銀耳多糖的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于食品領域，特別涉及一種銀耳多糖及其制備方法。
【背景技術】
[0002]銀耳(Tremella fuciformis Berk )是一種營養(yǎng)價值極高的食用菌，在我國的種植較為普遍。銀耳的營養(yǎng)成分十分豐富，研宄表明，其含蛋白質(zhì)6.7-10%，碳水化合物65-71.2%，脂肪0.6-1.28%，粗纖維2.4-2.75%，無機鹽4.0-5.44%，及少量B族維生素。在傳統(tǒng)中醫(yī)及保健領域，通常認為銀耳具有強精、補腎、潤腸、益胃、補氣、活血、強心、壯身、補腦、提神、美容、嫩膚等功效。
[0003]目前，國內(nèi)外對食用菌及其制品的消費需求呈上升趨勢，尤其是食用菌的功能性有效成分的提取產(chǎn)品需求更為旺盛。如何從銀耳中提取銀耳多糖，并且采用更經(jīng)濟高效的技術手段，為保健食品、功能性食品、醫(yī)藥等行業(yè)提供高質(zhì)量的銀耳多糖產(chǎn)品，是目前銀耳精株加工的方向，具有廣闊的市場。
[0004]銀耳多糖是從銀耳中提取得到的乳白色或淡黃色固體。目前，銀耳多糖的主要用途有:(1)作為保健品，改善或提高機體免疫功能；(2)作為免疫功能調(diào)節(jié)劑，用于腫瘤化療或放療以及其它原因所致的白細胞減少癥；(3)作為抗氧化劑，用于延緩衰老的口服及美容產(chǎn)品；(4)作為醫(yī)藥，用作心血管疾病、高血脂、炎癥潰瘍、慢性支氣管炎等的治療。
[0005]提取銀耳多糖的主要方法有:酶法提取、堿法提取、酸法提取、擠壓處理提取等。從銀耳子實體中提取制備銀耳多糖一般采用兩步法，即先用上述方法將銀耳多糖提取出來，然后再對獲得的粗多糖進行精制處理。
[0006]酶法提取效果較好，是較為理想的提取方法。如:“酶法逆向提取銀耳多糖的工藝研宄”(中國療養(yǎng)醫(yī)學，2009年04期，作者:濟南軍區(qū)第二療養(yǎng)院，中國海洋大學，福建古田藥業(yè)公司)報道了以銀耳子實體為原料，采用酶法逆向提取銀耳多糖的工藝研宄，重點研宄了酶的選擇。然而，由于酶法提取銀耳多糖對反應過程要求嚴格，操作技術要求較高，且成本較高。
[0007]酸、堿法提取銀耳多糖是常用的方法，如“銀耳多糖工業(yè)化提取工藝優(yōu)化及護膚功效研宄”(日用化學工業(yè)，2010年04期，作者:北京工商大學，北京市植物資源研宄開發(fā)重點實驗室)研宄了以銀耳子實體為原料，在堿性條件下加熱提取銀耳多糖，結果表明，干銀耳與去離子水質(zhì)量比1: 100，pH = 9.0，90°C下提取4 h，提取液中銀耳多糖質(zhì)量濃度可達2.70 mg /mL，銀耳多糖產(chǎn)品具有較好的熱穩(wěn)定性和酸堿穩(wěn)定性，能夠作為功效成分添加劑應用于化妝品中。酸、堿法提取中酸、堿的添加對提取過程中已溶銀耳多糖的結構有一定的破壞，使銀耳多糖的提取率普遍不高。
[0008]擠壓提取采用物理方法對銀耳細胞進行破碎，對提高銀耳多糖的提取率有一定幫助，如“擠壓處理銀耳子實體對多糖提取效果的影響”(食品工業(yè)科技，2011年11期，作者:南京師范大學金陵女子學院)報道了以銀耳子實體為原料，比較研宄了擠壓和粉碎預處理與不同提取方法結合對銀耳多糖提取的影響，結果表明，擠壓與高溫高壓結合提取2h，銀耳水溶性多糖提取率可達27.3%。擠壓處理提取銀耳多糖的缺點是，提取率不高，提取時間較長，與高溫高壓結合提取可提高提取率，但長時間的高溫高壓處理會對銀耳多糖的結構和性能產(chǎn)生不利影響。
[0009]目前銀耳多糖的制備工藝研宄還不甚成熟，還需要進一步的完善，而銀耳多糖產(chǎn)品除了在醫(yī)藥領域有相關產(chǎn)品，在食品領域尚還未見。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明的目的是提供一種銀耳多糖及其制備方法，該方法在提取前，先將銀耳子實體超微粉碎，進行超聲輔助處理后再加熱提取銀耳多糖，然后精制，工藝簡化，工時縮短，節(jié)省能源。同時，由于提取工藝過程在中性條件下進行，利于銀耳多糖提取廢液的綜合利用。制備成的銀耳多糖在干燥狀態(tài)下性能穩(wěn)定。
