本發(fā)明屬于微生物，公開了一株木霉菌及其在抑制葡萄霜霉病中的用途。

背景技術(shù)：

1、葡萄作為一種低熱量、高營(yíng)養(yǎng)的漿果，在全球范圍內(nèi)廣泛種植，因其豐富的品種和高經(jīng)濟(jì)價(jià)值而備受青睞。然而，葡萄生產(chǎn)中常面臨霜霉病的嚴(yán)重威脅，這是一種危害較重的常見病害，對(duì)葡萄的產(chǎn)量和品質(zhì)造成顯著影響。目前，化學(xué)防治是控制葡萄霜霉病的主要手段，但該方法帶來了一系列次生危害。它不僅增加了生產(chǎn)成本，還導(dǎo)致了環(huán)境污染和果實(shí)殘留毒性問題。這些化學(xué)農(nóng)藥的殘留可能在食物鏈中積累，最終危害人類健康。此外，它們還可能降低葡萄及其加工產(chǎn)品，如葡萄酒的質(zhì)量。因此，研發(fā)綠色、環(huán)保的防治方法變得尤為重要，以適應(yīng)當(dāng)前農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)性調(diào)整的需求，并切實(shí)解決農(nóng)藥殘留污染等問題。

2、生物防治作為一種低成本、綠色無殘留的植物病害防治策略，符合公眾對(duì)健康生活的追求，并成為未來植物病害防治的重要方向之一。目前，用于防治植物病害的生防菌種類主要包括細(xì)菌、真菌和放線菌。其中，木霉屬真菌因其廣泛存在于土壤及其他基物中，生存能力強(qiáng)，適應(yīng)性廣，且作為一種廣譜性拮抗菌真菌，能夠減弱植物病原菌的致病性，而備受關(guān)注。木霉菌廣泛存在于土壤及植物表面，易于從植物病殘?bào)w、種子和球莖表面分離得到。這些特性為控制真菌病害提供了潛在的生物防治策略。實(shí)際上，木霉菌已被廣泛應(yīng)用于植物病害防治，并展現(xiàn)出廣闊的發(fā)展前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為克服上述現(xiàn)有技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一株木霉菌及其在抑制葡萄霜霉病中的用途。相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種木霉菌，能有效抑制單軸霉屬真菌葡萄生單軸霉菌的生長(zhǎng)，為防治葡萄生單軸霉引起的植物病害提供微生物資源。

2、一方面，本發(fā)明涉及一株木霉菌，保藏信息如下：

3、菌株名稱：qhsh-16；

4、分類命名：桔綠木霉 trichoderma?citrinoviride；

5、保藏中心收到時(shí)間：2024年06月14日；

6、保藏證明發(fā)放時(shí)間：2024年07月11日；

7、保藏單位：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心（cgmcc）；

8、保藏編號(hào)：cgmcc?no.41365；

9、地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。

10、進(jìn)一步地，在本發(fā)明提供的木霉菌中，所述木霉菌的its的核苷酸序列如seq?idno：1所示。

11、另一方面，本發(fā)明涉及一種生防菌劑，所述生防菌劑包括所述木霉菌和/或其培養(yǎng)物的上清液、發(fā)酵產(chǎn)物、濾液或提取物。

12、本文提供的木霉菌qhsh-16或其任何活性變體中任何一種的孢子或前孢子或者菌絲、前孢子和/或孢子的組合可以配制成菌絲糊劑、可潤(rùn)濕的粉末、菌絲團(tuán)塊、粉塵、顆粒、漿液、干燥粉末、水性或油性基液體產(chǎn)物等。此類配制物將包含本文提供的木霉菌qhsh-16或其活性變體和/或由其衍生的組合物，還有載體和其他試劑。配制物可以用于本文其他處公開的多種方法中。

13、本文公開的多種組合物和配制物可以包含木霉菌qhsh-16或者其活性變體的一定量的菌絲，或者孢子或前孢子或者菌絲、前孢子和/或孢子的組合；和/或可以包含衍生自木霉菌qhsh-16或其任何活性變體中的任何一種的一定量的組合物。這樣的量可以包括至少大約104cfu/ml至大約1011cfu/ml、至少大約105cfu/ml至大約1011cfu/ml、大約105cfu/ml至大約1010cfu/ml、大約105cfu/ml至大約1012cfu/ml、大約105cfu/ml至大約106cfu/ml、大約106cfu/ml至大約107cfu/ml、大約107cfu/ml至大約108cfu/ml、大約108cfu/ml至大約109cfu/ml、大約109cfu/ml至大約1010cfu/ml、大約1010cfu/ml至大約1011cfu/ml或大約1011cfu/ml至大約1012cfu/ml的菌株濃度。在其他實(shí)施方案中，菌株濃度包括至少大約104cfu/ml、至少大約105cfu/ml、至少大約106cfu/ml、至少大約107cfu/ml、至少大約108cfu/ml、至少大約109cfu/ml、至少大約1010cfu/ml、至少大約1011cfu/ml、至少大約1012cfu/ml。菌株在上述濃度可以在任何目的配制物類型中形成，包括例如在液體配制物、可潤(rùn)濕的粉末、噴灑的干燥配制物、菌絲糊劑、可潤(rùn)濕的顆粒或冷凍干燥的配制物中。

