本發(fā)明屬于保健品、化妝品、食品添加劑的原料領(lǐng)域，具體的說(shuō)，涉及一種還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽無(wú)定型化合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad+)是超過(guò)500種酶促反應(yīng)所需的一種重要的輔酶。越來(lái)越多的研究表明，增加nad+當(dāng)量能明顯改善多器官功能，包括肝功能、腎功能、心功能和骨骼肌功能。nad+可以在從頭生物合成途徑中使用色氨酸，在preiss-handler途徑中使用煙酸(na)，以及在補(bǔ)救途徑中使用煙酰胺(nam)、煙酰胺核糖苷(nr)和煙酰胺單核苷酸(nmn)來(lái)合成。特別地，作為關(guān)鍵nad+中間體，nam、nr和nmn已經(jīng)因?yàn)樗鼈冊(cè)谠S多小鼠疾病模型中的潛在治療作用而被廣泛地研究。盡管通過(guò)補(bǔ)充中間體來(lái)提高nad+水平有助于健康并延長(zhǎng)壽命，但它們?cè)诓煌膊顩r下在不同器官中的藥代動(dòng)力學(xué)和代謝歸宿(fate)仍在研究中。此外，尚不清楚補(bǔ)充nad+前體是否能夠通過(guò)維持氧化還原穩(wěn)態(tài)來(lái)預(yù)防肝損傷或肝纖維化。像nmn這樣的關(guān)鍵nad中間體(通常被稱為“nad補(bǔ)充劑”)已經(jīng)引起了研究人員、投資者和消費(fèi)者對(duì)其與疾病和老化相關(guān)的顯著作用的關(guān)注。傳統(tǒng)的nad補(bǔ)充劑如nmn是氧化形式nad前體。研究表明，新的還原形式nad前體—還原性β-煙酰胺單核苷酸(nmnh)，它具有比nmn更好的nad促進(jìn)作用以及其他的生物學(xué)功能如增加細(xì)胞抗氧化能力、減少脂肪積累、減少炎性反應(yīng)和抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。

2、還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽（nmnh）的合成工藝目前還處于實(shí)驗(yàn)室研發(fā)階段，還不能實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，主要技術(shù)難點(diǎn)：一是nmnh是nmn的還原形式，容易被空氣氧化；二是現(xiàn)有的制備方法多需通過(guò)冷凍真空干燥的方法才能得到無(wú)定型固體，生產(chǎn)成本高，無(wú)法實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)?，F(xiàn)有技術(shù)所制得的nmnh產(chǎn)品存在純度低、流動(dòng)性差、容易吸潮變?yōu)橛蜖钗铩⒔到饪斓膯?wèn)題，冷凍干燥過(guò)程中通常伴隨一定程度降解，導(dǎo)致所得產(chǎn)品純度低，無(wú)法滿足產(chǎn)品應(yīng)用要求，流動(dòng)性差、容易吸潮導(dǎo)致產(chǎn)品在制劑加工時(shí)無(wú)法灌裝，壓片，賦型等，冷凍干燥所得凍干粉呈針狀，比表面積大，與空氣和水分接觸面增加，導(dǎo)致降解速度加快。因此，開(kāi)發(fā)新的具有穩(wěn)定性好、流動(dòng)性好、適合產(chǎn)業(yè)化等優(yōu)點(diǎn)的nmnh具有積極意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)背景技術(shù)中提出的問(wèn)題，本發(fā)明的第一目的在于提供了一種還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽制備方法，該制備方法具有操作簡(jiǎn)單、產(chǎn)品純度高、收率高、無(wú)需使用凍干等高投入低產(chǎn)出設(shè)備，更容易實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的特點(diǎn)。本發(fā)明的第二目的在于提供用本發(fā)明的制備方法獲得的還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽，該鹽為無(wú)定型化合物，在63.69℃-74.67℃和85.52℃-131.99℃的溫度范圍內(nèi)具有兩個(gè)特征的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，這兩個(gè)玻璃化轉(zhuǎn)變溫度的峰值分別為68.78℃和112.93℃；在217.21℃-241.88℃具有特征的熔點(diǎn)溫度，該特征熔點(diǎn)溫度的峰值為231.70℃，拉曼光譜顯示，該無(wú)定型化合物在拉曼位移814cm-1和845cm-1處具有更強(qiáng)的特征峰。該還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽無(wú)定型化合物具有純度高，水分小于5%，有效成分含量高，低吸濕性的優(yōu)點(diǎn)，具有良好的成型性。較晶態(tài)的還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽具有更低的含水量，?20℃-30℃的溫度條件下能穩(wěn)定保存3個(gè)月以上，具有突出的穩(wěn)定性優(yōu)勢(shì)。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

