結(jié)合HER3β-發(fā)夾和HER4β-發(fā)夾的抗HER3/HER4抗原結(jié)合蛋白的制作方法
【專利說明】結(jié)合HER3P-發(fā)夾和HER4P-發(fā)夾的抗HER3/HER4抗原結(jié) 合蛋白
[0001] 本發(fā)明涉及結(jié)合HER3 發(fā)夾和HER4 發(fā)夾的抗HER3/HER4抗原結(jié)合蛋白 (例如抗J1ER3/HER4抗體），用于選擇這些抗原結(jié)合蛋白的方法，它們的制備及作為藥物的 用途。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] HER蛋白質(zhì)家族由4個(gè)成員組成：HER1，也稱作表皮生長因子受體（EGFR)或 ErbB-1 ;HER2,也稱作 ErbB-2 ;ErbB-3,也稱作 HER3 ;和 ErbB-4,也稱作 HER4。ErbB 家族蛋 白質(zhì)是受體酪氨酸激酶且代表細(xì)胞生長、分化和存活的重要介導(dǎo)物。ffiR家族代表不同配體 (像神經(jīng)調(diào)蛋白（NRG)家族、雙調(diào)蛋白、EGF和TGF-a)的受體蛋白質(zhì)。調(diào)蛋白（也稱作HRG 或神經(jīng)調(diào)蛋白NRG-1)是例如HER3和HER4的配體。
[0004] 人 HER3 (ErbB-3, ERBB3, c-erbB-3, c-erbB3,受體酪氨酸蛋白質(zhì)激酶 erbB-3, SEQ ID NO:3)編碼受體酪氨酸激酶的表皮生長因子受體（EGFR)家族的一個(gè)成員，該家族還 包括 HER1(也稱作 EGFR)、HER2、和 HER4 (Kraus, M.H.et al.，PNAS 86:9193-9197(1989); Plowman, G. D. et al. , PNAS 87:4905-4909 (1990) ；Kraus, M. H. et al. , PNAS 90:2900-2904(1993))。就像原型表皮生長因子受體，跨膜受體HER3由胞外配體結(jié)合域 (ECD)、ECD內(nèi)的二聚化域、跨膜域、胞內(nèi)蛋白質(zhì)酪氨酸激酶域（TKD)和C端磷酸化域組成。 這種膜結(jié)合蛋白質(zhì)具有在胞外域內(nèi)的調(diào)蛋白（HRG)結(jié)合域，但是沒有活性激酶域。因此，它 能結(jié)合這種配體但沒有經(jīng)由蛋白質(zhì)磷酸化將信號(hào)傳遞入細(xì)胞。然而，它確實(shí)與確實(shí)具有激 酶活性的其它ffiR家族成員形成異二聚體。異二聚化導(dǎo)致受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑激活及 其胞內(nèi)域轉(zhuǎn)磷酸化。ffiR家族成員之間的二聚體形成擴(kuò)充J1ER3的信號(hào)傳導(dǎo)潛力，而且不僅 是信號(hào)多樣化的手段而且是信號(hào)放大的手段。例如，J1ER2/HER3異二聚體經(jīng)PI3K和AKT途 徑誘導(dǎo)HER家族成員中最重要的促有絲分裂信號(hào)之一（51丨》1?)￥81^，]\0.6丨31.，]\13;[01. Chem. 269:14661-14665(1994) ；Alimandi, M. et al.,Oncogene. 10:1813-1821 (1995)； Hel Iyer, N. J. , J. Biol. Chem. 276: 42153-4261 (2001) ； Singer, E. , J. Biol. Chem. 276:44266-44274 (2001) ;Schaefer，K.L.，Neoplasia 8:613-622(2006))。關(guān)于 HER3 及其在HER受體家族和NGR配體家族內(nèi)的各種相互作用的概述參見例如Sithanandam, G. et al.，Cancer Gene Therapy 15:413-448(2008)。
[0005] 已經(jīng)在眾多癌癥中報(bào)告了這種基因的擴(kuò)增和/或其蛋白質(zhì)的過表達(dá)，包括前列 腺、膀胱、和乳腺腫瘤。已經(jīng)表征了編碼不同同等型的可變轉(zhuǎn)錄剪接變體。一種同等型缺乏 膜間區(qū)且分泌到細(xì)胞外。這種形式起調(diào)控膜結(jié)合形式的活性的作用。另外的剪接變體也已 有報(bào)告，但是它們尚未徹底表征。
[0006] 有趣的是，在其平衡狀態(tài)，HER3受體以其"閉合構(gòu)象"存在，這確實(shí)意味著HER3 發(fā)夾基序的異二聚化經(jīng)非共價(jià)相互作用系留至ffiR3 E⑶域IV(見圖lc和Id)。假 定"閉合"HER3構(gòu)象能經(jīng)配體調(diào)蛋白在特定HER3調(diào)蛋白結(jié)合位點(diǎn)處的結(jié)合而開放。這 發(fā)生于由HER3 E⑶域I和域III形成的HER3界面。通過這種相互作用，認(rèn)為HER3受 體活化并轉(zhuǎn)變成它的"開放構(gòu)象"（見圖le和lb和例如Baselga, J. et al.，Nat. Rev. Cancer 9:463-475(2009)和 Desbois_Mouthon，C.et al.，Gastroenterol Clin Biol 34:255-259(2010))。在這種開放構(gòu)象中，與HER2的異二聚化和轉(zhuǎn)信號(hào)誘導(dǎo)是可能的（見 圖 lb)。