14、如本文所用，“上清液”是指當(dāng)木霉菌qhsh-16在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)或從固體培養(yǎng)基中收獲到另一種液體中并通過離心、過濾、沉降或本領(lǐng)域公知的其他手段除去時(shí)，殘留的液體。在一些實(shí)施方案中，上清液可以用另一種物質(zhì)稀釋，例如水、緩沖劑、新鮮培養(yǎng)基和/或制劑。稀釋的上清液仍被認(rèn)為是本發(fā)明的上清液。

15、如本文所用，“濾液”是指來自木霉菌qhsh-16經(jīng)過液體培養(yǎng)基的發(fā)酵培養(yǎng)物通過膜的液體。與發(fā)酵培養(yǎng)物或上清液中有效化合物或代謝產(chǎn)物的濃度相比，濾液可包含濃縮量的有效化合物或代謝產(chǎn)物。

16、如本文所用，“提取物”是指通過溶劑（例如水、去污劑、緩沖劑和/或有機(jī)溶劑）從木霉菌qhsh-16發(fā)酵培養(yǎng)物中取出并通過離心、過濾或本領(lǐng)域已知的其他方法與木霉菌qhsh-16分離的液體物質(zhì)。與提取前木霉菌qhsh-16發(fā)酵培養(yǎng)物中有效化合物或代謝物的濃度相比，提取物可包含濃縮量的所述有效化合物或代謝物?？商娲兀瑸V液或提取物然后可以用另一種組合物稀釋，例如水、緩沖劑、新鮮培養(yǎng)基和/或制劑。這種稀釋的濾液或提取物仍被認(rèn)為是本發(fā)明的濾液和提取物。

17、如本文所用，“代謝物”或“代謝產(chǎn)物”是指木霉菌qhsh-16經(jīng)過發(fā)酵產(chǎn)生的化合物、物質(zhì)或副產(chǎn)物。有效化合物或代謝物是存在于上清液、包含木霉菌qhsh-16的發(fā)酵培養(yǎng)物或木霉菌qhsh-16中的化合物，當(dāng)將其以有效量應(yīng)用于目標(biāo)植物或目標(biāo)植物所處的空間時(shí)，可以改善植物的任何目標(biāo)農(nóng)藝性狀，或控制引起植物真菌性病害或植物細(xì)菌性病害的致病菌。

18、另一方面，本發(fā)明涉及所述木霉菌或所述生防菌劑在植物真菌性病害防治中的應(yīng)用。

19、進(jìn)一步地，在本發(fā)明提供的應(yīng)用中，所述植物真菌性病害為葡萄霜霉病。

20、進(jìn)一步地，在本發(fā)明提供的應(yīng)用中，所述植物真菌性病害的寄主植物為葡萄。

21、進(jìn)一步地，在本發(fā)明提供的應(yīng)用中，所述植物真菌性病害的致病菌為葡萄生單軸霉菌。

22、另一方面，本發(fā)明涉及一種用于防治植物真菌性病害的方法，其包括：使得所述木霉菌或所述生防菌劑作用于所述植物真菌性病害的致病菌和/或它們的棲息地。

23、進(jìn)一步地，在本發(fā)明提供的方法中，向具有植物真菌性病害的致病菌，或者處于發(fā)展植物真菌性病害風(fēng)險(xiǎn)的植物施用所述木霉菌或所述生防菌劑。

24、進(jìn)一步地，在本發(fā)明提供的方法中，所述木霉菌或所述生防菌劑用于葡萄霜霉病的防治。

25、進(jìn)一步地，在本發(fā)明提供的方法中，所述木霉菌或所述生防菌劑破壞葡萄生單軸霉菌孢子內(nèi)部結(jié)構(gòu)、抑制葡萄生單軸霉菌孢子生長(zhǎng)繁殖、抑制葡萄生單軸霉菌生長(zhǎng)繁殖中的至少一項(xiàng)。

26、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案至少具備下述的有益效果或優(yōu)點(diǎn)。

27、本發(fā)明通過深入研究和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，成功揭示了木霉菌qhsh-16在植物病害防治領(lǐng)域的顯著效果，特別是在抑制葡萄生單軸霉菌及葡萄霜霉病方面展現(xiàn)出了卓越的性能。具體而言，針對(duì)葡萄生單軸霉菌的離體防效測(cè)定實(shí)驗(yàn)表明，木霉菌qhsh-16的無菌發(fā)酵液能夠有效降低該病原菌的發(fā)病率，其防治效果高達(dá)39.6%，顯著抑制了葡萄生單軸霉菌的生長(zhǎng)和擴(kuò)散。進(jìn)一步地，使用木霉菌qhsh-16的發(fā)酵原液進(jìn)行田間防效實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示其對(duì)葡萄霜霉病的防治效果尤為突出，田間防效達(dá)到了62.39%，充分證明了該菌株在實(shí)際應(yīng)用中的高效性和穩(wěn)定性。值得注意的是，本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)了木霉菌qhsh-16的無菌發(fā)酵液對(duì)葡萄生單軸霉菌具有更高的防治效果，達(dá)到了73.27%，這一發(fā)現(xiàn)為該菌株在植物病害生物防治領(lǐng)域的應(yīng)用提供了更為廣闊的前景。本發(fā)明提供的木霉菌qhsh-16不僅在抑制葡萄生單軸霉菌和葡萄霜霉病方面表現(xiàn)出色，而且為防治由葡萄生單軸霉菌引起的植物病害提供了新的微生物資源，具有顯著的技術(shù)效果和廣泛的應(yīng)用潛力。