荸薺皮提取貫眾素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，具體是涉及一種貫眾素的提取分離方法，特別是 涉及一種從荸薺皮中提取分離貫眾素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 貫眾素（Cyrtominetin)，也稱貫眾亭，化學(xué)名為（R)-6,8-二甲 基_5,7,3'，4'-四羥基二氫黃酮，存在鱗毛蕨科貫眾屬植物中。貫眾素為C-甲基化二 氫黃酮，該類化合物具有抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤等多種藥理活性。貫眾素結(jié)構(gòu)特別，在 植物中的分布少且含量不高。目前還沒有發(fā)現(xiàn)有關(guān)從植物中提取分離貫眾素的工藝技術(shù)文 獻(xiàn)。
[0003] 荸養(yǎng)（Eleocharis tuberosa)，又稱馬蹄，屬莎草科多年生淺水草本植物荸養(yǎng)的地 下球莖，我國(guó)大部分地區(qū)都有栽培。其中，廣西荸薺產(chǎn)量占全國(guó)70%，賀州荸薺產(chǎn)量占廣西 70%。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，荸薺有抗菌、抗腫瘤、防治呼吸道疾病、利腸通便和利尿排淋等作用；臨 床上可用于治療咽喉疼痛、痰熱咳嗽、熱病煩渴、小便不利、痢疾等癥。研宄表明，荸薺的活 性物質(zhì)主要富集在果皮和果肉之間。在荸薺加工過程中，被丟棄的荸薺皮質(zhì)量約占新鮮荸 薺質(zhì)量的25%，資源非常豐富。我們?cè)谘绣持邪l(fā)現(xiàn)荸薺皮中含有貫眾素，但目前未見從荸薺 皮中提取分離該化合物的文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于：提出一種荸薺皮提取貫眾素的方法。
[0005] 本發(fā)明的荸薺皮提取貫眾素的方法，應(yīng)用常規(guī)提取法和MCI、聚酰胺以及半制備型 高效液相色譜技術(shù)從荸薺皮中提取分離貫眾素，具體包括步驟如下：
[0006] (1)將新鮮的荸薺皮風(fēng)干，粉碎，備用；以重量計(jì)，稱取荸薺皮粉末1份，加入提取 罐中，每次加入4-10份70%體積百分比的丙酮水溶液，在25°C下浸泡24h，浸泡3次，過濾， 合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。
[0007] (2)以重量計(jì)，將提取物1份分散在5份水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的乙酸 乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。
[0008] (3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質(zhì)量的聚酰胺拌樣，將甲醇 揮發(fā)至干，裝柱，連接MCI柱進(jìn)行中壓分離，以40-100%體積百分比的甲醇水溶液為流動(dòng)相 梯度洗脫，薄層色譜法檢測(cè)，收集合并流動(dòng)相濃度為70-90%百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲 得粗品A。
[0009] (4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質(zhì)量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發(fā)至 干，轉(zhuǎn)入聚酰胺色譜柱進(jìn)行分離，用體積比為2:1-0:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜法 檢測(cè)，收集合并含有貫眾素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。
[0010] (5)以重量計(jì)，將所得粗品B 1份溶于2-5份甲醇中，用半制備型高效液相色譜純 化，以46-58%體積百分比的甲醇水溶液為流動(dòng)相，收集合并含有貫眾素的洗脫液，減壓濃 縮，干燥，獲得含量達(dá)95%以上的貫眾素產(chǎn)品。
[0011] 2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟⑶中的所述的MCI柱規(guī)格 為70X460mm，填充材料為MCI-gel CHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動(dòng)相流速為 50mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為245nm ;所述的流動(dòng)相為40-100%體積百分比的甲醇水溶液。
[0012] 3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（4)中所述的聚酰胺，規(guī)格 為200-300目；所用洗脫液為體積比為2:1-0:1的氯仿-甲醇溶液。
[0013] 4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟￠)中的所用色譜柱為 Zorbax SB-C18 (9. 4mm 25cm)柱；所述流動(dòng)相為46-58%體積百分比的甲醇水溶液。
[0014] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比其有益效果是：設(shè)計(jì)科學(xué)合理，開辟了從天然植物中提取 分離貫眾素的新途徑，分離效果好，產(chǎn)品純度高，使一貫被視為廢棄物的荸薺皮變廢為寶， 所選用的層析材料MCI和聚酰胺均可反復(fù)使用，原料易得，資源豐富，生產(chǎn)成本低，可進(jìn)行 規(guī)模化生產(chǎn)，具有較好的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0016] 本發(fā)明的荸薺皮提取貫眾素的方法，應(yīng)用常規(guī)提取法和MCI、聚酰胺以及半制備型 高效液相色譜技術(shù)從荸薺皮中提取分離貫眾素，具體包括步驟如下：
[0017] (1)將新鮮的荸薺皮風(fēng)干，粉碎，備用。稱取一定質(zhì)量（g)的荸薺皮粉末加入提取 罐中，再加入4-10倍體積（mL)的70%體積百分比的丙酮水溶液，在25°C下浸泡24h，浸泡 3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。
[0018] (2)將提取物（g)分散在5倍體積（mL)的水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的乙 酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。
[0019] (3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質(zhì)量的聚酰胺拌樣，將甲醇 揮發(fā)至干，裝柱，連接MCI柱進(jìn)行中壓分離，柱規(guī)格為70mm X 460mm，填充材料為日本三菱化 學(xué)公司生產(chǎn)的MCI-gel CHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動(dòng)相流速為50mL/min， 檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，以40-100%體積百分比的甲醇水溶液為流動(dòng)相梯度洗脫，根據(jù)檢測(cè)峰 變化情況調(diào)節(jié)洗脫液濃度，按每份500mL收集，薄層色譜法檢測(cè)，收集合并流動(dòng)相濃度為 70-90 %百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A。
[0020] (4)往粗品中加入甲醇至完全溶解，加入2-4倍質(zhì)量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發(fā) 干，轉(zhuǎn)入聚酰胺的色譜柱進(jìn)行分離，用體積比為2:1-0:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜 法檢測(cè)，收集合并含有貫眾素的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。
[0021] (5)將所得粗品B(g)溶于2-5倍體積（mL)的甲醇中，用半制備型高效液相色譜純 化，所用色譜柱為美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)的Zorbax SB-C18 (9. 4mm 25cm)柱，以46-58%體積 百分比的甲醇水溶液為流動(dòng)相，收集合并含有貫眾素的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量 達(dá)95%以上的貫眾素產(chǎn)品。
[0022] 實(shí)施例1
[0023] 將8kg新鮮荸薺皮粉末加入在提取罐中，加入32L 70%體積百分比的丙酮水溶 液，在25°C下浸泡24h，共浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮膏狀，獲得提取物I. 05kg。
[0024] 將提取物加入5. OL水中制成渾濁液，用5. OL乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減 壓濃縮，獲得萃取物120g。
[0025] 往萃取物中加入300mL甲醇溶解，用26