[0007] W0 2003/013602 涉及 HER 活性的抑制劑，包括 HER 抗體。W02007/077028 和 TO 2008/100624 也涉及 HER3 抗體。W0 97/35885 和 W02010/127181 涉及 HER3 抗體。
[0008] 人HER4(也稱作ErbB-4、ERBB4、v-erb-a、成紅細(xì)胞白血病病毒癌基因同系物 4、pl80erbB4、鳥類成紅細(xì)胞白血病病毒（v-erb-b2)癌基因同系物4;SEQ ID N0:5)是 I型單次跨膜蛋白質(zhì)，具有多個(gè)弗林蛋白酶樣富含半胱氨酸域、酪氨酸激酶域、磷脂酰肌 醇-3 激酶結(jié)合位點(diǎn)和 PDZ 域結(jié)合基序（Plowman, G.D.et al.，PNAS 90:1746-50(1993); Zimon j ic, D. B. et al.,Oncogene 10:1235-7 (1995) ；Culouscou, J. M. et al.,J. Biol. Chem. 268:18407-10 (1993))。該蛋白質(zhì)結(jié)合神經(jīng)調(diào)蛋白-2和-3、肝素結(jié)合性EGF樣生長因 子和0細(xì)胞素并被它們活化。配體結(jié)合誘導(dǎo)多種細(xì)胞應(yīng)答，包括有絲分裂和分化。多種蛋 白水解事件容許胞質(zhì)片段和胞外片段釋放。已經(jīng)將這種基因中的突變與癌癥關(guān)聯(lián)起來。編 碼不同蛋白質(zhì)同等型的可變剪接變體已有記載；然而，并非所有變體均已完全表征。
[0009] 用于抗癌療法的抗冊1?4抗體是已知的，例如來自舊5,811，098，舊7,332,579或 Hollm6n，M.et al.，0ncogene. 28:1309-19(2009)(抗 ErbB-4 抗體 mAb 1479)〇
[0010] 至今不可能選擇特異性結(jié)合HER3 0-發(fā)夾和/或HER4 0-發(fā)夾的抗原結(jié)合蛋白 (像例如抗體），因?yàn)檫@些J1ER3或HER4 0 -發(fā)夾均呈遞隱藏的表位，在這些受體處于平衡 狀態(tài)時(shí)不可及（見圖1)。
[0011] 發(fā)明概述
[0012] 我們現(xiàn)在已經(jīng)找到了一種使用在SlyD支架（見例如圖2,和SEQ ID N0:13和17 至24的多肽）內(nèi)以三維取向功能性呈遞的HER3和HER4 0 -發(fā)夾來獲得此類抗原結(jié)合蛋 白（特別是抗體）的方法。
[0013] 本發(fā)明提供一種用于選擇結(jié)合人HER3且結(jié)合人HER4的抗原結(jié)合蛋 白（特別是抗體）的方法，其中該抗原結(jié)合蛋白（特別是抗體）在人ffiR3的氨 基酸序列PQPLVYNKLTFQLEPNPHT(SEQ ID NO: 1)內(nèi)結(jié)合且在人HER4的氨基酸序列 PQTFVYNPITFQLEHNFNA(SEQ ID N0:2)內(nèi)結(jié)合，
[0014] 其中使用
[0015] a)至少一種選自下組的包含氨基酸序列SEQ ID NO: 1的多肽：
[0016] SEQ ID N0:13 TtSlyD-FKBP-Her3，
[0017] SEQ ID NO:17 TtSlyDcas-Her3,
[0018] SEQ ID NO:18 TtSlyDcys-Her3,
[0019] SEQ ID N0:19 TgSlyDser_Her3,和
[0020] SEQ ID NO:20 TgSlyDcys-Her3
[0021] 和
[0022] b)至少一種選自下組的包含該氨基酸序列SEQ ID NO:2的多肽：
[0023] SEQ ID NO:21 TtSlyDcas-Her4,
[0024] SEQ ID NO:22 TtSlyDcys-Her4,
[0025] SEQ ID N0:23 TgSlyDser_Her4,和
[0026] SEQ ID NO:24 TgSlyDcys-Her4
[0027] 來選擇顯示結(jié)合a)下的至少一種多肽和b)下的至少一種多肽二者的抗原結(jié)合蛋 白（特別是抗體），
[0028] 并由此選擇在氨基酸序列PQPLVYNKLTFQLEPNPHT(SEQ ID N0:1)內(nèi)且在氨基酸序 列PQTFVYNPTTFQLEHNFNA(SEQ ID N0:2)內(nèi)結(jié)合的抗原結(jié)合蛋白（特別是抗體）。
[0029] 本發(fā)明提供通過此類選擇方法獲得的抗原結(jié)合蛋白（特別是抗體）。
[0030] 本發(fā)明提供一種分離的結(jié)合人HER3且結(jié)合人HER4的抗原結(jié)合蛋 白（特別是抗體），其中該抗原結(jié)合蛋白（特別是抗體）在人ffiR3的氨基 酸序列PQPLVYNKLTFQLEPNPHT(SEQ ID N0:1)內(nèi)且在人HER4的氨基酸序列 PQTFVYNPITFQLEHNFNA(SEQ ID N0:2)內(nèi)結(jié)合。
[0031] 本發(fā)明提供一種分離的結(jié)合人HER3且結(jié)合人HER4的抗原結(jié)合蛋白，
[0032] a)其中該抗原結(jié)合蛋白結(jié)合多肽SEQ ID N0:18TtSlyDcys-Her3,且
[0033] b)其中該抗原結(jié)合蛋白結(jié)合多肽SEQ ID N0:22TtSlyDcys-Her4。
[0034] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種分離的結(jié)合人HER3且結(jié)合人HER4的抗原結(jié)合蛋白，
[0035] a)其中該抗原結(jié)合蛋白在多肽SEQ ID N0:18(TtSlyDCyS-Her3)中包含的氨基酸 序列 PQPLVYNKLTFQLEPNPHT(SEQ ID N0:1)內(nèi)結(jié)合，且
