本發(fā)明技術(shù)總體上涉及特異性結(jié)合δ樣蛋白3(dll3)的免疫球蛋白相關(guān)組合物(例如，抗體或其抗原結(jié)合片段)的制備以及所述免疫球蛋白相關(guān)組合物的用途。具體地，本發(fā)明技術(shù)涉及dll3結(jié)合抗體的制備及其在檢測和治療dll3相關(guān)癌癥中的用途，所述癌癥包括小細胞肺癌(sclc)、肺外神經(jīng)內(nèi)分泌癌和大細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌(lcnec)。政府支持聲明本發(fā)明是在由美國國立衛(wèi)生研究院授予的ca213448下在美國政府支持下完成的。美國政府享有本發(fā)明的某些權(quán)利。

背景技術(shù)：

1、下文提供對本發(fā)明技術(shù)背景的說明僅僅是為了幫助理解本發(fā)明技術(shù)，并且不承認所述說明描述或構(gòu)成針對本發(fā)明技術(shù)的現(xiàn)有技術(shù)。

2、肺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(lu-net)涵蓋一個異質(zhì)的腫瘤家族，分為四種組織學(xué)變體，即典型類癌(tc)、非典型類癌(ac)、大細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌(lcnec)和小細胞肺癌(sclc)。sclc和肺lcnec二者均是高級別和預(yù)后不良的腫瘤，其中在吸煙者中的發(fā)病率較高。與sclc相似，肺lcnec展現(xiàn)出生物學(xué)攻擊行為。肺lcnec和sclc的存活曲線逐期重疊，并且此外存活率低于其他nsclc。即使在5年存活率范圍為從27％至67％的患有潛在可切除i期肺癌的患者中，預(yù)后也很差。參見iyoda?a.等人,j?thorac?cardiovasc?surg.138:446–453(2009)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、在一個方面，本公開文本提供了一種抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含重鏈免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域(vh)和輕鏈免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域(vl)，其中(a)所述vh包含選自以下的vh-cdr1序列、vh-cdr2序列和vh-cdr3序列：(i)分別為seq?id?no:3、seq?id?no:4和seq?id?no:5；(ii)分別為seq?id?no:13、seq?id?no:14和seq?id?no:15；(iii)分別為seq?id?no:23、seq?id?no:24和seq?id?no:25；和(iv)分別為seq?id?no:33、seq?id?no:34和seq?id?no:35；和/或(b)所述vl包含選自以下的vl-cdr1序列、vl-cdr2序列和vl-cdr3序列：(i)分別為seq?id?no:8、seq?id?no:9和seq?id?no:10；(ii)分別為seq?idno:18、seq?id?no:19和seq?id?no:20；(iii)分別為seq?id?no:28、seq?id?no:29和seq?idno:30；和(iv)分別為seq?id?no:38、seq?id?no:39和seq?id?no:40。在某些實施方案中，所述抗體或抗原結(jié)合片段包括以下特征中的一種或多種：(a)與seq?id?no:7、17、27或37中的任一個中存在的輕鏈免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的輕鏈免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列；和/或(b)與seq?id?no:2、12、22或32中的任一個中存在的重鏈免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的重鏈免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列。

2、在另一個方面，本公開文本提供了包含重鏈免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域(vh)和輕鏈免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域(vl)的抗體或其抗原結(jié)合片段，其中：(a)所述vh包含選自以下的氨基酸序列：seq?id?no:2、seq?id?no:12、seq?id?no:22和seq?id?no:32；和/或(b)所述vl包含選自以下的氨基酸序列：seq?id?no:7、seq?id?no:17、seq?id?no:27和seq?id?no:37。在所述抗體或抗原結(jié)合片段的一些實施方案中，所述vh氨基酸序列和所述vl氨基酸序列選自：分別為seq?id?no:2和seq?id?no:7(7-i1-b)；分別為seq?id?no:12和seq?id?no:17(2-c8-a)；分別為seq?id?no:22和seq?id?no:27(10-o18-a)；以及分別為seq?id?no:32和seq?idno:37(6-g23-f)。

