并且使用時(shí)無(wú)需進(jìn)一步純 化。
[0252] 中間體3:(S) -4,4-二氟吡咯烷-2-羧酸
[0253]
[0254] 起始于市售⑶-1-(叔丁氧基羰基）-4,4-二氟吡咯烷-2-羧酸（150mg， 1. Ommol)，根據(jù)上述步驟B以定量收率獲得作為鹽酸鹽的產(chǎn)物并且使用時(shí)無(wú)需進(jìn)一步純 化。
[0255] 中間體4:(2S，4S) -4-(甲基硫基）吡咯烷-2-羧酸
[0256]
[0257] 起始于市售（2S，4S)-1_(叔丁氧基羰基）-4_甲基硫基-吡咯烷-2-羧酸（310mg， 1. 93mmol)，根據(jù)上述步驟B以定量收率獲得作為鹽酸鹽的產(chǎn)物并且使用時(shí)無(wú)需進(jìn)一步純 化。
[0258] 中間體5 : (2S，4S)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸
[0259]
[0260] 起始于市售（2S，4S) -1-(叔丁氧基羰基）-4-甲基吡咯烷-2-羧酸（500mg， 2. 18mmol)，根據(jù)上述步驟B以定量收率獲得作為鹽酸鹽的產(chǎn)物并且使用時(shí)無(wú)需進(jìn)一步純 化。
[0261] 中間體6 : (2S，4R)-4-乙酰氧基吡咯烷-2-羧酸
[0262]
[0263] 將市售的反式-L-羥脯氨酸（500mg，3. 81mmol)溶解于6N鹽酸（lmL)中。添加冰 乙酸（lmL)，并且在冰浴中將溶液冷卻至0°C。然后緩慢添加乙酰氯（10mL)。幾分鐘之后， 通過沉淀獲得產(chǎn)物，這得益于醚的添加。鹽酸鹽形式的化合物（626mg，2. 98mmol)通過過濾 來分離，用醚洗滌、干燥并直接用于下一步驟。
[0264] 中間體7 :(2S，4R)-1-(4_(芐基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲?；4_甲氧基-吡 咯烷-2-羧酸
[0265]
[0266] 根據(jù)上述步驟C由中間體1(4-芐基氧基_3,5_二甲氧基苯甲酸）（425mg， 1. 5mmol)和中間體2((2S，4R)-4-甲氧基吡咯烷-2-羧酸）（1. 5mmol)制備。通過快速色譜 法純化獲得期望的產(chǎn)物（428mg，1. Ommol)。
[0267] 中間體8 : (2S，4R)-1-(4_(芐基氧基）-3,5_二甲氧基苯甲酰基）-4_氟吡咯 烷-2-羧酸
[0268]
[0269] 根據(jù)上述步驟C由中間體1(4-芐基氧基_3,5_二甲氧基苯甲酸）（714mg， 2. 5mmol)和市售（2S，4R)-4-氟吡咯烷-2-羧酸（363mg，2. 7mmol)制備。通過快速色譜法 純化獲得期望的產(chǎn)物（670mg，1. 7mmol)。
[0270] 中間體9 :(2S，4S)-1-(4_(芐基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲?；4_苯基吡咯 烷-2-羧酸
[0271]
[0272] 根據(jù)上述步驟C由中間體1 (4-芐基氧基-3，5-二甲氧基苯甲酸）（700mg， 2. 4mmol)和市售（2S，4S)-4-苯基吡咯烷-2-羧酸（608mg，2. 7mmol)制備。通過快速色譜 法純化獲得期望的產(chǎn)物（700mg，1. 5mmol)。
[0273] 中間體10 :(S)-1-(4_(芐基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲?；4,4_二氟吡咯 烷-2-羧酸
[0274]
[0275] 根據(jù)上述步驟C由中間體1 (4-芐基氧基-3，5-二甲氧基苯甲酸）（260mg， 0. 9mmol)和中間體3(⑶-4,4-二氟吡咯烷-2-羧酸）（l.Ommol)制備。通過快速色譜法純 化獲得期望的產(chǎn)物（366mg，0. 9mmol)。
