一種三磷酸腺苷二鈉的加工工藝的制作方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物制劑技術領域，具體涉及一種三磷酸腺苷二鈉的加工工藝。
【背景技術】
[0002]三磷酸腺苷二鈉，化學名:腺嘌呤核苷一 5’ 一三磷酸酯二鈉鹽三水合物，分子式:C10H14N5Na2O13P3.3H20，分子量:605.19，是核苷酸衍生物，參與體內(nèi)脂肪、蛋白質(zhì)、糖、核酸以及核苷酸的代謝。當體內(nèi)吸收、分泌、肌肉收縮及進行生化合成反應等需要能量時，三磷酸腺苷即分解成二磷酸腺苷及磷酸基，同時釋放出能量。三磷酸腺苷二鈉能夠穿透血-腦脊液屏障，能提高神經(jīng)細胞膜性結構的穩(wěn)定性和重建能力、促進神經(jīng)突起的再生長。三磷酸腺苷二鈉是輔酶類藥物，臨床用于因組織損傷、細胞酶活力下降所致的各種疾病。如心力衰竭，心肌炎、心肌梗塞、腦動脈硬化、冠狀動脈硬化、進行性肌萎縮、腦出血后遺癥、急慢性肝炎、肝硬化和聽力障礙等，還用于進行性肌萎縮、腦溢血后遺癥、心功能不全、心肌疾病及肝炎等治療。
[0003]中國專利CN200710019776.8，公開了一種三鱗酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法，包括下列步驟:(1)先加自來水于反應鍋中，同時開動攪拌，用夾套加熱至43-45?，然后投放蔗糖、葡萄糖、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀，使其溶解，停止加熱，用循環(huán)水降溫，當溫度降至40-42?以下時，投放速凍酵母泥，并用夾套加熱緩慢升溫；(2)用二倍于硫酸鎂體積的自來水溶解硫酸鎂，另外用水:腺苷液=12:1的比例先將自來水加熱至80°C，將腺苷溶解；(3)當反應鍋內(nèi)溫度至25±1°C時，依次投放硫酸鎂、腺苷液，并將反應料液加熱至38-40°C，停止加熱，保溫2h，此時開始取樣測定腺苷的轉(zhuǎn)達化率，當反應達到三磷酸腺苷二鈉一條帶時，反應結束；(4)滅活、調(diào)酸堿，反應結束立即放掉夾套中熱水，一邊通冷卻水降溫，一邊投放冰于反應鍋中，降溫至6-8°C時停止加冰，用磷酸調(diào)節(jié)pH3.0-4.0，靜置I小時后，再調(diào)節(jié)PH6.5-7.5，再靜置30分鐘后開始壓榨，當反應液壓榨結束后，再用純化水頂洗濾餅，30分鐘后，取水頂液檢測，當三磷酸腺苷二鈉濃度< 0.1%時即停止水頂，然后將水頂液與壓榨液混勻，檢驗三磷酸腺苷二鈉濃度0.5-1%、透光度多90%方為合格，將混合液送分離工段處理；(5)樹脂分離:上樣:將上述混合液加純凈水稀釋至0.3-0.5%上樹脂柱，上樣8小時后每2小時檢測流出液中ATP濃度，當上樣流出液中ATP ^ 0.1 %時停止上樣，改水頂，2小時后再進行上樣，直到上樣結束；水洗雜質(zhì):上樣結束，用純化水正進洗滌至流出液A257S 0.5 ;然后反進水洗至樹脂上層無混濁機械雜質(zhì)且流出液A 257S 0.5結束；稀鹽洗雜質(zhì):水洗結束，用0.05%稀氯化鈉溶液反進流洗，每2小時取樣，測流出液中ATP濃度，當流出液中ATP濃度多0.1 %時，反進流洗雜質(zhì)結束，改正進，每2小時取樣，測流出液中ATP濃度，若濃度多0.5%時，開始洗脫；洗脫:當液位降至樹脂上沿20cm處時，用2%濃鹽液進行洗脫，收集洗脫液，結束后送至脫色；(6)脫色:洗脫液先用二十萬分子量的中空纖維超濾膜進行第一次超濾去蛋白，再添加活性炭，攪拌30分鐘以上后靜置30分鐘，然后將脫色液送至精密過濾器超濾除熱原；(7)超濾、結晶:超濾:將脫色液再用納膜式超濾器進行第二次超濾除熱原，再送去:結晶；結晶:超濾液先用3N鹽酸調(diào)節(jié)pH至5.0,然后用夾套熱水升溫至30-32°C，同時開始攪拌，溫度達到32°C，開始加入95%乙醇，并保持溫度30_32°C，當鍋內(nèi)出現(xiàn)白色混獨時，停止加乙醇，繼續(xù)攪拌半小時，然后開夾套冷卻，將料液冷卻至室溫；離心結晶液，濕品先用乙醇淋洗，再用無水乙醇浸泡，最后離心30分鐘甩干，將濕品放入濕品存入室中，母液送蒸餾回收崗位進行回收；將濕品均勻地鋪入盤中，放入烘箱內(nèi)，真空干燥溫度控制在38-42°C，16小時后取出將其搗碎，而后每5小時翻料I次，待濕品烘至40小時后，取樣品送分析室測快速失重，當快速失重〈5%，即可出料；將干品放入干品存放室中保存，得產(chǎn)品。
