根細(xì)粉中,加水至含水量為50-60%,充分拌勻,放入培養(yǎng)盤中,壓實(shí)、覆蓋,于121°C滅菌60分鐘,于無(wú)菌室中接入活化后的XD-8黑曲霉,35°C溫箱中培養(yǎng)3-5天,45°C下烘干備用。
[0019]實(shí)施例1
[0020]稱取鮮葛根切塊(蠶豆大小)100公斤放入拌料池中,加輔料及20-30%的水后用拌料機(jī)拌料,在接入5%的菌曲后拌勻,用帶式輸送機(jī)輸送到發(fā)酵池中壓實(shí)、覆蓋,于25°C保溫發(fā)酵培養(yǎng),期間用翻料機(jī)進(jìn)行適當(dāng)翻料,5天后加水至料面,30°C保溫水解2天,將葛根及水解液一同裝入超聲提取罐中,在加水至葛根:水=I: 10,50-60°C超聲提取0.5h,粗濾,放出提取液,殘?jiān)诩铀粮鸶?水=1: 8,50-60°0超聲提取0.511,粗濾,提取液在經(jīng)板框細(xì)濾后上LX-80G大孔吸附樹脂柱,先經(jīng)水洗滌,在用75%乙醇洗脫,收集75%乙醇洗脫液,減壓濃縮至無(wú)醇味,在用水飽和正丁醇溶液萃取5次,萃取比為洗脫液:水飽和正丁醇溶液=5: 1,將正丁醇萃取液濃縮至小體積,用冰醋酸調(diào)節(jié)pH后在析晶罐中放置析晶,離心獲得葛根素結(jié)晶物,經(jīng)重結(jié)晶,烘干,得含量大于95%的葛根素產(chǎn)品200.36go
[0021]實(shí)施例2
[0022]稱取鮮葛根切塊(蠶豆大小)100公斤放入拌料池中,加輔料及20-30%的水后用拌料機(jī)拌料,在接入5%的菌曲后拌勻,用帶式輸送機(jī)輸送到發(fā)酵池中壓實(shí)、覆蓋,于35°C保溫發(fā)酵培養(yǎng),期間用翻料機(jī)進(jìn)行適當(dāng)翻料,3天后加水至料面,30°C保溫水解2天,將葛根及水解液一同裝入超聲提取罐中,在加水至葛根:水=I: 10,50-60°C超聲提取0.5h,粗濾,放出提取液,殘?jiān)诩铀粮鸶?水=1: 8,50-60°0超聲提取0.511,粗濾,提取液在經(jīng)板框細(xì)濾后上LX-80G大孔吸附樹脂柱,先經(jīng)水洗滌,在用75%乙醇洗脫,收集75%乙醇洗脫液,減壓濃縮至無(wú)醇味,在用水飽和正丁醇溶液萃取5次,萃取比為洗脫液:水飽和正丁醇溶液=5: 1,將正丁醇萃取液濃縮至小體積,用冰醋酸調(diào)節(jié)pH后在析晶罐中放置析晶,離心獲得葛根素結(jié)晶物,經(jīng)重結(jié)晶,烘干,得含量大于95%的葛根素產(chǎn)品208.22go
[0023]實(shí)施例3
[0024]稱取鮮葛根切塊(蠶豆大小)100公斤放入拌料池中,加輔料及20-30%的水后用拌料機(jī)拌料,在接入10%的菌曲后拌勻,用帶式輸送機(jī)輸送到發(fā)酵池中壓實(shí)、覆蓋,于25°C保溫發(fā)酵培養(yǎng),期間用翻料機(jī)進(jìn)行適當(dāng)翻料,5天后加水至料面,30°C保溫水解2天,將葛根及水解液一同裝入超聲提取罐中,在加水至葛根:水=I: 10,50-60°C超聲提取0.5h,粗濾,放出提取液,殘?jiān)诩铀粮鸶?水=1: 8,50-60°0超聲提取0.511,粗濾,提取液在經(jīng)板框細(xì)濾后上LX-80G大孔吸附樹脂柱,先經(jīng)水洗滌,在用75%乙醇洗脫,收集75%乙醇洗脫液,減壓濃縮至無(wú)醇味,在用水飽和正丁醇溶液萃取5次,萃取比為洗脫液:水飽和正丁醇溶液=5: 1,將正丁醇萃取液濃縮至小體積,用冰醋酸調(diào)節(jié)pH后在析晶罐中放置析晶,離心獲得葛根素結(jié)晶物,經(jīng)重結(jié)晶,烘干,得含量大于95%的葛根素產(chǎn)品204.19go
