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      一種能高效合成庚七醇的重組解脂耶氏酵母菌株及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

      文檔序號(hào):39961464發(fā)布日期:2024-11-12 14:19閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

      技術(shù)特征:

      1.一種能高效合成庚七醇的重組解脂耶氏酵母菌株,其特征在于,所述重組耶氏酵母菌株分類(lèi)命名為解脂耶羅維亞酵母yarrowia?lipolytica?cgmcc?no.7326δtal,保存于中國(guó)普通微生物保藏中心,所述重組耶氏酵母菌株的保藏編號(hào)為cgmcc?no.?31033。

      2.一種能高效合成庚七醇的重組解脂耶氏酵母菌株的構(gòu)建方法,其特征在于,以解脂耶氏酵母菌株為底盤(pán)微生物,通過(guò)代謝工程或基因工程手段,構(gòu)建直接發(fā)酵合成庚七醇的重組解脂耶氏酵母菌株的方法,所用的碳源為葡萄糖、甘油中的任一一種或兩種的混合。

      3.如權(quán)利要求2所述的能高效合成庚七醇的重組解脂耶氏酵母菌株的構(gòu)建方法,其特征在于,所述底盤(pán)微生物為基因組中含有與seq?id?no.1序列具有97%以上同源性的dna序列的解脂耶氏酵母菌株。

      4.如權(quán)利要求2所述的能高效合成庚七醇的重組解脂耶氏酵母菌株的構(gòu)建方法,其特征在于,在底盤(pán)微生物解脂耶氏酵母細(xì)胞中敲除其自身的編碼轉(zhuǎn)醛酶的基因tal,減弱合成赤蘚糖醇的能力,經(jīng)發(fā)酵篩選后得到具備合成庚七醇的能力的重組解脂耶氏酵母菌株。

      5.一種應(yīng)用解脂耶氏酵母菌株合成庚七醇的方法,其特征在于,包括如下步驟:

      6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用解脂耶氏酵母菌株合成庚七醇的方法,其特征在于,步驟s1中,所述培養(yǎng)基中的碳源為葡萄糖、甘油中的一種或兩種混合,所述培養(yǎng)基中的碳源含量為200~300克/升。

      7.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用解脂耶氏酵母菌株合成庚七醇的方法,其特征在于,所述培養(yǎng)基中的氮源為蛋白胨、酵母粉、酵母浸膏、玉米漿干粉、磷酸氫二銨、檸檬酸銨中的一種或幾種的混合,所述培養(yǎng)基中的氮源含量為10~25克/升。

      8.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用解脂耶氏酵母菌株合成庚七醇的方法,其特征在于,步驟s2中,所述分離純化包括:菌液分離得到澄清的含庚七醇的發(fā)酵液,濃縮得到富含庚七醇的濃縮液,一次結(jié)晶得到庚七醇粗制品,粗制品重溶、離子交換去除離子、脫色、濃縮、二次結(jié)晶得到庚七醇精制品,干燥。


      技術(shù)總結(jié)
      本發(fā)明涉及一種能高效合成庚七醇的重組解脂耶氏酵母菌株及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。采用能合成赤蘚糖醇的解脂耶氏酵母為底盤(pán)微生物,通過(guò)代謝工程手段,對(duì)該酵母基因組進(jìn)行操作,降低其合成赤蘚糖醇的能力,從而獲得合成庚七醇的能力,得到一種能高效合成庚七醇的重組解脂耶氏酵母Yarrowia?lipolytica?CGMCC?No.?31033。庚七醇是一種天然七元糖醇,具有甜味,低熱量的特性,并天然存在于一些植物果實(shí)中,具有開(kāi)發(fā)成天然的低熱量減糖類(lèi)甜味劑的潛力。本發(fā)明還提供一種應(yīng)用該菌株直接發(fā)酵合成與純化庚七醇的方法。

      技術(shù)研發(fā)人員:程海榮,紀(jì)麗云
      受保護(hù)的技術(shù)使用者:上海交通大學(xué)
      技術(shù)研發(fā)日:
      技術(shù)公布日:2024/11/11
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