[0036] b)其中該抗原結(jié)合蛋白在多肽SEQ ID N0:22(TtSlyDCyS-Her4)中包含的氨基酸 序列 PQTFVYNPITFQLEHNFNA(SEQ ID N0:2)內(nèi)結(jié)合。
[0037] 本發(fā)明提供一種分離的結(jié)合人HER3且結(jié)合人HER4的抗體，
[0038] a)其中該抗體結(jié)合多肽 SEQ ID N0:18TtSlyDcys-Her3,且
[0039] b)其中該抗體結(jié)合多肽 SEQ ID N0:22TtSlyDcys_Her4。
[0040] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種分離的結(jié)合人HER3且結(jié)合人HER4的抗體，
[0041] a)其中該抗體在多肽SEQ ID N0:18(TtSlyDcys_Her3)中包含的氨基酸序列 PQPLVYNKLTFQLEPNPHT(SEQ ID N0:1)內(nèi)結(jié)合，且
[0042] b)其中該抗體在多肽SEQ ID N0:22(TtSlyDcys-Her4)中包含的氨基酸序列 PQTFVYNPITFQLEHNFNA(SEQ ID N0:2)內(nèi)結(jié)合。
[0043] 本發(fā)明提供一種分離的結(jié)合人HER3且結(jié)合人HER4的抗體，其中該抗體
[0044] a)結(jié)合氨基酸序列SEQ ID NO: 1 ;和/或
[0045] b)結(jié)合活化的HER3中的氨基酸序列SEQ ID NO: 1 ;和/或
[0046] c)在選自下組的多肽中包含的氨基酸序列PQPLVYNKLTFQLEPNPHT(SEQ ID N0:1) 內(nèi)結(jié)合：
[0047] SEQ ID N0:13 TtSlyD-FKBP_Her3，
[0048] SEQ ID NO:17 TtSlyDcas-Her3,
[0049] SEQ ID NO:18 TtSlyDcys-Her3,
[0050] SEQ ID N0:19 TgSlyDser-Her3,和
[0051] SEQ ID N0:20 TgSlyDcys_Her3 ;和 / 或
[0052] d)結(jié)合HER3的0 -發(fā)夾區(qū)；和/或
[0053] e)抑制HER3/HER2異二聚體的異二聚化；和/或
[0054] f)以4.0或更高的在調(diào)蛋白存在下（Ka(+調(diào)蛋白））和在調(diào)蛋白缺失下（Ka(_調(diào) 蛋白））的結(jié)合常數(shù)（Ka)之比（Ka(+調(diào)蛋白）/Ka(-調(diào)蛋白））結(jié)合HER3-ECD;和/或
[0055] g)以2.0或更高的在調(diào)蛋白存在下（MR(+調(diào)蛋白））和在調(diào)蛋白缺失下（MR(-調(diào) 蛋白））的結(jié)合摩爾比（MR)之比（MR(+調(diào)蛋白）/MR(-調(diào)蛋白））結(jié)合HER3-ECD ;和/或
[0056] h)特異性結(jié)合氨基酸序列SEQ ID N0:2 ;和/或
[0057] i)結(jié)合活化的HER4中的氨基酸序列SEQ ID N0:2 ;和/或
[0058] j)在選自下組的多肽中包含的氨基酸序列PQTFVYNPTTFQLEHNFNA(SEQ ID N0:2) 內(nèi)結(jié)合：
[0059] SEQ ID NO:21 TtSlyDcas-Her4,
[0060] SEQ ID NO:22 TtSlyDcys-Her4,
[0061] SEQ ID N0:23 TgSlyDser-Her4,和
[0062] SEQ ID N0:24 TgSlyDcys_Her4 ;和 / 或
[0063] k)結(jié)合HEIM的0 -發(fā)夾區(qū)；和/或
[0064] 1)以20. 0或更高的在調(diào)蛋白存在下（Ka(+調(diào)蛋白））和在調(diào)蛋白缺失下（Ka(_調(diào) 蛋白））的結(jié)合常數(shù)（Ka)之比（Ka(+調(diào)蛋白）/Ka(-調(diào)蛋白））結(jié)合HER4-ECD;和/或
[0065] m)以5. 0或更高的在調(diào)蛋白存在下（MR(+調(diào)蛋白））和在調(diào)蛋白缺失下（MR(_調(diào) 蛋白））的結(jié)合摩爾比（MR)之比（MR(+調(diào)蛋白）/MR(-調(diào)蛋白））結(jié)合HER4-ECD ;和/或 [0066] n)作為單價(jià)Fab片段顯示與其二價(jià)親本全長抗體相比相同或更高的生物學(xué)活性； 和/或
[0067] 〇)在MCF-7細(xì)胞中抑制HER3磷酸化；和/或
[0068] p)不與調(diào)蛋白競爭對(duì)HER3的結(jié)合/誘導(dǎo)調(diào)蛋白結(jié)合HER3 ;和/或
[0069] q)抑制MDA-MB-175腫瘤細(xì)胞繁殖；和/或
[0070] r)在體內(nèi)顯示腫瘤生長抑制活性；和/或
[0071] s)以KD值彡lx 1(T8M(在一個(gè)實(shí)施方案中，KD值為lx 1(T8M至lx 1(T13 M ;在一 個(gè)實(shí)施方案中，KD值為lx 10_9M至lx 10_13M)的親和力結(jié)合HER3-ECD ;和/或
[0072] t)以KD值彡lx 1(T8M(在一個(gè)實(shí)施方案中，KD值為lx 1(T8M至lx 1(T13M;在一個(gè) 實(shí)施方案中，KD值為lx 10_9M至lx 10_13M)的親和力結(jié)合HER4-ECD ;和/或