[0004]現(xiàn)有技術中，例如ATP等藥品一般是按照國家食品要監(jiān)督管理局或者藥典等指導文件建議的工藝步驟進行生產(chǎn)，如果藥品生產(chǎn)企業(yè)對已經(jīng)拿到批文的產(chǎn)品變更生產(chǎn)工藝，需要重新報批，會增加人力物力成本。因此，既然有指導文件的建議，藥品生產(chǎn)廠家一般不會隨意變更生產(chǎn)工藝。但是隨著時代的發(fā)展，技術的進步，以及環(huán)保節(jié)能的要求，對現(xiàn)有技術的改進也在不斷進行當中，每一次改進都是對現(xiàn)有技術的不斷完善，相應的也是在節(jié)約成本。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術的不足，提供一種三磷酸腺苷二鈉的加工工
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[0006]本發(fā)明所述一種三磷酸腺苷二鈉的加工工藝，包括如下步驟:
[0007]I)生化反應
[0008](I)氯化鎂溶液、腺苷溶液、苯扎溴銨溶液的制備:
[0009]①用少量反滲透水溶解氯化鎂制成氯化鎂溶液；
[0010]②用適量室溫的反滲透水溶解腺苷制成腺苷溶液；
[0011]③用適量的反滲透水溶解苯扎溴銨稀釋成5%苯扎溴銨溶液；
[0012](2)投放速凍酵母:加反滲透水于反應鍋中，開動攪拌用夾套熱水加熱至40-450C，投放蔗糖及磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀，使其溶解，待其全部溶解后，停止加熱，開循環(huán)水降溫，當溫度降至40°C以下時，投放速凍酵母，并用夾套熱水緩慢升溫；
[0013](3) ATP生化反應:當反應鍋內(nèi)溫度升至20°C ± I時，依次投放氯化鎂溶液、苯扎溴銨溶液、腺苷溶液，反應開始計時，將反應液繼續(xù)加熱至36-39°C，保溫，待有氣泡溢出，開始取樣測定ATP轉(zhuǎn)化率，當反應達到ATP —條帶時，反應結束；
[0014](4)滅活、調(diào)酸堿:反應結束，立即放掉夾套熱水，迅速投放大量冰于反應鍋內(nèi)，并通冷卻水降溫，當溫度降至4°C以下，用磷酸調(diào)pH至2.5-3.0，I小時后，再用液堿調(diào)pH至5.5-6.0，調(diào)好堿后30分鐘開始壓榨，壓榨完畢，再用反滲透水頂洗濾餅，水頂液合并壓榨液，檢驗含量、透光度，合格送分離工段處理；
[0015]2)樹脂分離
[0016](I)串柱上樣:將壓榨液及水頂液稀釋至0.2-0.45%，上D296樹脂柱，流速為4-6L/min，定時檢測流出液，查看是否有ATP漏出；當流出液中ATP濃度多0.03%時，停止上樣，用反滲透水正頂至流出液ATP濃度< 0.01 %后，繼續(xù)上樣，如此反復直至上樣結束；
[0017](2)水洗雜質(zhì):串柱上樣結束，用反滲透水正進洗滌至流出液A257miS 0.2 ;然后反進水洗至樹脂上層無渾濁機械雜質(zhì)且流出液A257nmS 0.2后結束；流速控制在4-6L/min ；
[0018](3)稀鹽洗雜質(zhì):水洗結束，用 ρΗ2.0-2.2 的 0.04mol/LNaCl—0.01mol/L HCl 稀鹽液反進流洗，流速為6-10L/min ;每小時取樣，測流出液中ATP濃度，當流出液中ATP濃度^ 0.03%時，反進洗雜質(zhì)結束；改正進，正進流速不變，每小時取樣一次，測流出液中ATP的濃度，當流出液中ATP濃度多0.025 %時，每半小時取樣一次監(jiān)測；當流出液pH跳至2-4，且ADP基本洗盡或只有ATP時，洗滌結束，開始洗脫；
[0019](4)洗脫:用 ρΗ3.5-3.8 的 lmol/LnaCl-0.01mol/L HCl 濃鹽液進行洗脫，當洗脫流出液ATP濃度>0.38%時，收集洗脫液，送脫色；當洗脫流出液ATP濃度〈0.38%時，即停止收集；
[0020]3)精制
[0021](I)脫色:洗脫液根據(jù)色澤加入0.1-0.5%活性炭和0.1-0.3%硅藻土攪拌I小時脫色，離心分離過濾后，脫色液經(jīng)檢驗合格后送超濾除蛋白；
[0022](2)超濾:將脫色液用〈I萬分子量的超濾膜進行超濾除蛋白，合格后送去結晶；
[0023](3)結晶:超濾液先用CP級HCl調(diào)pH至2.5-3.3，再用> I萬分子量的超濾膜進行超濾除蛋白，合格后放入結晶釜，開動攪拌，開始加入95% (v/v)乙醇，