[0025]以上所述,僅為本發(fā)明較佳的【具體實(shí)施方式】,本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于此,任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi),可顯而易見(jiàn)地得到的技術(shù)方案的簡(jiǎn)單變化或等效替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種葛根素的生產(chǎn)方法,其特征在于,包括以下步驟:鮮葛根切塊放入拌料池中,加輔料:原料量2%葡萄糖,3-5%云河復(fù)合肥料SROl及20-30%的水后用拌料機(jī)拌料,在接入5-10%的曲種后拌勻,用帶式輸送機(jī)輸送到發(fā)酵池中壓實(shí)、覆蓋,于25-35?保溫發(fā)酵培養(yǎng),期間用翻料機(jī)進(jìn)行適當(dāng)翻料,3-5天后加水至料面,30°C保溫水解2天,將葛根及水解液一同裝入超聲提取罐中,在加水至葛根:水=I: 10,50-60°C超聲提取0.5h,粗濾,放出提取液,殘?jiān)诩铀粮鸶?水=I: 8,50-60°0超聲提取0.511,粗濾,提取液在經(jīng)板框細(xì)濾后上LX-80G大孔吸附樹脂柱,先經(jīng)水洗滌,在用75%乙醇洗脫,收集75%乙醇洗脫液,減壓濃縮至無(wú)醇味,在用水飽和正丁醇溶液萃取5次,萃取比為洗脫液:水飽和正丁醇溶液=.5: 1,將正丁醇萃取液濃縮至小體積,用冰醋酸調(diào)節(jié)pH后在析晶罐中放置析晶,離心獲得葛根素結(jié)晶物,經(jīng)重結(jié)晶,烘干。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葛根素的生產(chǎn)方法,其特征在于,所述的菌曲用黑曲霉XD-8制備,所述黑曲霉XD-8為西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院西北植物資源利用研發(fā)中心專為鮮葛根細(xì)粉發(fā)酵水解篩選的菌種; XD-8黑曲霉母種擴(kuò)繁方法:用馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基;配制方法如下:稱取去皮馬鈴薯200g,切成Icm3小塊,加水1000ml,煮沸30分鐘,用四層紗布濾去馬鈴薯塊,將濾液補(bǔ)足至100ml,加瓊脂15g溶化,然后再加葡萄糖20g攪勻溶解,將培養(yǎng)基分裝于6個(gè)250ml三角瓶中,121 °C滅菌30分鐘;取一瓶培養(yǎng)基,融化倒10支試管,每支1ml左右,121 °C滅菌.30分鐘后鋪成斜面,其余5瓶低溫保存待用;試管斜面冷卻后,在無(wú)菌室中轉(zhuǎn)接X(jué)D-6黑曲霉,于30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天;菌種經(jīng)轉(zhuǎn)接后找其菌絲健壯,孢子顏色數(shù)量正常,即可直接用于實(shí)際生產(chǎn); XD-8黑曲霉菌曲制作:取干葛根量2 %葡萄糖,5 %云河復(fù)合肥料,用水溶解,拌入含.10%麩皮的葛根細(xì)粉中,加水至含水量為50-60%,充分拌勻,放入培養(yǎng)盤中,壓實(shí)、覆蓋,于.121 °C滅菌60分鐘,于無(wú)菌室中接入活化后的XD-8黑曲霉,35 °C溫箱中培養(yǎng)3_5天,45 °C下烘干備用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種葛根素的生產(chǎn)方法,鮮葛根切塊放入拌料池中,加輔料及20-30%的水后用拌料機(jī)拌料,在接入5-10%的菌曲后拌勻,用帶式輸送機(jī)輸送到發(fā)酵池中壓實(shí)、覆蓋,于25-35℃保溫發(fā)酵培養(yǎng),3-5天后加水至料面,30℃保溫水解2天,將葛根及水解液一同裝入超聲提取罐中,在加水,50-60℃超聲提取,粗濾,放出提取液,殘?jiān)诩铀?0-60℃超聲提取0.5h,粗濾,提取液在經(jīng)板框細(xì)濾后上LX-80G大孔吸附樹脂柱,用冰醋酸調(diào)節(jié)pH后在析晶罐中放置析晶,離心獲得葛根素結(jié)晶物,經(jīng)重結(jié)晶,烘干;本發(fā)明具有染菌率低、發(fā)酵成本低、水解效率高的優(yōu)點(diǎn),適合推廣應(yīng)用。
【IPC分類】C07D407-04
【公開號(hào)】CN104844583
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510135922
【發(fā)明人】李多偉, 甘全明, 劉艷琴
【申請(qǐng)人】陜西鑫茂生物科技有限公司
【公開日】2015年8月19日
【申請(qǐng)日】2015年3月25日