一種從羅漢果中提取羅漢果苷v的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物成分的提取方法，尤其涉及從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法，其可連續(xù)高效的提取羅漢果苷V。
【背景技術(shù)】
[0002]羅漢果做為我國(guó)的特有植物，因地域上的優(yōu)勢(shì)，為羅漢果各方面的研宄提供了便利，對(duì)其研宄除羅漢果的復(fù)配之外，主要集中在羅漢果甜苷V的提取純化工藝方面。CN101863946A公開(kāi)了一種干羅漢果中提取高含量羅漢果甜甙V的方法，該方法是將羅漢果干果破碎后醇提、濃縮、大孔樹(shù)脂吸附分離、離子交換樹(shù)脂脫色，經(jīng)濃縮干燥得產(chǎn)品，該方法過(guò)程簡(jiǎn)單，適應(yīng)工廠生產(chǎn)，但產(chǎn)品純度低，樹(shù)脂利用率低。CN101690573A公開(kāi)了一種羅漢果苷V含量大于60%羅漢果提取物生產(chǎn)方法，該方法是將羅漢果破碎后酶解、水提、濃縮、離子交換樹(shù)脂脫色、大孔樹(shù)脂吸附分離以及氧化鋁層析，最后經(jīng)濃縮干燥得產(chǎn)品，該方法可實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品甜苷V純度大于60%，因經(jīng)多步層析，使得最終產(chǎn)品的收率較低。CN10140266A公開(kāi)了羅漢果苷V的制備方法，該方法是以羅漢果粗提物為原料，經(jīng)硅膠層析、C18柱反相層析、濃縮干燥得產(chǎn)品，產(chǎn)品純度可達(dá)70%以上，該方法的主要缺陷為過(guò)程中使用大量的有機(jī)溶劑，產(chǎn)品收率低，成本高，不適于工業(yè)生產(chǎn)。CN101177444A公開(kāi)了一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，該方法是將羅漢果鮮果破碎、酶解、多級(jí)逆流提取、離心、超濾、濃縮、大孔樹(shù)脂吸附分離、離子交換樹(shù)脂脫色、C18反相硅膠層析，經(jīng)濃縮干燥，制得產(chǎn)品，該方法的缺陷為產(chǎn)品收率低、產(chǎn)品純度低、工藝復(fù)雜，不利于工業(yè)生產(chǎn)。CN104086615A公開(kāi)了一種從羅漢果中制備羅漢果甙V的方法，該方法是將羅漢果破碎后高壓處理、超臨界流體萃取、經(jīng)HP-20SS樹(shù)脂層析、濃縮、干燥得產(chǎn)品，產(chǎn)品中甜苷V純度70%以上，該方法工藝簡(jiǎn)單、純度高，但由于超臨界流體萃取設(shè)備一次處理量的限制，不利于連續(xù)的規(guī)模生產(chǎn)。鑒于此，有必要改進(jìn)現(xiàn)有技術(shù)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提出一種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法，該方法有機(jī)結(jié)合了多種提純方式，實(shí)現(xiàn)連續(xù)高效的提取羅漢果苷V。
[0004]本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的:
一種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法，其特征在于包括以下步驟:
原料前處理:將羅漢果洗凈、破碎；
微波逆流提取:對(duì)前處理后的羅漢果進(jìn)行微波逆流提取，提取溶劑為去離子水，物料與水的流動(dòng)為逆向連續(xù)動(dòng)態(tài)流動(dòng)，同時(shí)對(duì)渣進(jìn)行擠壓，擠出殘留液與料液混合，經(jīng)過(guò)濾得提取液；
多級(jí)過(guò)濾:提取液先后經(jīng)臥式螺旋離心、管式離心、第一超濾以及第二超濾后得濾液，其中，所述臥式螺旋離心的轉(zhuǎn)速為2500?5000r/min，管式離心的轉(zhuǎn)速為12000?16000r/min，第一超濾是經(jīng)過(guò)截留分子量為30k?50kDa的超濾膜，第二超濾是經(jīng)過(guò)截留分子量為4k?6kDa的超濾膜；
大孔樹(shù)脂吸附分離:調(diào)節(jié)濾液的Ph值，常溫上大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附，上柱流速為0.5?1.5 BV/h，上柱完成后靜置I?2h ;用相當(dāng)于樹(shù)脂總體積6?8倍去離子水常溫下進(jìn)行洗脫，洗脫流速為2?3BV/h，然后使用親水溶劑對(duì)大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行洗脫，洗脫流速為I?2BV/h,收集洗脫液；
多級(jí)過(guò)濾:將洗脫液使用納濾膜進(jìn)行納濾處理，然后真空濃縮至百利度30?35為止，得濃縮液；
干燥:將濃縮液進(jìn)行干燥后，得羅漢果甜苷V。
[0005]在本發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法中，微波逆流處理的提取時(shí)提取溫度為70?90 °C，提取時(shí)間為50?70 min,微波功率為600?800W，頻率6000?8000MHz ο
[0006]在本發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法中，濾液Ph為8?9。
[0007]在本發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法中，調(diào)節(jié)濾液Ph的試劑為氫氧化鈉或碳酸鈉。
