抗體-藥物偶聯(lián)物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及作為抗腫瘤藥有用的抗體一藥物偶聯(lián)物，其是將能以腫瘤細(xì)胞為靶標(biāo) 的抗體和抗腫瘤性藥物經(jīng)由接頭結(jié)構(gòu)部分連接而成的。
【背景技術(shù)】
[0002] 向與在癌細(xì)胞表面表達(dá)、并且能向細(xì)胞內(nèi)化的抗原結(jié)合的抗體上連接具有細(xì)胞毒 性的藥物得到的抗體一藥物偶聯(lián)物（Antibody-DrugConjugate;ADC)能夠選擇性地向癌 細(xì)胞輸送藥物，從而可預(yù)計其能使藥物在癌細(xì)胞內(nèi)蓄積，并殺死癌細(xì)胞（參照非專利文獻(xiàn) 1~3)。作為ADC，例如，于抗0)33抗體連接卡奇霉素（calicheamicin)而成的Mylotarg(吉 妥單抗，Gemtuzumabozogamicin)作為急性髓細(xì)胞性白血病的治療藥已得到批準(zhǔn)。另外，最 近，于抗⑶30抗體連接耳他汀E而成的Adcetris(Brentuximabvedotin)作為霍奇金淋巴 瘤和未分化大細(xì)胞淋巴瘤的治療藥得到批準(zhǔn)（參照非專利文獻(xiàn)4)。迄今為止被批準(zhǔn)的ADC 中含有的藥物以DNA或微管蛋白為靶標(biāo)。
[0003] 作為抗腫瘤性的低分子化合物，已知作為抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶I而呈現(xiàn)抗腫瘤作用的 化合物的喜樹堿衍生物。其中，下式
[0004][化1]
【主權(quán)項】
1.抗體一藥物偶聯(lián)物，其特征在于，其是將下式
所示的抗腫瘤性化合物與抗體經(jīng)由下式： -L1-L2-Lp-NH- (CH2) n-La-Lb-Lc-所示的結(jié)構(gòu)的接頭連接而成的， 其中，抗體連接于L1的末端，抗腫瘤性化合物以1位的氨基的氮原子為連接部位、連接 于Lti的末端， 式中， η1表不O~6的整數(shù)， L1 表不-(玻泊醜亞胺基-N)- (CH 2) n2-C ( = 0)-CH2-C ( = 0) -NH- (CH2) n3-C (= 0) -、_C ( = 0) -eye. Hex (1，4) -CH2- (N-ly-3-diminiccuS)-、或-C ( = 0) - (CH2) n4_C ( = 0)-， 其中，n2表不2~8的整數(shù)，n 3表不I~8的整數(shù)，n 4表不I~8的整數(shù)， L2表示-NH- (CH 2-CH2-〇) n5-CH2-CH2-C ( = 0) -、-S- (CH2) n6-C ( = 0)-、或單鍵， 其中，η5表不1~6的整數(shù)，η 6表不1~6的整數(shù)， Lp表示由2~7個氨基酸構(gòu)成的肽殘基， 1/表不-〇( = 0)-NH'-NRi^CHjn7-、-。-、或單鍵， 其中，η7表示1~6的整數(shù)，R1表示氫原子、碳原子數(shù)為1~6的烷基、-(CH2) n8-C00H、 或-(CH2) η9-0Η，其中η8表示1~4的整數(shù)，η 9表示1~6的整數(shù)， Lb表不-CR 2 (-R3) -、-〇-、-NR4-、或單鍵， 其中，R2及R 3各自獨立地表示氫原子、碳原子數(shù)為1~6的烷基、-(CH2)na-NH 2、-(CH2) 1113-〇)0!1、或-(〇12)11[;-0!1，1?4表示氫原子或碳原子數(shù)為1~6的烷基，11 3表示0~6的整數(shù)， nb表不1~4的整數(shù)，η ￡表不1~4的整數(shù)，但η 3為0時，R2及R 3不相同， 1^表不-CH 2-或-C ( = 0)-， -(琥珀酰亞胺-3-基-N)-為下式：
所示的結(jié)構(gòu)，以該結(jié)構(gòu)的3位與抗體連接，在1位的氮原子上與包含該結(jié)構(gòu)的接頭結(jié)構(gòu) 內(nèi)的亞甲基連接， -(N-ly-3-diminiccuS)-為下式：
所示的結(jié)構(gòu)，以該結(jié)構(gòu)的3位與L2連接，在1位的氮原子上與包含該結(jié)構(gòu)的接頭結(jié)構(gòu) 內(nèi)的亞甲基連接， eye. Hex (1，4)表示1，4-亞環(huán)己基， L2為-S- (CH 2) n6_C ( = 0)-時，L1 為-C ( = 0) -eye. Hex (1，4) -CH 2_ (N-ly-3-diminiccu S)
2. 權(quán)利要求1所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，Lp的肽殘基為由選自苯丙氨酸、甘氨 酸、纈氨酸、賴氨酸、瓜氨酸、絲氨酸、谷氨酸、天冬氨酸中的氨基酸形成的氨基酸殘基。
