包含試劑。此類試劑包括但不限于免疫黏附分子、成像劑、治療劑和細(xì)胞毒藥 劑。優(yōu)選的成像劑包括但不限于放射性標(biāo)記、酶、熒光標(biāo)記、發(fā)光標(biāo)記、生物發(fā)光標(biāo)記、磁性 標(biāo)記和生物素。優(yōu)選的放射性標(biāo)記包括但不限于 3H、14C、35S、9°Y、99Tc、 mIn、125I、mI、mLu、 166Ho和 153Sm。優(yōu)選的治療劑或細(xì)胞毒藥劑包括但不限于抗代謝藥、烷基化劑、抗生素、生長 因子、細(xì)胞因子、抗血管生成藥、抗有絲分裂藥、蒽環(huán)霉素（anthracycline)、毒素和凋亡劑。
[0074] 本發(fā)明也提供包含抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合人 IL-I β，并且所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如下文定義的6個⑶R，即，⑶R-H1、⑶R-H2、⑶R-H3、 CDR-Ll、CDR-L2 和 CDR-L3 :
[0075] CDR-Hl =X1-Y-D-M-S (SEQ ID NO : 190)，其中：
[0076] X#S、K 或 R;
[0077] CDR-H2 :Y-X2-S-X4-G-G-X7-G-T-Y-Y-P-D-X 14-X15-K-G (SEQ ID NO : 191)，
[0078] 其中：
[0079] 父2是 I 或 V ;
[0080] X4是 S 或 H ;
[0081] X7是 G 或 A ;
[0082] 父14是T或S ;和
[0083] 父15是 V 或 A ;
[0084] CDR-H3 K-G-V-X4-K-G-X7-F-D-X1JSEQ ID NO : 192)，其中：
[0085] X4是 T 或 Y ;
[0086] X7是 Y 或 C ;和
[0087] Xltl是 V、E、L、M、Q或 Y ;
[0088] CDR-Ll =R-A-S-G-N-I-X7-X8-X9-L-X11 (SEQ ID NO : 193)，其中：
[0089] X7是 H、Y 或 W ;
[0090] X；^N、G、T、Q、E、H、D 或K;
[0091] X9是 Y 或 W ;和
[0092] XigT、A或N;
[0093] CDR-L2 =X1-A-K-X4-L-X6-X7 (SEQ ID NO : 194)，其中：
[0094] N、Q 或 D ;
[0095] X4是 T、N、I、E 或 S ;
[0096] X6是 A、M 或 E;和
[0097] X7是 D、E、S 或A;
[0098] 和
[0099] CDR-L3 =Q-X2-F-W-X5-X6-P-X8-X 9 (SEQ ID NO : 195)，其中：
[0100] X^H 或 Q ;
[0101] 父5是 S、N、T、K、R或M ;
[0102] 父6是1 或L;
[0103] 乂8是丫或六；和
[0104] 父9是1\1 和N;
[0105] 除了當(dāng) CDR-Hl 是 S-Y-D-M-S(SEQ ID NO : 17)時，則：
[0106] CDR-H2 不能是 Y-I-S-S-G-G-G-G-T-Y-Y-P-D-T-V-K-G (SEQ ID NO : 18);
[0107] CDR-H3 不能是 G-G-V-T-K-G-Y-F-D-V (SEQ ID NO : 19);
[0108] CDR-Ll 不能是 R-A-S-G-N-I-H-N-Y-L-T (SEQ ID NO :20);
[0109] CDR-L2 不能是 N-A-K-T-L-A-D (SEQ ID NO :21);和
[0110] CDR-L3 不能是 Q-H-F-W-S-I-P-Y-T (SEQ ID NO :22)。
[0111] 在一個實施方案中，上文描述的分離的結(jié)合蛋白包含至少一個⑶R，所述⑶R包含 選自以下的CDR序列的氨基酸序列：
[0112]
【主權(quán)項】
1. 包含抗原結(jié)合域的結(jié)合蛋白，所述結(jié)合蛋白能夠結(jié)合人IL-1 0，所述抗原結(jié)合域包 含如下文定義的 6 個 CDR :CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2 和 CDR-L3 : CDR-H1 A-Y-D-M-S (SEQ ID NO: 190)，其中： X#K 或R; CDR-H2:Y-X2-S-X4-G-G-X7-G-T-Y-Y-P-D-X 14-X15-K-G (SEQ IDNO: 191)，其中： 父2是I或V ; 父4是S或H ; 父7是G或A ; 父14是T或S ;和 父15是V或A ; CDR-H3:G-G-V-X4-K-G-X7-F-D-X10 (SEQ ID NO: 192)，其中： 父4是T或Y ; X7是Y或C ;和 Xi。