，室溫下攪拌1小時，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混 合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH 2Cl2 (60mLX 3)萃取，合并萃取相，依次用飽和NaHCO3 和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，殘余物使用硅 膠柱層析純化，得到化合物1-1，白色固體，ESI-MS，m/z = 403([M+H]+)。
[0029] 實施例2-3
[0030] 參照實施例1的方法，合成了下列化合物。
[0031]
[0032] 實施例4參考化合物R-I的合成
[0033] 為了進一步說明本發(fā)明化合物的藥理效果，本發(fā)明記載了同為申請人發(fā)明且尚未 公開的全新化合物R-1，其結(jié)構(gòu)如下：
[0034]
[0035] 其合成方法如下：
[0036]
[0037] A.化合物II1-4的合成
[0038] 化合物II-4 (I. 71g, IOmmol)溶于20mL干燥的THF中，在氮氣保護下冷卻 到-78°C，電磁攪拌，用注射器慢慢滴加 I. 6M的n-BuLi的正己烷溶液（6. 25mL，IOmrnol)， 滴加完畢后反應(yīng)混合物在該溫度下繼續(xù)攪拌1小時。用注射器慢慢滴加三氟化硼 乙醚（I. 42g，lOmmol)和ImL THF配制的溶液，滴加完畢后，再用注射器慢慢滴加 (I. llg，12mmol) (S)-氯代環(huán)氧丙烷和ImL干燥的THF配制的溶液，滴加完畢后，反應(yīng)化合 物慢慢升溫到室溫，并在室溫下攪拌過夜，TLC檢測反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物傾倒入200mL冰 水中，攪拌，用CH 2Cl2 (60mLX 3)萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去 干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，殘余物使用硅膠柱層析純化，得到化合物111-4,白色固 體，ESI-MS，m/z = 185([M+H].)。
[0039] B.化合物V-4的合成
[0040] 化合物 111-4(1. 29g, 7mmol)、化合物 IV-4(1. 35g, 7mmol)和固體 K2C03(2. 90g, 21mmol)加入20mL DMF中，室溫下攪拌過夜，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物 傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH2Cl 2 (60mL X 3)萃取，合并萃取相，用鹽水洗滌，無水硫酸鈉 干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，殘余物使用硅膠柱層析純化，得到化合 物 V-4,白色固體，ESI-MS，m/z = 341([M+H]+)。
[0041] C.化合物R-I的合成
[0042] 化合物V-4 (I. 70g，5mmol)溶于20mL 012(：12中，冰水浴冷卻下攪拌，慢慢加入間氯 過氧苯甲酸（mCPBA，I. 04g，6mmol)，加完后，室溫下攪拌1小時，TLC顯示反應(yīng)完成。反應(yīng)混 合物傾倒入200mL冰水中，攪拌，用CH 2Cl2 (60mLX 3)萃取，合并萃取相，依次用飽和NaHCO3 和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。抽濾除去干燥劑，濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，殘余物使用硅 膠柱層析純化，得到化合物R-1，白色固體，ESI-MS，m/z = 357([M+H]+)。
[0043] 實施例5化合物體外對11 β -HSDl的抑制作用
[0044] 試驗化合物的體外酶活性經(jīng)閃爍親近測定法（SPA)評價。將優(yōu)化可的松底物、 NADPH輔助因子和結(jié)構(gòu)式（I)的被測定的化合物用11 β-HSDl酶在37°C培養(yǎng)使向氫化可的 松的轉(zhuǎn)化進行。在培養(yǎng)后，將與抗氫化可的松單克隆抗體預(yù)混合的蛋白質(zhì)A涂覆的SPA珠 和非特異性的11 β -HSD抑制劑例如18 β -甘草次酸的制劑加入每個孔中?；旌衔镌?5°C 振蕩，隨后用適合于96孔板的液體閃爍計數(shù)器讀取。相對于非抑制對照孔計算抑制百分 數(shù)，得到IC5tl曲線。具體來講，向96孔板上指定的孔中加入40 μ L底物（在50mM HEPES緩 沖液中的25nM[3H]_可的松+1. 25mM NADPH，pH 7. 4)。將化合物以IOmM溶解在DMSO中，在 DMSO中依次50倍稀釋。稀釋的物質(zhì)隨后4倍滴定7次。隨后一式兩份地向底物中分別加 入1 μ L被滴定化合物。為開始反應(yīng)，在每個孔中以合適的濃度加入10 μ L由CHO細胞轉(zhuǎn)染 物得到的11 β -HSDl微粒體以產(chǎn)生約10%的原料轉(zhuǎn)化。為最終計算抑制百分數(shù)，向表示最 小和最大試驗的一系列孔中加入：含有底物而沒有化合物或酶（背景）的一組物質(zhì)，含有底 物和酶而沒有任何化合物的另一組物質(zhì)（最大信號）。板在離心機中在低速下簡單地離心 以匯集反應(yīng)物，用粘性膠帶密封，緩慢混合，在37°C培養(yǎng)2小時。在培養(yǎng)后，在每個孔中加 入45 μ L用抗氫化可的松單克隆抗體預(yù)懸浮的SPA珠和式（I)化合物。將板重新密封，在 15°C溫和振蕩1.5小時以上。在板基液體閃爍計數(shù)器中收集數(shù)據(jù)。為控制抗氫化可的松抗 體/氫化可的松結(jié)合的抑制，將用I. 25nM[3H_]氫化可的松作內(nèi)標(biāo)的底物加入指定的單一 孔中。在每個這樣的孔中加入1 μ L的200 μ M化合物，同時用10 μ L緩沖液代替酶。任何 計算的抑制歸因于化合物對氫化可的松結(jié)合于SPA珠上的抗體的干涉。
[0045] 測試結(jié)果見下表。
[0046]
[0047] 從上表結(jié)果可以看出，本發(fā)明的化合物對11 β-HSDl具有很強的抑制作用，可以 作為制備治療2型糖尿病的的藥物。
【主權(quán)項】
1. 具有通式I結(jié)構(gòu)的化合物，2. 權(quán)利要求1所定義的通式I化合物，選自：3. 合成權(quán)利要求1-2任一所定義的屬于通式I的化合物的方法：化合物II在低溫下先經(jīng)n-BuLi處理，得到的苯基鋰再在BF3 ?Et20催化下與（S)-氯 代環(huán)氧丙烷發(fā)生取代反應(yīng)，得到化合物III;化合物III與化合物IV反應(yīng)，得到化合物V;化 合物V經(jīng)氧化劑氧化得到化合物I。4. 權(quán)利要求1-2之一所定義的通式I化合物在制備治療2型糖尿病藥物方面的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及與2型糖尿病相關(guān)的藥物領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一類末端胺基取代的三氮唑亞砜結(jié)構(gòu)的11β-HSD1抑制劑、其制備方法以及在制備2型糖尿病藥物中的應(yīng)用。
【IPC分類】A61P3/10, C07D249/14
【公開號】CN104910084
【申請?zhí)枴緾N201510409661
【發(fā)明人】蔡子洋
【申請人】佛山市賽維斯醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年9月16日
【申請日】2015年7月13日