3. 權(quán)利要求1或2所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中， Lp表示四肽殘基， La表示-0-、或單鍵， Lb表不-CR 2 (-R3)-或單鍵， 其中，R2及R 3各自獨立地表示氫原子、碳原子數(shù)為1~6的烷基、-(CH2)na-NH 2、-(CH2) nb-C00H、或-(CH2) ηε-〇Η，nb表示1~4的整數(shù)，n e表示1~4的整數(shù)，但η 3為0時，R2及R 3 不相同， 1^表不 _C ( = 0)_。
4. 權(quán)利要求1~3中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物， Lp表示GGFG的四肽殘基， La表示-0-、或單鍵， Lb表不-CR 2 (-R3)-或單鍵， 其中，R2及R3表示氫原子， 1^表不 _C ( = 0)_。
5. 權(quán)利要求1~4中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，L 1為-(琥珀酰亞 胺 _3_ 基 _N)_ (CH2) n2_C ( = 0)_ 或-CH2_C ( = 0) _NH_ (CH2) n3_C ( = 0)_。
6. 權(quán)利要求1~4中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，L 1為-(琥珀酰亞 胺 _3_ 基-N) - (CH2) n2_C ( = 0) _。
7. 權(quán)利要求1~4中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，L 1為-C( = 0)-eye. Hex (1，4) -CH2- (N-ly-3-diminiccuS)-或-C ( = 0) - (CH2) n4_C ( = 0) _。
8. 權(quán)利要求1~6中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，η 2為2~5的整數(shù)，L 2為 單鍵。
9. 權(quán)利要求1~6中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，η 2為2~5的整數(shù)，L2 為-NH-(CH2CH20)n5_CH2-CH 2-C( = 0)-，η5為 2 或 4。
10. 權(quán)利要求1~9中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，下式-NH-(CH2) Ii1-La-Lb-Lc-為具有4~7個原子的鏈長的部分結(jié)構(gòu)。
11. 權(quán)利要求1~9中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，下式-NH-(CH2) Ii1-La-Lb-Le-為具有5或6個原子的鏈長的部分結(jié)構(gòu)。
12. 權(quán)利要求1~11中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中， 下式-NH- (CH2) Ii1-La-Lb-Lti-為， -NH-(CH2) 3-C ( = 0)-、 -NH-CH2-O-CH2-C ( = 0)-、或 -NH-(CH2) 2-〇-CH2-C ( = 0)-〇
13. 權(quán)利要求1~12中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，上述接頭的結(jié)構(gòu)為選自 以下組中的1種結(jié)構(gòu)， -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2-C ( = 0) -GGFG-NH-CH2Ch2-C ( = 0) - (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2-C ( = 0) -GgFG-NH-CH2CH2CH2-C ( = 0) - (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2CH2CH2CH2-C ( = 0) -GGFG-NH-CH2Ch2-C ( = 0) - (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2CH2CH2CH2-C ( = 0) -GgFG-NH-CH2CH2CH2-C (= 0)- (NH-DX) -(琥珀酰亞胺 _3_ 基-N) -CH2CH2CH2CH2CH2-C ( = 