本技術(shù)屬于輔助生殖，特別涉及一種核酸組合產(chǎn)品及生物樣本dna中短串聯(lián)重復(fù)片段的檢測方法。

背景技術(shù)：

1、輔助生殖技術(shù)是解決不孕不育的有效臨床技術(shù)，根據(jù)《reproductive?biologyand?endocrinology》的統(tǒng)計，目前超過20％的不孕不育夫妻必須通過輔助生殖技術(shù)治療。提高輔助生殖的出生率一直是輔助生殖醫(yī)學領(lǐng)域面臨的挑戰(zhàn)。輔助生殖過程中挑選優(yōu)良的胚胎進行移植是提高出生率的有效方法。

2、目前胚胎植入前dna甲基化檢測技術(shù)是新一代的胚胎篩選方法，該方法基于表觀遺傳學原理，采用二代測序技術(shù)，對胚胎的染色體拷貝數(shù)變異信息和dna甲基化修飾信息進行評估，從而篩選發(fā)育潛能高的胚胎進行移植。臨床數(shù)據(jù)顯示該技術(shù)能夠顯著的提高輔助生殖的出生率，降低出生缺陷。在輔助生殖過程中，部分胚胎在體外培養(yǎng)過程中，出現(xiàn)三倍體的情況，即胚胎有69條染色體(正常胚胎為二倍體，46條染色體)。

3、此外，臨床研究發(fā)現(xiàn)，部分進行輔助生殖治療的夫婦，在胚胎移植后出現(xiàn)了流產(chǎn)情況，通過對流產(chǎn)組織進行染色體拷貝數(shù)變異檢測，發(fā)現(xiàn)流產(chǎn)組織得出的染色體拷貝數(shù)信息和胚胎植入前對胚胎檢測得到的染色體拷貝數(shù)信息不一致。導(dǎo)致這種情況的原因有以下幾種：1.該胚胎在移植后的發(fā)育中出現(xiàn)了拷貝數(shù)的變異情況；2.胚胎移植時，編號錯誤，導(dǎo)致移植錯誤的胚胎到子宮內(nèi)；3.胚胎移植后，夫婦發(fā)生同房，所流產(chǎn)的胚胎，并非來自移植的胚胎。針對上述情況，需要對流產(chǎn)的胚胎進行溯源。

4、然而，目前胚胎植入前dna甲基化檢測技術(shù)無法對三倍體的情況進行檢測。胚胎植入前dna甲基化檢測需要活檢6-8個囊胚的滋養(yǎng)層細胞，得到的dna量約40pg。由于目前的單細胞擴增技術(shù)，擴增后的dna會丟失甲基化修飾信息，因此胚胎植入前dna甲基化檢測無法使用現(xiàn)有的單細胞擴增技術(shù)對起始的dna進行擴增，以擴大dna的模板量。

5、有鑒于此，特提出本技術(shù)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本技術(shù)一個或者多個實施例提供一種核酸組合產(chǎn)品及生物樣本dna中短串聯(lián)重復(fù)片段的檢測方法。包括如下技術(shù)方案：

2、本技術(shù)的一個或者多個實施例提供一種核酸組合產(chǎn)品，所述核酸組合產(chǎn)品包括如下引物對中的一對或者多對：

3、序列如seq?id?no.1至seq?id?no.18所示的引物對m1-1、引物對m1-2、引物對m1-3、引物對m1-4、引物對m1-5、引物對m1-6、引物對m2-1、引物對m2-3和引物對m2-4，

4、序列如seq?id?no.21至seq?id?no.38所示的引物對m3-1、引物對m3-2、引物對m3-3、引物對m3-4、引物對m3-5、引物對m3-6、引物對m4-1、引物對m4-2和引物對m4-4，

5、序列如seq?id?no.45至seq?id?no.46所示的引物對m8-3，

6、序列如seq?id?no.63至seq?id?no.66所示的引物對m4-3和引物對m2-2，

7、序列如seq?id?no.73至seq?id?no.76所示的引物對m9-4和引物對m9-5，

8、序列如seq?id?no.81至seq?id?no.82所示的引物對m9-9，

9、序列如seq?id?no.85至seq?id?no.102所示的引物對m10-1、引物對m10-2、引物對m10-3、引物對m10-4、引物對m10-6、引物對m10-8、引物對m10-9、引物對m10-10、引物對m10-12。

10、在本技術(shù)的一些實施方式中，所述核酸組合產(chǎn)品還包括如下引物對中的一對或者多對：

11、序列如seq?id?no.19至seq?id?no.20所示的引物對m2-5，

12、序列如seq?id?no.39至seq?id?no.44所示的引物對m5-1、引物對m5-2和引物對m5-4，

13、序列如seq?id?no.47至seq?id?no.62所示的引物對m6-1、引物對m6-2、引物對m6-3、引物對m7-1、引物對m7-2、引物對m7-3、引物對m7-4和引物對m7-5，