[0276] 中間體11:(25,45)-1-(4-(芐基氧基）-3,5-二甲氧基苯甲?；?4-(甲基硫 基）_吡咯烷-2-羧酸
[0277]
[0278] 根據(jù)上述步驟C由中間體1(4-芐基氧基_3,5_二甲氧基苯甲酸）（505mg， 1.75mmol)和中間體4((2S，4S)-4-(甲基硫基）吡咯烷-2-羧酸）（1.93mmol)制備。通過 快速色譜法純化獲得期望的產(chǎn)物（537mg，1. 24mmol)。
[0279] 中間體12 :(2S，4S)-1-(4_(芐基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_甲基吡咯 烷-2-羧酸
[0280]
[0281] 根據(jù)上述步驟C由中間體1(4-芐基氧基_3,5_二甲氧基苯甲酸）（384mg， 1.33mmol)和中間體5((2S，4S)-4-甲基吡咯烷-2-羧酸）（1.47mmol)制備。通過快速色譜 法純化獲得期望的產(chǎn)物（342mg，0. 85mmol)。
[0282] 中間體13 : (2S，4R) -1- (4-(芐基氧基）-3, 5-二甲氧基苯甲酰基）-4-乙酰氧基吡 咯烷-2-羧酸
[0283]
[0284] 根據(jù)上述步驟C由中間體1 (4-芐基氧基-3，5-二甲氧基苯甲酸）（400mg， 1.39mmol)和中間體6((2S，4R)-4-乙酰氧基吡咯烷-2-羧酸）（1.53mmol)制備。通過快速 色譜法純化獲得期望的產(chǎn)物（342mg，0. 85mmol)。
[0285] 中間體14 :4_乙酰氧基-3, 5-二甲氧基苯甲酸
[0286]
[0287] 在0 °C下將4-羥基-3, 5-二甲氧基苯甲酸（300mg，1. 51mmol)溶解于吡啶 (732 yL，9.08mmol)中。在攪拌混合物的同時(shí)逐滴添加乙酸酐（214yL，2.27mmol)。保持 冰浴2小時(shí)，然后將混合物注入冰水中?；旌衔镉肈CM萃取（3 X)，有機(jī)相用IN HC1溶液洗 滌（3X)、用水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)以產(chǎn)出4-乙酰氧基_3,5_二甲氧基 苯甲酸（266mg，1. lOmmol)。
[0288] 中間體15 :4_苯甲酰氧基-3, 5-二甲氧基苯甲酸
[0289]
[0290] 將4-羥基_3,5_二甲氧基苯甲酸（300mg，1. 51mmol)溶解于水（6mL)中，然后添 加異丙醇（2.5mL)，接著添加碳酸鉀（523mg，3.78mm〇l)。將混合物保持于氬氣下并冷卻至 〇°C。然后，向劇烈攪拌的反應(yīng)混合物中逐滴添加苯甲酰氯（185yL，1.59mm 〇l)。添加期間 形成粘稠的白色沉淀。將混合物再攪拌20min后用6M HC1淬滅，同時(shí)使反應(yīng)混合物保持冷 卻。固體通過過濾收集，經(jīng)冷水洗滌并干燥以產(chǎn)出作為白色固體的4-苯甲酰氧基_3,5_二 甲氧基苯甲酸（401mg，1. 33mmol)。
[0291] 中間體16 :3,4-二芐基氧基-5-甲氧基苯甲酸
[0292]
[0293] 將3,4-二羥基-5-甲氧基苯甲酸甲醋（300mg，1. 51mmol)、碳酸鉀（1. Og， 7. 3mmol)和碘化鉀（161mg，0. 97mmol)引入圓底燒瓶中。添加丙酮（60mL)。在室溫下將反 應(yīng)物攪拌30分鐘。然后，將芐基氯（1. 39mL，12. lmmol)添加至反應(yīng)混合物中并在回流下 維持?jǐn)嚢?小時(shí)。接著，將反應(yīng)物放置至冷卻到室溫。添加水并用二乙醚進(jìn)行三次萃取， 有機(jī)相用鹽水洗絳，干燥并蒸發(fā)。通過快速色譜法來純化粗制產(chǎn)物，得到377mg(l. Ommol)。 然后，根據(jù)上述步驟A對(duì)甲酯進(jìn)行水解以產(chǎn)出3,4_二芐基氧基-5-甲氧基苯甲酸（144mg， 0. 4mmo1)。
[0294] 中間體17 :3,4-二苯甲酰氧基-5-甲氧基苯甲酸
[0295]