[0011]本發(fā)明的技術方案是:
銀耳多糖的制備方法，有以下步驟:
1)原料預處理
A.取銀耳，90_110°C下干燥，粉碎，過80目篩，得銀耳干粉；
B.將銀耳干粉進行超微粉碎，粒徑多200目，得銀耳超微粉；
C.將銀耳超微粉加蒸餾水，攪拌均勻，間歇超聲1-4次，每次超聲0.5h，得超聲溶液；
2)提取
將超聲后的溶液在80-10(TC下連續(xù)振搖提取2-5小時，離心分離，取上清液，得到提取液，備用；
3)精制
A.提取液中加入4倍體積的95%乙醇，攪拌混勻，4°C條件下沉淀，離心20min，棄上清液，用95%乙醇洗滌沉淀一次，離心分離；
B.加入與提取液等體積的Sevage試劑，劇烈振搖15min，4°C下，離心20min，將最上層的水層傾出，重復去蛋白至無明顯蛋白層出現(xiàn)，50°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)真空濃縮；
C.雙氧水法脫色，透析過夜，冷凍干燥，得所述銀耳多糖。
[0012]步驟I)中所述銀耳超微粉與蒸餾水的重量比為1: 60-100。
[0013]步驟I)中所述超聲的工作頻率為40KHz ;間隔時間為0.5小時。
[0014]步驟3)中所述Sevage試劑為氯仿:正丁醇的體積比為5: 1，所述氯仿和正丁醇均為市售的分析純原液。
[0015]所述離心分離的轉(zhuǎn)速為6000-10000 r/min。
[0016]本發(fā)明采用超微粉碎和超聲波結合預處理，增強銀耳子實體細胞的破壁，利于胞內(nèi)多糖的溶出，有助于獲得高含量的銀耳多糖。本發(fā)明所述銀耳多糖的提取過程在中性條件下進行，十分便于副產(chǎn)物銀耳膳食纖維、銀耳蛋白等的回收利用，可以有效利用資源和最大限度減少環(huán)境污染排放物。
[0017]本發(fā)明所述銀耳多糖的提取過程沒有使用酸堿和其他有機化學試劑，僅在后續(xù)的精制過程中使用了少量的有機試劑，省去了大量的溶劑回收工序，具有節(jié)能、環(huán)保的優(yōu)點。
[0018]本發(fā)明的制備方法簡單，生產(chǎn)條件溫和，不需要特殊設備，便于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0019]本發(fā)明所述試劑均采用市售分析純產(chǎn)品。
[0020]下面將結合具體實施例，對本發(fā)明作進一步的說明。
【附圖說明】
[0021]圖1為銀耳多糖的氣相色譜圖。
具體實施例
[0022]實施例1
粉碎:市售干銀耳，105°C熱風烘干2h，粉碎，過80目篩，超微粉碎，過200目篩，備用。
[0023]超聲處理:取銀耳粉50g，加蒸餾水3L，攪拌均勻，在超聲工作頻率40KHz條件下間歇超聲2次(每隔0.5小時超聲0.5h)o
[0024]提取:將超聲后的溶液在100°C下連續(xù)振搖提取4小時，6000-10000r/min離心分離，取上清液，得到提取液，備用。
[0025]精制:提取液加入4倍體積的95%乙醇沉淀，用玻璃棒攪拌混勻，置4°C冰箱中沉淀過夜。4°C下，6000-10000 r/min離心20min，棄上清液，用95%乙醇洗滌沉淀一次，離心分離。然后加入與提取液等體積的Sevage試劑(氯仿:正丁醇=5: I)，劇烈振搖15 min,4°C下，6000-10000 r/min離心20min，小心地將最上層的水層傾出，重復去蛋白至無明顯蛋白層出現(xiàn)，50°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)真空濃縮。然后用雙氧水法脫色，再透析過夜，冷凍干燥即得銀耳多糖。所得銀耳多糖產(chǎn)品的多糖得率(干基)為19.8%，其外觀為淡黃色固體，無異味，水分含量為9.2%。
[0026]所得銀耳多糖