是 V、E、L、M、Q 或 Y ; CDR-L1:R-A-S-G-N-I-X7-X8-X9-L-X n (SEQIDNO: 193)，其中： 父7是H、Y或W ; 乂8是隊6、1\〇、￡、11、0 或K ; \是￥或1;和 父11是1\八或1 CDR-I^A-A-K-XfL-Xe-XT(SEQIDNO: 194)，其中： X#N、Q或D ; X4是 T、N、I、E 或 S ; 父6是A、M或E ;和 父7是0、￡、3或A ; 和 CDR-L3:Q-X2-F-W-X5-X6-P-X 8-X9 (SEQ ID NO: 195)，其中： 父2是H或Q ; 父5是 S、N、T、K、R 或 M ; X6是I或L ; X#Y或A ;和 父9是T、I和N ; 除了 CDR-H2 不能是 Y-I-S-S-G-G-G-G-T-Y-Y-P-D-T-V-K-G (SEQ ID NO: 18); CDR-H3 不能是 G-G-V-T-K-G-Y-F-D-V (SEQ ID NO: 19); CDR-L1 不能是 R-A-S-G-N-I-H-N-Y-L-T (SEQ ID NO: 20); CDR-L2 不能是 N-A-K-T-L-A-D (SEQ ID NO: 21);和 CDR-L3 不能是 Q-H-F-W-S-I-P-Y-T (SEQ ID NO: 22)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合蛋白，其包含⑶R-Hl、⑶R-H2、⑶R-H3、⑶R-Ll、⑶R-L2、 和 CDR-L3 其中CDR-H1是選自以下的氨基酸 SEQ ID NO:60 的殘基 31-35 ; SEQ ID NO:61 的殘基 31-35 ; SEQ ID NO: 114 的殘基 31-35 ;和 SEQ ID NO: 117 的殘基 31-35 ; 其中CDR-H2是選自以下的氨基酸 SEQ ID NO:60 的殘基 50-66 ; SEQ ID NO:71 的殘基 50-66 ; SEQ ID NO: 105 的殘基 50-66 ; SEQ ID NO: 113 的殘基 50-66 ; SEQ ID NO: 123 的殘基 50-66 ; SEQ ID NO: 131 的殘基 50-66 ;和 SEQ ID NO: 133 的殘基 50-66 ; 其中CDR-H3是選自以下的氨基酸 SEQ ID N0:60 的殘基 99-108 (CDR-H3); SEQ ID N0:61 的殘基 99-108 (CDR-H3); SEQ ID N0:64 的殘基 99-108 (CDR-H3); 5￡0 10勵:78的殘基 99-108(〇?-113); SEQ ID N0:87 的殘基 99-108 (CDR-H3); SEQ ID N0:92 的殘基 99-108 (CDR-H3); 5￡0 10勵：104的殘基 99-108(〇?-113);和 SEQ ID NO: 140 的殘基 99-108 (CDR-H3); 其中CDR-L1是選自以下的氨基酸 SEQ ID N0:59 的殘基 24-34 (CDR-L1); 5￡〇10勵：149的殘基 24-34 化01?-11); SEQIDN0:15(^^^S 24-34 (CDR-L1); SEQ ID N0:151 的殘基 24-34 (CDR-L1); 5￡〇10勵：153的殘基 24-34 化01?-11); 5￡〇10勵：156的殘基 24-34 化01?-11); 5￡〇10勵：159的殘基 24-34 化01?-11); 5￡〇10勵：164的殘基 24-34 化01?-11); 5￡〇10勵：167的殘基 24-34 化01?-11); 5￡〇10勵：174的殘基 24-34 化01?-11); 5￡0 10勵：179的殘基 24-34 (〇?-11);和 5￡〇10勵：188的殘基 24-34 化01?-11); 其中CDR-L2是選自以下的氨基酸 SEQ ID N0:59 的殘基 50-56 (CDR-L2); 5￡〇10勵：149的殘基5〇-56化01?-12); 5￡0 10勵：151的殘基 50-56(〇?-12); 5￡〇10勵：156的殘基5〇-56化01?-12); 5￡〇10勵：167的殘基5〇-56化01?-12); 5￡〇10勵：169的殘基5〇-56化01?-12); SEQ ID N0:171 的殘基 50-56 (CDR-L2); 5￡〇10勵：175的殘基5〇-56化01?-12); 5￡〇10勵：176的殘基5〇-56化01?-12); 5￡〇10勵：178的殘基5〇-56化01?-12); SEQIDN0:18(^^^S 50-56 (CDR-L2); SEQ ID NO:181 的殘基 50-56 (CDR-L2); 5￡0 10勵：185的殘基 50-56 (〇?-12);和 5￡0 10勵：187的殘基 50-56 (〇?