[0296] 將3,4_二羥基-5-甲氧基苯甲酸（300mg，1. 63mmol)溶解于水（6mL)中并然后 添加異丙醇（2. 5mL)，再添加碳酸鉀（1. 13g，8. 15mmol)。將混合物保持在氬氣下并冷卻至 〇°C。然后，向劇烈攪拌的反應(yīng)混合物中逐滴添加苯甲酰氯（388 y L，3. 34_〇1)。將混合物 再攪拌20min后用6MHC1淬滅，同時(shí)使反應(yīng)混合物保持冷。接著，用AcOEt對(duì)其進(jìn)行稀釋并 且進(jìn)行相分離。有機(jī)相依次用1M HC1溶液和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)。通過快 速色譜法純化粗制物來產(chǎn)出作為白色固體的3,4_二苯甲酰氧基-5-甲氧基苯甲酸（548mg， 1. 40mmo1)〇
[0297] 中間體18 :3-乙酰氧基-4, 5-二甲氧基苯甲酸
[0298]
[0299] 在0 °C下將3-羥基-4, 5-二甲氧基苯甲酸（300mg，1. 51mmol)溶解于R比啶 (732 yL，9.08mmol)中。在攪拌混合物的同時(shí)逐滴添加乙酸酐（214yL，2.27mmol)。保持 冰浴2小時(shí)，然后將混合物注入冰水中?；旌衔镉肈CM萃取（3X)，有機(jī)相用IN HC1溶液 (3X)、水（2X)和鹽水（2X)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)以產(chǎn)出3-乙酰氧基_4,5_二 甲氧基苯甲酸（277mg，1. 15mmol)。
[0300] 中間體19 :3_特戊酰氧基-4, 5-二甲氧基苯甲酸
[0301]
[0302]將3-羥基-4,5-二甲氧基苯甲酸（30011^，1.51臟〇1)和吡啶（2441^，3.02臟〇1) 的氯仿（2mL)溶液攪拌30分鐘。根據(jù)TLC，在室溫下向該反應(yīng)混合物中逐滴添加氯仿（2mL) 的特戊酰氯（196 y L，1. 59mmol)溶液，并且攪拌反應(yīng)直至反應(yīng)完成（約3h)。然后，用DCM 稀釋反應(yīng)混合物，添加1M HC1溶液并進(jìn)行相分離。有機(jī)相依次用1M HC1溶液1MHC1 (2X)、 水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)。通過快速色譜法純化獲得4-特戊酰氧基-3， 5_ 二甲氧基苯甲酸（321mg，1. 14mmo 1)。
[0303] 中間體20 :4_芐基氧基-3-三氟甲基苯甲酸
[0304]
[0305] 將4-羥基-3-三氟甲基苯甲酸（1. 0g，4. 9mmol)和碳酸鉀（1. 6g，11. 6mmol)引入 圓底燒瓶中。添加DMF(lOmL)并在室溫下將反應(yīng)物攪拌5分鐘。然后，將芐基氯（2. 2mL， 19. 4mmol)添加至反應(yīng)混合物中，在回流下維持4小時(shí)。接著，放置反應(yīng)物至冷卻到室溫。 添加水并用乙酸乙酯（3X50mL)進(jìn)行三次萃取，有機(jī)萃取物經(jīng)鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。通過 快速色譜法來純化粗制產(chǎn)物，獲得1. 3g (3. 4mmol)。然后，根據(jù)上述的步驟A對(duì)芐基酯進(jìn)行 水解以產(chǎn)出4-芐基氧基-3-三氟甲基苯甲酸（320mg，1. lmmol)。
[0306] 中間體21 :4_芐基氧基-3-氟苯甲酸
[0307]