[0073] u)結(jié)合由 VYNKLTFQLEP (SEQ ID N0:43)組成的多肽和由 VYNPITFQLE (SEQ ID NO:44)組成的多肽；和/或
[0074] v)結(jié)合由 VYNKLTFQLEP (SEQ ID N0:43)組成的多肽；和 / 或
[0075] w)結(jié)合由 VYNPITFQLE (SEQ ID N0:44)組成的多肽；和 / 或
[0076] x)在FACS測定法中結(jié)合表達(dá)HER3的T47D細(xì)胞；且其中在抗體暴露后1小時(shí)后 測量時(shí)，該抗體誘導(dǎo)與在調(diào)蛋白存在下J1ER3的內(nèi)在化百分比相比高至少25%的在調(diào)蛋白 存在下HER3的內(nèi)在化百分比。
[0077] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體為單克隆抗體。
[0078] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體為人抗體、人源化抗體、或嵌合抗體。
[0079] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體為結(jié)合人HER3且結(jié)合人HER4的抗體 片段。
[0080] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含：(a)包含氨基酸序列SEQ ID N0:25的HVR-H1 ; (b)包含氨基酸序列SEQ ID N0:26的HVR-H2 ;和（c)包含氨基酸序列SEQ ID N0:27 的 HVR-H3。
[0081] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含：(a)包含氨基酸序列SEQ ID N0:28的HVR-L1 ; (b)包含氨基酸序列SEQ ID N0:29的HVR-L2 ;和（c)包含氨基酸序列SEQ ID N0:30 的 HVR-L3。
[0082] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含：
[0083] i) (a)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:25 的 HVR-H1 ;
[0084] (b)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:26 的 HVR-H2 ;
[0085] (c)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:27 的 HVR-H3 ;
[0086] (d)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:28 的 HVR-L1 ;
[0087] (e)包含氨基酸序列SEQ ID N0:29的HVR-L2 ;和
[0088] (f)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:30 的 HVR-L3 ;
[0089] 或
[0090] ii) i) (a)、（b)、（d)和/或（e)下的抗體HVR的人源化變體。
[0091] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含：
[0092] i) (a)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:38 的 HVR-H1 ;
[0093] (b)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:39 的 HVR-H2 ;
[0094] (c)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:27 的 HVR-H3 ;
[0095] (d)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:40 的 HVR-L1 ;
[0096] (e)包含氨基酸序列SEQ ID N0:41的HVR-L2 ;和
[0097] (f)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:30 的 HVR-L3 ;
[0098] 或
[0099] ii) (a)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:38 的 HVR-H1 ;
[0100] (b)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:39 的 HVR-H2 ;
[0101] (c)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:27 的 HVR-H3 ;
[0102] (d)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:40 的 HVR-L1 ;
[0103] (e)包含氨基酸序列SEQ ID N0:42的HVR-L2 ;和
[0104] (f)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:30 的 HVR-L3 ;
[0105] 或
[0106] iii) (a)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:25 的 HVR-H1 ;
