一種副干酪乳桿菌及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，更具體的說是涉及一種副干酪乳桿菌及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，免疫癥狀諸如過敏、氣喘、慢性鼻炎、異位性皮膚炎（atopic dermatitis)或 是發(fā)炎癥狀在發(fā)展中國家或發(fā)達(dá)國家有越來越普及的趨勢(shì)。最常使用的治療方法是口服或 涂抹類固醇，然而其缺點(diǎn)是容易產(chǎn)生副作用例如使病人變胖或增加感染率，甚至有致死的 風(fēng)險(xiǎn)。許多研宄團(tuán)隊(duì)正在開發(fā)更安全的方法，盡可能在減少副作用的前提下，舒緩或是預(yù)防 過敏和免疫疾病。
[0003] 目前普遍已知乳酸桿菌（Lactobacillus spp.)是一群生活在機(jī)體內(nèi)益于宿主健 康的微生物，它維護(hù)人體健康和調(diào)節(jié)免疫功能的作用已被廣泛認(rèn)可。乳酸桿菌屬的特定菌 株已被發(fā)現(xiàn)能夠定殖于腸道粘膜，并協(xié)助維持人類和動(dòng)物的健康，例如抗發(fā)炎活性和免疫 調(diào)節(jié)活性。熱滅活的干酪乳酸桿菌（Lactobacillus casei)代田株（strain Shirota) (LcS) 刺激IL-12的分泌，使免疫反應(yīng)朝向Thl為主狀態(tài)，藉以抑制IgE之產(chǎn)生。將熱致死嗜酸乳 桿菌（Lactobacillus acidophilus)L-55 口服給予經(jīng)卵清蛋白（簡(jiǎn)稱0VA)致敏的BALB/c 小鼠，結(jié)果顯示可抑制由OVA誘導(dǎo)之鼻部癥狀，如打噴嚏及揉鼻。
[0004] 目前的健康產(chǎn)業(yè)努力嘗試開發(fā)新穎可食用且具有特殊功效的乳酸菌種。乳酸桿菌 已有很長的食用歷史，屬于公認(rèn)安全（Generally Regarded as Safe, G.R.A.S)的菌屬，在 適當(dāng)條件培養(yǎng)下通常能產(chǎn)生良好的風(fēng)味，有些菌株甚至能表現(xiàn)出絕佳的產(chǎn)酸能力以及優(yōu)異 的免疫調(diào)節(jié)功效，大幅提升產(chǎn)品價(jià)值。如干酪乳酸桿菌代田株，其是著名乳酸菌飲料養(yǎng)樂多 中采用的一種乳酸桿菌，雖然其具有一定的產(chǎn)酸能力、免疫調(diào)節(jié)功能和抗發(fā)炎活性等，但是 由于不同菌株的特性與能力，乳酸桿菌的效果是可變且不可預(yù)期的。因此，仍有必要發(fā)展在 產(chǎn)酸能力、免疫調(diào)節(jié)功能和抗發(fā)炎活性等方面更加優(yōu)異的乳酸菌。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種副干酪乳桿菌，使得所述副干酪乳桿菌具 有更加優(yōu)異的產(chǎn)酸能力。
[0006] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種副干酪乳桿菌，使得所述副干酪乳桿菌具有更 加優(yōu)異的消化道存活能力，即提高其抗酸和抗膽鹽能力。
[0007] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種副干酪乳桿菌，使得所述副干酪乳桿菌具有更 加優(yōu)異的分泌胞外多糖的能力。
[0008] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種副干酪乳桿菌，使得所述副干酪乳桿菌具有更 加優(yōu)異的抑制過敏和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的能力。
[0009] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種副干酪乳桿菌，使得所述副干酪乳桿菌具有更 加優(yōu)異的抗發(fā)炎能力。
[0010] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供所述副干酪乳桿菌在乳制品制備、保健品制備、藥 物制備、食品補(bǔ)充劑制備、食品制備中的應(yīng)用。
[0011] 為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明提供一種分離自臺(tái)灣孩童之糞便的副干酪乳桿菌，命 名為菌株為V0151。V0151以MRS培養(yǎng)基于37°C下培養(yǎng)一天后，抽取其基因組DNA，并利用 16s rDNA和pheS引物對(duì)于該基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并利用美國國家生物技術(shù)信息中心 (National Center for Biotechnology Information,簡(jiǎn)稱NCBI)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行菌株比對(duì)，經(jīng) 過比對(duì)鑒定為副干酪乳桿菌副干酪亞種（Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)， V0151 的 pheS 序列如 SEQ ID NO: 1 所示。
[0012] V0151于2013年6月27日寄存德國微生物及細(xì)胞保存中心（German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)，寄存編號(hào)為 DSM27448。于 2014 年 03 月 07 日寄 存中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院 3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研宄所，保藏編號(hào)為CGMCC No. 8903。