14、序列如seq?id?no.67至seq?id?no.72所示的引物對m9-1、引物對m9-2和引物對m9-3，

15、序列如seq?id?no.77至seq?id?no.80所示的引物對m9-6和引物對9-7，

16、序列如seq?id?no.83至seq?id?no.84所示的引物對m9-11，

17、序列如seq?id?no.103至seq?id?no.104所示的引物對m10-13。

18、在本技術(shù)的一些實施方式中，所述核酸組合產(chǎn)品中所述引物對的數(shù)量為18對-52對。

19、在本技術(shù)的一些實施方式中，所述引物對中的至少一條引物標記有熒光基團；

20、可選地，每條引物上標記的所述熒光基團各自獨立地為6-fam、rox、hex或者tamra。

21、本技術(shù)的一個或者多個實施例還提供一種檢測試劑盒，所述檢測試劑盒包括所述的核酸組合產(chǎn)品。

22、在本技術(shù)的一些實施方式中，所述檢測試劑盒還包括str?pcr反應(yīng)試劑。

23、本技術(shù)的一個或者多個實施例又提供一種生物樣本dna中短串聯(lián)重復(fù)片段的檢測方法，所述檢測方法包括采用所述的核酸組合產(chǎn)品或者所述的檢測試劑盒對待測生物樣本dna中短串聯(lián)重復(fù)片段進行檢測的步驟。

24、在本技術(shù)的一些實施方式中，所述檢測方法包括如下步驟：

25、提取所述待測生物樣本的dna，dna片段化處理，全基因組擴增，制備擴增產(chǎn)物；

26、以所述擴增產(chǎn)物為模板，采用所述核酸組合產(chǎn)品進行str?pcr擴增，根據(jù)所得strpcr擴增結(jié)果確定所述待測生物樣本的dna中短串聯(lián)重復(fù)片段的情況。

27、在本技術(shù)的一些實施方式中，str?pcr擴增的反應(yīng)初始體系中，

28、所述的引物對m1-1、引物對m1-2、引物對m1-3、引物對m1-4、引物對m1-5、引物對m1-6、引物對m4-1、引物對m4-2和引物對m4-4的摩爾比為10±1.0：2.5±1.0：5±1.0：5±1.0：5±1.0：15±1.0：15±1.0：5±1.0：12.5±1.0，

29、所述的引物對m2-1、引物對m2-3、引物對m2-4、引物對m2-5、引物對m3-1、引物對m3-2、引物對m3-3、引物對m3-4、引物對m3-5和引物對m3-6的摩爾比為5±1.0：15±1.0：2.5±1.0：30±1.0：2.5±1.0：5±1.0：10±1.0：15±1.0：12.5±1.0：5±1.0，

30、所述的引物對m5-1、引物對m8-3、引物對m4-3和引物對m2-2的摩爾比為5±1.0：37.5±1.0：25±1.0：12.5±1.0，

31、所述的引物對m6-1、引物對m6-2、引物對m6-3、引物對m7-1、引物對m7-2、引物對m7-3、引物對m7-4、引物對m7-5、引物對m10-6、引物對m10-4、引物對m10-2和引物對m10-1的摩爾比為5±1.0：15±1.0：37.5±1.0：5±1.0：7.5±1.0：8.75±1.0：50±1.0：50±1.0：10±1.0：10±1.0：15±1.0：10±1.0，

32、所述的引物對m9-11、引物對m9-3、引物對m9-2、引物對m9-7、引物對m9-9和引物對m10-12的摩爾比為10±1.0：2.5±1.0：10±1.0：5±1.0：25±1.0：37.5±1.0，

33、所述的引物對m9-6、引物對m9-1和引物對m5-2的摩爾比為10±1.0：10±1.0：10±1.0，

34、所述的引物對m9-4、引物對m9-5和引物對m5-4的摩爾比為10±1.0：10±1.0：10±1.0，

35、所述的引物對m10-8、引物對m10-10、引物對m10-3、引物對m10-9和引物對m10-13的摩爾比為10±1.0：10±1.0：10±1.0：5±1.0：15±1.0；

36、每對所述引物對中，正向引物和反向引物的摩爾比為1±0.5：1±0.5。

37、在本技術(shù)的一些實施方式中，所述待測生物樣本為細胞樣本和血液樣本；可選地，所述細胞樣本中細胞的數(shù)量為2個-10個。

38、在本技術(shù)的一些實施方式中，所述待測生物樣本來自植入前胚胎；可選地，所述待測生物樣本來自滋養(yǎng)層。

39、本技術(shù)的一個或多個實施例細節(jié)在下面的描述中提出，本技術(shù)的其他特征、目的和優(yōu)點將從說明書及其權(quán)利要求書變得明顯。