[0107] (b)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:39 的 HVR-H2 ;
[0108] (c)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:27 的 HVR-H3 ;
[0109] (d)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:40 的 HVR-L1 ;
[0110] (e)包含氨基酸序列SEQ ID N0:41的HVR-L2 ;和
[0111] (f)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:30 的 HVR-L3 ;
[0112] 或
[0113] iv) (a)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:25 的 HVR-H1 ;
[0114] (b)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:39 的 HVR-H2 ;
[0115] (c)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:27 的 HVR-H3 ;
[0116] (d)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:40 的 HVR-L1 ;
[0117] (e)包含氨基酸序列SEQ ID N0:42的HVR-L2 ;和
[0118] (f)包含氨基酸序列 SEQ ID N0:30 的 HVR-L3。
[0119] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含（a)與氨基酸序列SEQ ID NO: 33 具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與氨基酸序列SEQ ID NO: 36具有至少95%序 列同一性的VL序列；或（c) (a)中的VH序列和（b)中的VL序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類 抗HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID N0:33。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體 包含VL序列SEQ ID N0:36。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID N0:33 和 VL 序列 SEQ ID N0:36。
[0120] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含（a)與氨基酸序列SEQ ID NO: 33 具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與氨基酸序列SEQ ID N0:37具有至少95%序列 同一性的VL序列；或（c) (a)中的VH序列和（b)中的VL序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗 HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID N0:33。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包 含VL序列SEQ ID N0:37。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID N0:33 和 VL 序列 SEQSEQ ID N0:37。
[0121] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含（a)與氨基酸序列SEQ ID NO: 34 具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與氨基酸序列SEQ ID N0:36具有至少95%序列 同一性的VL序列；或（c) (a)中的VH序列和（b)中的VL序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗 HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID N0:34。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包 含VL序列SEQ ID N0:36。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID NO: 34 和 VL 序列 SEQSEQ ID NO: 36。
[0122] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含（a)與氨基酸序列SEQ ID NO: 34 具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與氨基酸序列SEQ ID N0:37具有至少95%序列 同一性的VL序列；或（c) (a)中的VH序列和（b)中的VL序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗 HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID N0:34。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包 含VL序列SEQ ID N0:37。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID NO: 34 和 VL 序列 SEQSEQ ID NO: 37。