3、另外地或可替代地，在某些實施方案中，本發(fā)明技術(shù)的抗體或抗原結(jié)合片段與哺乳動物dll3多肽中存在的表位結(jié)合。所述表位可以是構(gòu)象表位或非構(gòu)象表位。另外地或可替代地，在一些實施方案中，所述哺乳動物dll3多肽包含選自以下的氨基酸序列：seq?idno:50、seq?id?no:51、seq?id?no:52、seq?id?no:53和seq?id?no:54。在一些實施方案中，所述哺乳動物dll3多肽具有包含seq?id?no:50或seq?id?no:51的氨基酸殘基27-492的氨基酸序列(例如，所述哺乳動物dll3多肽可以包含人dll3的細胞外結(jié)構(gòu)域)。另外地或可替代地，在一些實施方案中，當所述抗體或抗原結(jié)合片段與細胞表面(例如，腫瘤細胞表面)上表達的dll3多肽結(jié)合時，所述抗體或抗原結(jié)合片段經(jīng)歷細胞內(nèi)內(nèi)化。

4、另外地或可替代地，在本文公開的任何實施方案中，所述抗體或抗原結(jié)合片段進一步包含選自以下的同種型的fc結(jié)構(gòu)域：igg1、igg2、igg3、igg4、iga1、iga2、igm、igd和ige。另外地或可替代地，在本文公開的任何實施方案中，所述抗原結(jié)合片段選自fab、f(ab')2、fab'、scfv和fv。另外地或可替代地，在一些實施方案中，本發(fā)明技術(shù)的抗體或抗原結(jié)合片段是單克隆抗體、嵌合抗體、人源化抗體或雙特異性抗體。

5、在一個方面，本公開文本提供了編碼本文所述的任何抗體或抗原結(jié)合片段的重組核酸序列。在一些實施方案中，所述重組核酸序列選自：seq?id?no:1、6、11、16、21、26、31和36。

6、在另一個方面，本公開文本提供了包含本文公開的任何重組核酸序列的宿主細胞或載體。

7、在一個方面，本公開文本提供了組合物，所述組合物包含本發(fā)明技術(shù)的抗體或抗原結(jié)合片段和藥學(xué)上可接受的載體，其中所述抗體或抗原結(jié)合片段任選地與選自以下的藥劑綴合：同位素、染料、色原(chromagen)、造影劑、藥物、毒素、細胞因子、酶、酶抑制劑、激素、激素拮抗劑、生長因子、放射性核素、金屬、脂質(zhì)體、納米顆粒、rna、dna或其任何組合。

8、在一個方面，本公開文本提供了一種用于治療有需要的受試者的dll3相關(guān)癌癥的方法，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的本發(fā)明技術(shù)的抗體或抗原結(jié)合片段，其中所述抗體或抗原結(jié)合片段與至少一種另外的治療劑綴合。此類另外的治療劑的例子包括但不限于同位素、藥物、毒素、細胞因子、酶、酶抑制劑、激素、激素拮抗劑、生長因子、放射性核素、金屬、脂質(zhì)體、納米顆粒、rna、dna或其任何組合。所述dll3相關(guān)癌癥可以是小細胞肺癌、大細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌、肺神經(jīng)內(nèi)分泌癌、肺外神經(jīng)內(nèi)分泌癌或黑色素瘤。

9、在另一個方面，本公開文本提供了一種用于檢測生物樣品中dll3蛋白表達水平的方法，所述方法包括使所述生物樣品與本文所述的抗體或抗原結(jié)合片段接觸，其中所述抗體或抗原結(jié)合片段與可檢測標記綴合；以及檢測所述生物樣品中由所述可檢測標記生成的信號。

10、本文還公開了用于檢測和/或治療dll3相關(guān)癌癥的試劑盒，所述試劑盒包含至少一種本發(fā)明技術(shù)的免疫球蛋白相關(guān)組合物(例如，本文所述的任何抗體或抗原結(jié)合片段)或其功能性變體(例如，取代變體)以及使用說明書。在某些實施方案中，所述免疫球蛋白相關(guān)組合物與一種或多種可檢測標記偶聯(lián)。在一個實施方案中，所述一種或多種可檢測標記包括放射性標記、熒光標記或發(fā)色標記。

11、另外地或可替代地，在一些實施方案中，所述試劑盒進一步包含與本文所述的抗dll3免疫球蛋白相關(guān)組合物特異性結(jié)合的二抗。在一些實施方案中，所述二抗與選自放射性標記、熒光標記或發(fā)色標記的至少一種可檢測標記偶聯(lián)。