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      一種融合蛋白及其制備方法與流程

      文檔序號(hào):40404289發(fā)布日期:2024-12-20 12:28閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

      技術(shù)特征:

      1.一種重組融合蛋白,其特征在于,包含以下任一種單體蛋白:

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組融合蛋白,其特征在于,所述smut1、smut2或smut3的c端連接6×his標(biāo)簽,分別得到重組融合蛋白rsmut1-his、rsmut2-his、rsmut3-his。

      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組融合蛋白,其特征在于,所述重組融合蛋白rsmut1-his、rsmut2-his、rsmut3-his的氨基酸序列分別如seq?id?no.6-seq?id?no.8所示。

      4.一種如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述重組融合蛋白的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

      5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,步驟s1中,所述重組融合蛋白編碼的基因序列如seq?id?no.10-seq?id?no.12中任一序列所示。

      6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,步驟s1中,所述真核表達(dá)載體為哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體。

      7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,步驟s2中,所示細(xì)胞株為cho細(xì)胞株。

      8.一種cho細(xì)胞株,為中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞slpcb07,保藏編號(hào)為cctccno:c2024299。

      9.一種如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述重組融合蛋白或如權(quán)利要求8所述cho細(xì)胞株在制備預(yù)防病毒性疾病豬流行性腹瀉的疫苗中的應(yīng)用。

      10.一種如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述重組融合蛋白或如權(quán)利要求8所述cho細(xì)胞株在制備預(yù)防和/或治療病毒性疾病豬流行性腹瀉的藥物中的應(yīng)用。


      技術(shù)總結(jié)
      本發(fā)明涉及一種融合蛋白及其制備方法。所述融合蛋白為含有豬流行性腹瀉病毒全長(zhǎng)的突變型SMut1單體蛋白,或?yàn)楹胸i流行性腹瀉病毒全長(zhǎng)的突變型SMut2單體蛋白,或?yàn)楹胸i流行性腹瀉病毒全長(zhǎng)的突變型SMut3單體蛋白。本發(fā)明構(gòu)建了融合蛋白突變體,且本突變體相對(duì)于野生型的融合蛋白,免疫原性顯著提高、Tm值顯著提高,其形成的三聚體蛋白比例高達(dá)95.2%。構(gòu)建并篩選了重組亞單位融合蛋白的CHO細(xì)胞株,該細(xì)胞株表達(dá)重組亞單位融合蛋白的產(chǎn)量高達(dá)1.6g/L、易于純化,細(xì)胞培養(yǎng)上清中的目的蛋白純度都能達(dá)到85%以上,只需一步親和層析就能使目的蛋白純度達(dá)到95%以上,遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足亞單位疫苗和診斷試劑的需求,易于大規(guī)模生產(chǎn)。

      技術(shù)研發(fā)人員:翟偉鋒,宗宇雨,殷波
      受保護(hù)的技術(shù)使用者:申聯(lián)生物醫(yī)藥(上海)股份有限公司
      技術(shù)研發(fā)日:
      技術(shù)公布日:2024/12/19
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