[0123] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含（a)與氨基酸序列SEQ ID NO: 35 具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與氨基酸序列SEQ ID N0:36具有至少95%序列 同一性的VL序列；或（c) (a)中的VH序列和（b)中的VL序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗 HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID N0:35。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包 含￥1序列3￡〇10勵(lì):36。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗冊1?3/冊1?4抗體包含￥11序列3￡〇10 N0:35 和 VL 序列 SEQSEQ ID N0:36。
[0124] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含（a)與氨基酸序列SEQ ID NO: 35 具有至少95%序列同一性的VH序列；(b)與氨基酸序列SEQ ID N0:37具有至少95%序列 同一性的VL序列；或（c) (a)中的VH序列和（b)中的VL序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗 HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID N0:35。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包 含VL序列SEQ ID N0:37。在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體包含VH序列SEQ ID NO: 35 和 VL 序列 SEQSEQ ID NO: 37。
[0125] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體為全長IgGl抗體或IgG4抗體。
[0126] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類抗HER3/HER4抗體為Fab片段。
[0127] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種分離的核酸，其編碼此類抗HER3/HER4抗體。
[0128] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種宿主細(xì)胞，其包含此類核酸。
[0129] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種生成抗體的方法，其包括培養(yǎng)此類宿主細(xì)胞使得該抗體生 成。
[0130] 在一個(gè)實(shí)施方案中，此類方法進(jìn)一步包括自該宿主細(xì)胞回收該抗體。
[0131] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種免疫綴合物，其包含此類抗HER3/HER4抗體和細(xì)胞毒劑。
[0132] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種藥物配制劑，其包含此類抗HER3/HER4抗體和藥學(xué)可接受 載劑。
[0133] 本發(fā)明進(jìn)一步提供本文中描述的抗HER3/HER4抗體，其用作藥物。本發(fā)明進(jìn)一 步提供本文中描述的抗J1ER3/HER4抗體或包含該抗HER3/HER4抗體和細(xì)胞毒劑的免疫綴 合物，其用于治療癌癥。本發(fā)明進(jìn)一步提供本文中描述的抗J1ER3/HER4抗體，其用于抑制 HER3/HER2 二聚化
[0134] 本發(fā)明進(jìn)一步提供此類抗HER3/HER4抗體或包含該抗HER3/HER4抗體和細(xì)胞毒劑 的免疫綴合物在制造藥物中的用途。本發(fā)明進(jìn)一步提供此類用途，其中該藥物用于治療癌 癥。本發(fā)明進(jìn)一步提供此類用途，其中該藥物用于抑制J1ER3/HER2二聚化。
[0135] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種治療具有癌癥的個(gè)體的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量 的本文中描述的抗HER3/HER4抗體或包含該抗HER3/HER4抗體和細(xì)胞毒劑的免疫綴合物。
[0136] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種在罹患癌癥的個(gè)體中誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡的方法，其包括對(duì)該 個(gè)體施用有效量的包含本文中描述的抗HER3/HER4抗體和細(xì)胞毒