[0013] 作為優(yōu)選，所述副干酪乳桿菌V0151經(jīng)熱去活化，為滅活菌。
[0014] 相比現(xiàn)有產(chǎn)品養(yǎng)樂多中的干酪乳酸桿菌代田株，本發(fā)明所述副干酪乳桿菌V0151 具有更加優(yōu)異的產(chǎn)酸能力、抗酸和膽鹽能力、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)能留、抑制過敏和發(fā)炎癥狀的能 力?；诖?，本發(fā)明提供了所述副干酪乳桿菌V0151在制備食品、保健品、藥品、食品補(bǔ)充劑 中的應(yīng)用，特別是在制備具有抑制過敏、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)和抗發(fā)炎功效的食品、保健品、藥品、 食品補(bǔ)充劑中。其中，所述食品優(yōu)選為乳制品，更優(yōu)選為功能性酸奶和乳酸菌飲料。
[0015] 作為優(yōu)選，所述免疫反應(yīng)為與 IFN-γ、IL-I β、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12、 IL-13、TNF- α、一氧化氮合成酶、環(huán)氧合酶-2及其組合相關(guān)的免疫反應(yīng)。
[0016] 作為優(yōu)選，所述過敏為與IL-4、IL-5、IL-12、IL-13及其組合相關(guān)的過敏。進(jìn)一步 優(yōu)選地，所述過敏為可以引發(fā)如下炎癥反應(yīng)的過敏：
[0017] 氣管反應(yīng)過度、氣管反應(yīng)發(fā)炎、異位性皮膚炎、過敏結(jié)膜炎、過敏性鼻炎、過敏性肺 炎、外因性過敏性肺泡炎、蕁麻瘆、血管性水腫、花粉熱、食物過敏或氣喘。
[0018] 作為優(yōu)選，所述發(fā)炎為與IFN-γ、IL-I β、IL-6、IL-KKTNF-α、一氧化氮合成酶、 環(huán)氧合酶-2及其組合相關(guān)的發(fā)炎。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述發(fā)炎為氣管反應(yīng)過度、氣管反應(yīng)發(fā) 炎、異位性皮膚炎、過敏結(jié)膜炎、過敏性鼻炎、過敏性肺炎、外因性過敏性肺泡炎、蕁麻瘆、血 管性水腫、花粉熱、食物過敏或氣喘。
[0019] 根據(jù)上述副干酪乳桿菌V0151的應(yīng)用，本發(fā)明提供一種食品，以保藏編號(hào)為CGMCC No. 8903的菌株進(jìn)行制備。進(jìn)一步優(yōu)選地、所述食品為乳制品；更優(yōu)選地，所述乳制品為功 能性酸奶和乳酸菌飲料。
[0020] 此外，本發(fā)明還提供一種乳酸菌組合物，包含保藏編號(hào)為CGMCC No. 8903的副干酪 乳桿菌和可接受的輔料。
[0021] 作為優(yōu)選，所述輔料選自乳糖、干燥淀粉、淀粉糊、糊精、環(huán)糊精、羧甲基淀粉鈉、羧 基淀粉丙酸酯、微晶性纖維素、羧甲基纖維素、麥芽糊精、硬脂酸鎂及其類似物。所述類似物 指代的是尚未在本發(fā)明中一一具體列明的本領(lǐng)域中常用的輔料。本發(fā)明所述輔料可以為一 種，也可以為多種，這由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)實(shí)際制備情況而調(diào)節(jié)和選擇。
[0022] 作為優(yōu)選，所述乳酸菌組合物還包括益生菌、益生元、食品添加劑中的一種或兩 種，由此配合本發(fā)明所述副干酪乳桿菌V0151優(yōu)異的能力來達(dá)到最佳效果。其中，所述益生 元選自聚葡萄糖、低聚木糖、菊粉、低聚半乳糖、低聚果糖及其類似物，所述類似物指代的是 尚未在本發(fā)明中一一具體列明的本領(lǐng)域中常用的益生元，所述益生元可以為一種，也可以 為多種，這由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)實(shí)際制備情況而調(diào)節(jié)和選擇。
[0023] 作為優(yōu)選，所述食品添加劑選自果粉、木糖醇、檸檬酸、三氯蔗糖、食用香精及其類 似物，所述類似物指代的是尚未在本發(fā)明中一一具體列明的本領(lǐng)域中常用的食品添加劑， 所述食品添加劑可以為一種，也可以為多種，這由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)實(shí)際制備情況而調(diào) 節(jié)和選擇。
[0024] 本發(fā)明所述乳酸菌組合物可以制備成任意一劑型，作為優(yōu)選，其為口服制劑。進(jìn) 一步優(yōu)選地，所述口服制劑為溶液、懸浮液、乳劑、粉劑、錠劑、丸劑、糖漿、片劑、口嚼膠或膠 裳。
[0025] 由以上技術(shù)方案可知，本發(fā)明所述菌株增殖快速且產(chǎn)酸能力優(yōu)異，具有分泌胞外 多醣以及對(duì)抗膽鹽和胃酸侵襲的能力，更可調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、抑制過敏和發(fā)炎現(xiàn)象，十分適合 用于食品、保健品、藥品、食品補(bǔ)充劑等廣品的制備。
[0026] 生物保藏說明
[0027] 分類命名：副干酪乳桿菌，Lactobacillus paracasei于2014年3月7日保藏在 中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3 號(hào)，中國科學(xué)院微生物研宄所，保藏編號(hào)為CGMCC No. 8903。
【附圖說明】
[0028] 圖1所示為本發(fā)明副干酪乳桿菌副干酪亞種V0151與養(yǎng)樂多代田菌生長過程中環(huán) 境酸堿值的變化折線圖；
[0029] 圖2所示為本發(fā)明副干酪乳桿菌副干酪亞種V0151與養(yǎng)樂多代田菌的產(chǎn)酸表現(xiàn)折 線圖；