[0308] 將4-羥基-3-氟苯甲酸（1. 0g，6. 4mmol)、碳酸鉀（2. 7g，19. 2mmol)和碘化鉀 (532mg，3. 2mmol)引入圓底燒瓶中。添加丙酮（140mL)并在室溫下將反應(yīng)攪拌30分鐘。然 后，將芐基溴（3. 8mL，32. Ommol)添加至反應(yīng)混合物中，在回流下維持12小時(shí)。接著，放置 反應(yīng)物至冷卻到室溫。添加水并用乙酸乙酯（3X50mL)進(jìn)行三次萃取，有機(jī)萃取物經(jīng)鹽水 洗滌，干燥并蒸發(fā)。通過快速色譜法來純化粗制產(chǎn)物，獲得1. 2g(3. 5mmol)。然后，根據(jù)上述 的步驟A對(duì)芐基酯進(jìn)行水解以產(chǎn)出4-芐基氧基-3-氟甲基苯甲酸（612mg，2. 5_〇1)。
[0309] 實(shí)施例1:
[0310] (S)-1-((2S，4R)-1-(4-(芐基氧基）-3,5_二甲氧基苯甲酰基）-4_甲氧基吡咯 燒 _2_幾基）R比略燒-2-甲腈
[0311]
[0312] 根據(jù)上述步驟D使市售（S)_吡咯烷-2-甲腈（58mg，0. 4mmol)與中間體7((2S， 4R) -1- (4-(芐基氧基）-3, 5-二甲氧基苯甲?；?4-甲氧基吡咯烷-2-羧酸）（220mg， 0. 5mmol)偶聯(lián)。通過RP-HPLC純化來獲得10mg(0. 02mmol)的最終產(chǎn)物。
[0313] 實(shí)施例2:
[0314] (S)-1-((2S，4R)-1-(4_(芐基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_氟吡咯 燒 _2_幾基）R比略燒-2-甲腈
[0315]
[0316] 起始于市售Sieber酰胺樹脂（500mg，0. 30mmol，1當(dāng)量）、市售Fmoc保護(hù)的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (400mg，1. 2mmol)和中間體 8((2S，4R)-1-(4-(芐基氧基）-3,5_ 二甲 氧基苯甲酰基）-4-氟吡咯烷-2-羧酸）（239mg，0. 60mmol)，根據(jù)上述步驟E制備產(chǎn)物。通 過RP-HPLC純化獲得80mg(0. 17mmol)的最終產(chǎn)物。
[0317] 實(shí)施例3 :
[0318] (S)-1-((2S，4S)-1-(4_(芐基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_苯基吡咯 燒 _2_幾基）R比略燒-2-甲腈
[0319]
[0320] 起始于市售Sieber酰胺樹脂（500mg，0. 38mmol，1當(dāng)量）、市售Fmoc保護(hù)的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (516mg，1.53mmol)和中間體 9((25,45)-1-(4-(芐基氧基）-3,5-二甲 氧基苯甲?；?4-苯基吡咯烷-2-羧酸）（351mg，0. 76mmol)，根據(jù)上述步驟E制備產(chǎn)物。 通過RP-HPLC純化獲得16mg(0. 03mmol)的最終產(chǎn)物。
[0321] 實(shí)施例4:
[0322] (S) -1-((2S) -1- (4-(芐基氧基）-3，5-二甲氧基苯甲?；?4,4-二氟吡咯 燒_2_幾基）R比略燒-2-甲腈
[0323]
[0324] 起始于市售Sieber酰胺樹脂（250mg，0. 19mmol，1當(dāng)量）、市售Fmoc保護(hù)的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (258mg，0? 77mmol)和中間體 10 ((S) -1- (4-(芐基氧基）-3, 5-二甲氧 基苯甲?；?4,4-二氟吡咯烷-2-羧酸）（161mg，0. 38mmol)，根據(jù)上述步驟E制備產(chǎn)物。 通過RP-HPLC純化獲得18mg(0. 036mmol)的最終產(chǎn)物。
[0325] 實(shí)施例5:
[0326] (S)-1-((2S，4S)-1-(4_(芐基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）-4_(甲基硫基）吡 咯烷-2-羰基）吡咯烷-2-甲腈