0) -Ggfg-NH-CH2CH2CH2CH2CH 2-C (= 0)- (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2CH2CH2CH2-C ( = 0) -GGFG-NH-CH2-O-Ch2-C (= 0)- (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2CH2CH2CH2-C ( = 0) -GgFG-NH-CH2CH2-O-CH2-C (= 0)- (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2-C ( = 0) -Nh-CH2CH2O-CH2CH2O-CH 2CH2-C (= 0) -GgFG-NH-CH2CH2CH2-C ( = 0) - (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2-C ( = 0) -Nh-CH2CH2O-CH2CH2O-CH 2CH2-C (= 0) -GGFG-NH-CH2Ch2-C ( = 0) - (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-n)-ch2ch2-c( = o)-nh-ch2ch2o-ch2ch2o-ch 2ch2o-ch2ch2o-ch2ch 2-C ( = 0) -Ggfg-NH-CH2CH2CH2-C ( = 0) - (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-n)-ch2ch2-c( = o)-nh-ch2ch2o-ch2ch2o-ch 2ch2o-ch2ch2o-ch2ch 2-C ( = 0) -GGFG-NH-CH2Ch2-C ( = 0) - (NH-DX) -CH2-C ( = 0) -NH-CH2CH2-C ( = 0) -GgFG-NH-CH2CH2CH2-C ( = 0) - (NH-DX) -C ( = 0) -CH2CH2CH2CH2CH2Ch 2-C ( = 0) -GgFG-NH-CH2CH2CH2-C ( = 0) - (NH-DX) -C ( = 0) _cy c· Hex (I，4)-CH2-(N-1 y-3_dimin i ccuS)-S-CH2CH2-C (= 0) -GgFG-NH-CH2CH2CH2-C ( = 0) - (NH-DX) 其中，-(NH-DX)表示下式：
所示的、1位的氨基的氮原子成為連接部位的基團， _GGFG_ 表不-Gly-Gly-Phe-Gly-的狀殘基。
14. 權(quán)利要求1~6及8~11中任一項所述的抗體一藥物偶聯(lián)物，其中，上述接頭的結(jié) 構(gòu)為選自以下組中的1種結(jié)構(gòu)， -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2CH2CH2CH2-C ( = 0) -GGFG-NH-CH2-O-Ch2-C (= 0)- (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2CH2CH2CH2-C ( = 0) -GgFG-NH-CH2CH2-O-CH2-C (= 0)- (NH-DX) -(琥珀酰亞胺-3-基-N) -CH2CH2-C ( = 0) -Nh-CH2CH2O-CH2CH2O-CH 2CH2-C (= 0) -GgFG-NH-CH2CH2CH2-C ( = 0) - (NH-DX) 其中，-(NH-DX)表示下式：
所示的、1位的氨基的氮原子成為連接部位的基團。
15. 抗體一藥物偶聯(lián)物，其特征在于，其是下式
所示的抗腫瘤性化合物與抗體經(jīng)由下式： -L1-L2-Lp-NH- (CH2) n-La-Lb-Lc-所示的結(jié)構(gòu)的接頭連接而成的， 此處，抗體連接于L1的末端，抗腫瘤性化合物連接于L ^的末端， 式中， η1表不0~6的整數(shù)， L1表示-(琥珀酰亞胺-3-基-N) - (CH 2) n2-C ( = 0)-，經(jīng)由在存在于抗體的鉸鏈部的二 硫鍵部分中形成的硫醚鍵而連接至抗體， 其中，η2表示2~8的整數(shù)， L2表示-NH- (CH 2-CH2-〇) n5-CH2-CH2-C ( = 0)-或單鍵， 其中，η5表示1~6的整數(shù)， Lp表示GGFG的四肽殘基， La表示-0-或單鍵， Lb表示-CR 2 (-R3)-或單鍵， 其中，R2及R3表示氫原子， 1^表不-C ( = 〇)-， -(琥珀酰亞胺-3-基-N)-為下式：
所示的結(jié)構(gòu)，以該結(jié)構(gòu)的3位與抗體連接，在1位的氮原子上與包含該結(jié)構(gòu)的接頭結(jié)構(gòu) 內(nèi)的亞甲基連接。