[0008]在本發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法中，所述的大孔樹(shù)脂為D-101、AB-8或HPD-100，樹(shù)脂柱的徑高比為1:6。
[0009]在本發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法中，所述的親水溶劑為體積分?jǐn)?shù)為60?80%乙醇溶液，親水溶劑的用量為2?3 BV。
[0010]在本發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法中，所述納濾的截留分子量為150 ?300Dao
[0011]在本發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法中，所述的真空濃縮的濃縮溫度為70?80°C，真空度為-0.08Mpa?-0.04Mpa。
[0012]在本發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法中，干燥處理的方式為噴霧干燥。
[0013]實(shí)施發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法，具有以下有益效果:本發(fā)明綜合了多種提取方式的優(yōu)點(diǎn)，完成了連續(xù)高效率的提取羅漢果苷V。按照本發(fā)明方法所得到的產(chǎn)品，經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)，羅漢果甜苷V63?65%，羅漢果甜苷V最終收率70?74%。除乙醇外，本方法未使用其他的對(duì)人體有害的有機(jī)溶劑溶劑，對(duì)環(huán)境環(huán)保，產(chǎn)品中乙醇?xì)埩粼?ppm以下，產(chǎn)品安全，品質(zhì)高。
[0014]微波逆流提取代替?zhèn)鹘y(tǒng)的熱回流提取，一方面實(shí)現(xiàn)了提取的連續(xù)性，提高了生產(chǎn)規(guī)模，另一方面保證收率的同時(shí)，減少了提取時(shí)間與溶劑的使用，提取時(shí)間減為原來(lái)的1/5，溶劑使用量為原來(lái)的50%以下。
[0015]多級(jí)過(guò)濾方式進(jìn)一步去除了料液中的顆粒與大分子雜質(zhì)，純化了料液。過(guò)程中使用了離心與超濾結(jié)合的方式過(guò)濾，首先采用中低速的臥式螺旋離心，去除了料液中大顆粒的懸浮顆粒，然后再使用高速的管式離心，去除了料液中細(xì)小的固體顆粒，接著依次經(jīng)過(guò)截留分子量分別為30k?50kDa、4k?6kDa的超濾膜，去除了大部分的糖類、蛋白質(zhì)、親質(zhì)等大分子物質(zhì)，由于逐級(jí)過(guò)濾方式搭配合理，保證了過(guò)濾的連續(xù)性同時(shí)，去除了料液中的部分雜質(zhì)，使得后續(xù)樹(shù)脂的利用率更高，有利于活性物質(zhì)的富集。
[0016]堿性上柱將上柱的液的PH調(diào)為8?9，使得料液中的絕大部分色素物質(zhì)、黃酮等酸性物質(zhì)以離子形式存在，在上柱過(guò)程中不被大孔樹(shù)脂吸附而隨上柱流出液流出，進(jìn)一步純化了目標(biāo)成分，同時(shí)也提高了樹(shù)脂對(duì)活性成分的吸附量，提高了樹(shù)脂的利用效率。
[0017]納濾主要是脫去大量的溶劑，如乙醇、水、無(wú)機(jī)鹽等，達(dá)到一定的濃縮目的，在采用納濾方式進(jìn)行純化的同時(shí)，也一定程度減少后續(xù)濃縮的能耗，降低了生產(chǎn)成本。
【附圖說(shuō)明】
[0018]圖1為本發(fā)明的從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法的示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。
[0020]如圖1所示，本發(fā)明的這種從羅漢果中提取羅漢果苷V的方法包括:原料前處理，微波逆流處理，多級(jí)過(guò)濾處理，大孔樹(shù)脂吸附處理，納濾、濃縮處理，干燥處理，具體如下所述。
[0021]S1:將羅漢果鮮果除雜，洗凈，適當(dāng)破碎，以不打碎羅漢果果好為Jl。
[0022]S2:微波逆流提取使用微波逆流提取裝置對(duì)破碎后的羅漢果進(jìn)行提取，提取時(shí)提取溫度為70?90 °C，提取時(shí)間為50?70 min,微波功率為600?800W，頻率6000?8000MHz?提取溶劑為去離子水，正向進(jìn)料，反相進(jìn)水，物料與水的流動(dòng)為逆向連續(xù)動(dòng)態(tài)流動(dòng)，濾渣經(jīng)螺旋輸送器強(qiáng)制推送至出渣口，出渣螺旋同時(shí)對(duì)渣進(jìn)行擠壓，殘?jiān)懦觯瑲埩粢簲D出并與料液混合，經(jīng)過(guò)濾得提取液。
[0023]S3:將S2所得提取液進(jìn)行離心，首先是經(jīng)過(guò)臥式螺旋離心，轉(zhuǎn)速為2500?5000r/min，然后經(jīng)管式離心，轉(zhuǎn)速為12000?16000r/min。離心后進(jìn)行超濾，經(jīng)過(guò)截留分子量為30k?50kDa超濾膜，然后是經(jīng)過(guò)截留分子量為4k?6kDa，均為中空纖維膜，最后得濾液。
[0024]S4:調(diào)節(jié)S3中所得濾液Ph至8?9后，常溫上大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附，上柱流速為0.5?1.5 BV/h,上柱完成后靜置I?2h。用相當(dāng)于樹(shù)脂總體積6?8倍去離子水常溫下進(jìn)行洗脫，洗脫流速為2?3BV/h，然后使用親水溶劑對(duì)大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行洗脫，洗脫流速為I?