[0327]
[0328]起始于市售Sieber酰胺樹脂（500mg，0. 38mmol，1當(dāng)量）、市售Fmoc保護(hù)的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (516mg，1.53mmol)和中間體 ll((2S，4S)-1-(4-(芐基氧基）-3,5_ 二 甲氧基苯甲?；?4-(甲基硫基）吡略燒-2-羧酸）（330mg，0. 76mmol)，根據(jù)上述步驟E制 備產(chǎn)物。通過RP-HPLC純化獲得22mg(0.043mmol)的最終產(chǎn)物。
[0329] 實(shí)施例6 :
[0330] (S) -1-((2S，4S) -1- (4-(芐基氧基）-3, 5-二甲氧基苯甲?；?4-甲基吡咯 燒_2_幾基）R比略燒-2-甲腈
[0331]
[0332] 起始于市售Sieber酰胺樹脂（300mg，0. 18mmol，1當(dāng)量）、市售Fmoc保護(hù)的L脯氨 酸（Fmoc-L-Pro-OH) (247mg，0. 73mmol)和中間體 12((2S，4S)-1-(4-(芐基氧基）-3,5_ 二 甲氧基苯甲?；?4-甲基吡咯烷-2-羧酸）（146mg，0. 37mmol)，根據(jù)上述步驟E制備產(chǎn)物。 通過RP-HPLC純化獲得10mg(0. 02mmol)的最終產(chǎn)物。
[0333] 實(shí)施例7 :
[0334] (S)-1-((2S，4R)-1-(4_(芐基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲酰基）_4_氰基吡咯 燒 _2_幾基）R比略燒-2-甲腈
[0335]
[0336] 通過以上步驟E所述的分步偶聯(lián)將市售Fmoc保護(hù)的L脯氨酸（Fmoc-L-Pro-OH) (516mg，1. 53mmol)和Boc-反式-4-氰基-L-脯氨酸（368mg，1. 53mmol)依次偶聯(lián)到市售 Sieber酰胺樹脂（500mg，0. 38mmol，l當(dāng)量）上。在二肽從樹脂上裂解掉（cleavage)之后， 根據(jù)步驟C通過形成羧酸酰氯使中間體1 (4-芐基氧基-3, 5-二甲氧基苯甲酸）（145mg， 0. 5mmol)與所得二肽腈偶聯(lián)。通過RP-HPLC純化粗制物獲得llmg(0. 03mmol)的最終產(chǎn)物。
[0337] 實(shí)施例8 :
[0338] (S) -1-((2S，4S) -1- (4-(芐基氧基）-3，5-二甲氧基苯甲?；?4-(三氟甲 基）_ R比略燒_2_幾基）R比略燒-2-甲腈
[0339]
[0340] 通過以上步驟E所述的分步偶聯(lián)將市售Fmoc保護(hù)的L脯氨酸（Fmoc-L-Pro-OH) (135mg，0. 40mmol)、（2S，4S)-Fmoc-4-三氟甲基-吡咯烷-2-羧酸（162mg，0. 40mmol)和中 間體1 (4-芐基氧基-3, 5-二甲氧基苯甲酸）（115mg，0. 40mmol)依次偶聯(lián)到市售Sieber酰 胺樹脂（165mg，0. 10mmol，l當(dāng)量）上。通過RP-HPLC純化獲得13mg(0. 045mmol)的最終產(chǎn) 物。
[0341] 實(shí)施例9:
[0342] (S)-1-((2S，4R)-1-(4_(芐基氧基）_3,5_二甲氧基苯甲?；?4_(叔丁氧基）吡 咯烷-2-羰基）吡咯烷-2-甲腈
[0343]
[0344] 通過以上步驟E所述的分步偶聯(lián)將市售Fmoc保護(hù)的L脯氨酸（Fmoc-L-Pro-OH) (135mg，0? 40mmol)、Fmoc-4-叔丁氧基 _L_ 腫氛酸（164mg，0? 40mmol)和中間體 1 (4-芐基 氧基-3,5-二甲氧基苯甲酸）（11511^，0.40_31)依次偶聯(lián)到市售516匕61'酰胺樹脂（16511^， 0? lOmmol，1當(dāng)量）上。通過RP-HPLC純化獲得22m