-12);或 其中CDR-L3是選自以下的氨基酸 SEQ ID NO:59 的殘基 89-97 (CDR-L3); 5￡〇10勵：149的殘基 89-97 化01?-13); SEQIDNO:15(^^^S 89-97 (CDR-L3); SEQ ID NO:151 的殘基 89-97 (CDR-L3); 5￡〇10勵：155的殘基 89-97 化01?-13); SEQIDNO:16(^^^S 89-97 (CDR-L3); 5￡〇10勵：167的殘基 89-97 化01?-13); 5￡〇10勵：176的殘基 89-97 化01?-13); SEQ ID NO:181 的殘基 89-97 (CDR-L3); 5￡〇10勵：182的殘基 89-97 化01?-13); 5￡0 10勵：183的殘基 89-97 (〇?-13);和 SEQ ID NO: 188 的殘基 89-97 (CDR-L3)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合蛋白，其中至少三個CDR來自選自以下CDR集合的CDR 集合：
o
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的結(jié)合蛋白，其包含來自2個CDR集合的CDR，其中所述2個 ⑶R集合包含選自⑶R集合1-23的VH⑶R集合和選自⑶R集合24-56的VL⑶R集合。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1、2、4中任一項所述的結(jié)合蛋白，其還包含人接納體構(gòu)架。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架包含選自SEQ ID NO: 7-10、13-16、25、240-316 和 317-381 的氨基酸序列。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架包含至少一個構(gòu)架區(qū)氨基 酸置換，其中所述構(gòu)架的氨基酸序列與所述人接納體構(gòu)架的序列至少65%相同并且包含至 少70個與所述人接納體構(gòu)架相同的氨基酸殘基。
8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的結(jié)合蛋白，其中所述人接納體構(gòu)架在關(guān)鍵殘基處包含至少一 個構(gòu)架區(qū)氨基酸置換，所述關(guān)鍵殘基選自：與CDR毗鄰的殘基；糖基化位點殘基；稀有殘基； 能夠與人IL-1 0相互作用的殘基；能夠與⑶R相互作用的殘基；規(guī)范殘基；重鏈可變域和 輕鏈可變域之間的接觸殘基；Vernier區(qū)內(nèi)部的殘基；和在Chothia定義的可變重鏈⑶R1 和Kabat定義的第一重鏈構(gòu)架之間重疊的區(qū)域內(nèi)的殘基。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的結(jié)合蛋白，其中由Kabat編號的關(guān)鍵殘基選自：2H、4H、24H、 26H、27H、29H、34H、35H、37H、39H、44H、45H、47H、48H、49H、50H、51H、58H、59H、60H、63H、67H、 69H、71H、73H、76H、78H、91H、93H、94H、2L、4L、25L、29L、27bL、33L、34L、36L、38L、43L、44L、 46L、47L、48L、49L、55L、58L、62L、64L、71L、87L、89L、90L、91L、94L 和 95L。
10. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白包含共有人可變域。
【專利摘要】描述了結(jié)合IL-1α和IL-1β的IL-1結(jié)合蛋白以及它們在用于治療、預(yù)防及診斷IL-1相關(guān)性病癥和用于檢測細(xì)胞、組織、樣品及組合物中的IL-1α和IL-1β的組合物和方法中的用途。
【IPC分類】C07K16-24
【公開號】CN104804089
【申請?zhí)枴緾N201510187627
【發(fā)明人】C.吳, D.J.安布羅西, C.謝, T.哈于爾
【申請人】Abbvie 公司
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2011年5月13日
【公告號】CA2799046A1, CN103025758A, EP2571532A2, EP2571532A4, US8664367, US8841417, US20110280800, US20130195754, US20140099671, US20140205562, US20140212379, US20140212925, US20140220020, WO2011143562A2, WO2011143562A3