2BV/h，收集洗脫液。調(diào)節(jié)濾液Ph的試劑為氫氧化鈉或碳酸。所述的大孔樹(shù)脂為D-101、AB-8或HPD-100，樹(shù)脂柱的徑高比為1:6。其中，D_101、AB_8生產(chǎn)廠家為上海南開(kāi)樹(shù)脂有限公司，DM130生產(chǎn)廠家為安徽三星樹(shù)脂科技有限公司。所述的親水溶劑為體積分?jǐn)?shù)為60?80%乙醇溶液，親水溶劑的用量為2?3 BV。
[0025]S5:將S4中所得洗脫液使用納濾膜進(jìn)行納濾處理，截留分子量為150?300Da。然后真空濃縮至百利度30?35為止，濃縮溫度為70?80°C，真空度為-0.08Mpa?-0.04Mpa，最后得濃縮液。
[0026]S6:將S5中所得濃縮液進(jìn)行噴霧干燥后，羅漢果甜苷V的產(chǎn)品。
[0027]為更為清楚的了解本發(fā)明，以下提供五個(gè)實(shí)施例。
[0028]實(shí)施例1
Si原料前處理:取1000 kg羅漢果鮮果除雜，洗凈，適當(dāng)破碎，以不打碎羅漢果果籽為宜；
s2微波逆流提取:使用微波逆流提取裝置對(duì)破碎后的羅漢果進(jìn)行提取，提取溶劑為去離子水，正向進(jìn)料，反相進(jìn)水，物料與水的流動(dòng)為逆向連續(xù)動(dòng)態(tài)流動(dòng)，提取溫度為90°C，提取時(shí)間為70 min,微波功率為800w，頻率為6000MHz，濾渣經(jīng)螺旋輸送器強(qiáng)制推送至出渣口，出渣螺旋同時(shí)對(duì)渣進(jìn)行擠壓，殘?jiān)懦?，殘留液擠出并與料液混合，經(jīng)過(guò)濾得提取液；
s3多級(jí)過(guò)濾:將步驟s2中所得提取液使用臥式螺旋離心機(jī)進(jìn)行離心，離心轉(zhuǎn)速為5000 r/min，然后過(guò)管式離心機(jī)，離心轉(zhuǎn)速為14000 r/min，所得離心液依次過(guò)截留分子量為50kDa、6kDa中空纖維超濾膜，得濾液；
s4大孔樹(shù)脂吸附分離:使用氫氧化鈉調(diào)節(jié)步驟s3中所得濾液Ph至8.98后，常溫上D-101樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附，樹(shù)脂柱徑高比為1:6，上柱流速為0.5BV/h，上柱完成后靜置2h ;用相當(dāng)于樹(shù)脂總體積8倍去離子水常溫下進(jìn)行洗脫，洗脫流速為2BV/h，然后使用3BV的80%乙醇對(duì)大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行洗脫，洗脫流速為lBV/h，收集洗脫液；
s5納濾、濃縮:將步驟s4中所得洗脫液使用300Da納濾膜進(jìn)行納濾處理，然后在溫度為80°C，真空度為-0.08Mpa?-0.04Mpa的條件下，真空濃縮至百利度35為止，得濃縮液；s6干燥:將步驟s5中所得濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得羅漢果甜苷V的產(chǎn)品，稱重6.422
kg ο
[0029]經(jīng)液相色譜儀檢測(cè)的結(jié)果:羅漢