3、本發(fā)明所提供的還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽的制備方法，包括以下步驟，

4、（1）用β-煙酰胺單核苷酸為原料，二氧化硫脲作為還原劑，純水為反應(yīng)溶劑，堿性條件下反應(yīng)得到還原型β-煙酰胺單核苷酸水溶液；

5、（2）用高效制備液相色譜儀分離提純還原型β-煙酰胺單核苷酸水溶液；

6、（3）用強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂除去銨鹽，經(jīng)過(guò)納濾膜納濾濃縮，氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值得到還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽濃縮水溶液；

7、（4）向還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽濃縮水溶液中加入不良溶劑；

8、（5）攪拌并加入晶種；

9、（6）持續(xù)攪拌并產(chǎn)生懸浮沉淀；

10、（7）繼續(xù)加入不良溶劑提高收率；

11、（8）過(guò)濾、干燥得到還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽無(wú)定型化合物。

12、進(jìn)一步的，步驟（1）中，先配置β-煙酰胺單核苷酸水溶液，并加堿調(diào)節(jié)ph值至9.5-10.0后向溶液中加入二氧化硫脲開(kāi)始反應(yīng)，反應(yīng)過(guò)程維持反應(yīng)液ph值在9.5-10.0。

13、進(jìn)一步的，步驟（2）所述的不良溶劑為乙醇，步驟（4）中，還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽濃縮水溶液溫度為0℃-25℃，所述的不良溶劑為乙醇。

14、進(jìn)一步的，所述的晶種為核糖或葡萄糖或以核糖或葡萄糖為沉淀析出引物制備得到的還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽。

15、進(jìn)一步的，步驟（4）的還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽濃縮水溶液中還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽質(zhì)量百分含量為5%-15%。

16、進(jìn)一步的，步驟（1）的反應(yīng)溫度為39℃-44℃；步驟（8）的干燥溫度為20℃-35℃。

17、進(jìn)一步的，步驟（4）的不良溶劑加入量為還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽濃縮水溶液的1.5-4.0倍；步驟（7）不良溶劑滴加量為還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽濃縮水溶液的3.5-6.0倍。

18、本發(fā)明還提供用上述制備方法獲得的還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽。

19、進(jìn)一步的，所述還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽為無(wú)定型化合物，用差示掃描量熱儀檢測(cè)，從10℃升溫至300℃，升溫速率10℃/min，在63.69℃-74.67℃和85.52℃-131.99℃具有兩個(gè)特征的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，兩個(gè)特征的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度的峰值分別為68.78℃和112.93℃；在217.21℃-241.88℃具有特征熔點(diǎn)溫度，特征熔點(diǎn)溫度的峰值為231.70℃；用激光共焦拉曼光譜儀掃描，激發(fā)波長(zhǎng)為532nm,光柵為600刻線，物鏡為50倍，積分時(shí)間為5s,累積次數(shù)為3次，檢測(cè)結(jié)果顯示，在拉曼位移814cm-1和845cm-1處具有特征峰。

20、本發(fā)明的制備方法所獲得的還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽無(wú)定型化合物在作為制備保健品、化妝品、食品添加劑原料的應(yīng)用。

21、本發(fā)明的有益效果：

22、本發(fā)明不需要使用冷凍干燥設(shè)備即可制備出還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽，制備方法操作簡(jiǎn)單、成本低，更適合工業(yè)化生產(chǎn)。

23、本發(fā)明所制備的還原型β-煙酰胺單核苷酸二鈉鹽為無(wú)定型化合物：（1）用差示掃描量熱儀檢測(cè)，從10℃升溫至300℃，升溫速率10℃/min，在63.69℃-74.67℃和85.52℃-131.99℃具有兩個(gè)特征的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，兩個(gè)特征的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度的峰值分別為68.78℃和112.93℃；在217.21℃-241.88℃具有特征熔點(diǎn)溫度，特征熔點(diǎn)溫度的峰值為231.70℃；（2）用激光共焦拉曼光譜儀掃描，激發(fā)波長(zhǎng)為532nm,光柵為600刻線，物鏡為50倍，積分時(shí)間為5s，累積次數(shù)為3次，檢測(cè)結(jié)果顯示，在拉曼位移814cm-1和845cm-1處具有特征峰；（3）具有外觀色澤好，純度高，水小于5%，有效成分含量高，低吸濕性，并具有良好的成型性，在20℃-30℃溫度下能穩(wěn)定保存3個(gè)月以上。