對免疫治療敏感性；

21、c.重塑肺癌患者腫瘤免疫微環(huán)境；

22、d.促進肺癌患者巨噬細胞m1型極化和t細胞抗腫瘤免疫。

23、進一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)包括crispr-cas9、慢病毒感染以及sirna轉(zhuǎn)染中所用試劑。

24、第五方面，本發(fā)明提供一種治療肺癌的藥物，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

25、一種治療肺癌的藥物，包括降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)。

26、進一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)包括慢病毒轉(zhuǎn)染中所用試劑。

27、第六方面，本發(fā)明提供一種增強肺癌患者對免疫治療敏感性的藥物，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

28、一種增強肺癌患者對免疫治療敏感性的藥物，包括降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)。

29、進一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)包括慢病毒轉(zhuǎn)染中所用試劑。

30、第七方面，本發(fā)明提供一種重塑肺癌患者腫瘤免疫微環(huán)境的藥物，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

31、一種重塑肺癌患者腫瘤免疫微環(huán)境的藥物，包括降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)。

32、進一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)包括慢病毒轉(zhuǎn)染中所用試劑。

33、第八方面，本發(fā)明提供一種促進肺癌患者巨噬細胞m1型極化和t細胞抗腫瘤免疫的藥物，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

34、一種促進肺癌患者巨噬細胞m1型極化和t細胞抗腫瘤免疫的藥物，包括降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)。

35、進一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達水平的物質(zhì)包括慢病毒轉(zhuǎn)染中所用試劑。

36、第九方面，本發(fā)明提供一種聯(lián)合應(yīng)用細胞因子和免疫檢查點抑制劑的用途，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

37、一種細胞因子和免疫檢查點抑制劑聯(lián)合用于制備治療鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達腫瘤藥物中的應(yīng)用。

38、進一步的，免疫檢查點抑制劑選用anti-pd-1、anti-pd-l1和anti-ctla4中的一種或幾種；細胞因子選用gm-csf因子；鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達腫瘤包括肺癌、黑色素瘤、乳腺癌、尿路上皮癌。

39、第十方面，本發(fā)明提供一種治療鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達腫瘤的藥物組合物，是采用以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的。

40、一種治療鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達腫瘤的藥物組合物，包括細胞因子和免疫檢查點抑制劑。

41、進一步的，所述免疫檢查點抑制劑選用anti-pd-1、anti-pd-l1和anti-ctla4中的一種或幾種；細胞因子選用gm-csf因子；鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達腫瘤包括肺癌、黑色素瘤、乳腺癌、尿路上皮癌。

42、本技術(shù)具有以下有益效果。

43、本發(fā)明中s100a1與肺癌患者免疫治療響應(yīng)與生存預(yù)后密切相關(guān)，s100a1高表達患者免疫治療預(yù)后較差，s100a1表達水平與巨噬細胞m1極化和cd8+t細胞浸潤呈顯著負相關(guān)關(guān)系，提示s100a1高表達或與“冷”腫瘤相關(guān)；本發(fā)明進一步通過功能和機制實驗提出s100a1/usp7/p65/gm-csf調(diào)控軸，該調(diào)控軸可顯著調(diào)節(jié)巨噬細胞m1極化和t細胞抗腫瘤免疫功能，從而影響腫瘤免疫逃逸和腫瘤免疫治療響應(yīng)。體內(nèi)模型研究表明gm-csf聯(lián)合anti-pd-1可顯著抑制s100a1高表達腫瘤生長，s100a1可作為gm-csf聯(lián)合apd-1治療“冷”腫瘤的潛在標志物。