大等特點(diǎn)，解 決了傳統(tǒng)共沉淀法制備生物酶-類水滑石納米復(fù)合物時(shí)存在的聚集、粒徑大、粒徑分布范 圍寬、比表面積小等缺陷，所得血紅蛋白/類水滑石納米粒子呈海綿狀和不定型的小顆粒， 其粒徑小于40nm。
[0015] 2)本發(fā)明所述的小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物制備方法，不引入新的介 質(zhì)，僅利用T-形微反應(yīng)器限域效應(yīng)和反應(yīng)物間快速充分混合的特性，就得到了粒徑分布范 圍窄，顆粒較小，分散性好的血紅蛋白/類水滑石納米粒子，具有操作簡(jiǎn)單、條件溫和、制備 成本低等優(yōu)點(diǎn)，符合綠色化學(xué)的要求。
[0016] 3)本發(fā)明所述的小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物中，血紅蛋白分子均勻地 吸附在類水滑石粒子表面，并保持了血紅蛋白質(zhì)原有的二級(jí)結(jié)構(gòu)。
[0017] 4)本發(fā)明所述的小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物，在高溫時(shí)具有比游離血 紅蛋白、血紅蛋白-大顆粒類水滑石復(fù)合物更高的生物催化活性。
【附圖說明】：
[0018] 圖1為實(shí)施例1~4所得小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（a~d)和對(duì)比 例1所得血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（e)的XRD衍射圖。
[0019] 圖2為實(shí)施例1~4所得小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（a~d)和游離 血紅蛋白（Hb)分別在25 °C (圖2A)和90 °C (圖2B)時(shí)的紫外吸收光譜圖。
[0020] 圖3為實(shí)施例1~4所得小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（a~d)、游離 血紅蛋白（Hb)和血紅素（hemin)分別在25°C (圖3A)和90°C (圖3B)時(shí)的熒光發(fā)射光譜 圖。
[0021] 圖4為實(shí)施例1~4所得小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（a~d)和對(duì)比 例1所得血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（e)的SEM圖片，實(shí)施例4所得小粒徑血紅蛋白 /類水滑石納米復(fù)合物透射電鏡圖片（f)。
【具體實(shí)施方式】：
[0022] 為進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但并不以 任何方式限制本發(fā)明。
[0023] 實(shí)施例1 :
[0024] 分別稱取MgCl2 · 6H20和AlCl3 · 9H20,加入去離子水，配制總金屬離子濃度為 6mmol/L的MgCljP AlCl 3混合鹽溶液，向其中加入血紅蛋白使其濃度為0. 2g/L，混合均勻 后記為溶液A ;配制濃度為0. 02mol/L的氫氧化鈉溶液，記為溶液B ;打開T型微反應(yīng)器，將 溶液A、溶液B分別加入T型微反應(yīng)器的鹽液管和堿液管中，控制流速，保持反應(yīng)混合液的 pH在9. 0左右，在混合液出口處接收反應(yīng)產(chǎn)物；反應(yīng)混合液在N2保護(hù)條件下，低溫?cái)嚢?4h， 結(jié)束后將混合液12000rpm下離心10min，超純水將沉淀洗滌3次，得血紅蛋白/類水滑石納 米復(fù)合物膠狀物，記為Hb-LDH c6。
[0025] 實(shí)施例2 :
[0026] 分別稱取MgCl2 · 6H20和AlCl3 · 9H20,加入去離子水，配制總金屬離子濃度為 12mmol/L的MgCljP AlCl 3混合鹽溶液，向其中加入血紅蛋白使其濃度為0. 2g/L，混合均勻 后記為溶液A ;配制濃度為0. 02mol/L的氫氧化鈉溶液，記為溶液B ;打開T型微反應(yīng)器，將 溶液A、溶液B分別加入T型微反應(yīng)器的鹽液管和堿液管中，控制流速，保持反應(yīng)混合液的 pH在9. 0左右，在混合液出口處接收反應(yīng)產(chǎn)物；反應(yīng)混合液在N2保護(hù)條件下，低溫?cái)嚢?4h， 結(jié)束后將混合液12000rpm下離心10min，超純水將沉淀洗滌3次，得血紅蛋白/類水滑石納 米復(fù)合物膠狀物，記為Hb-LDH ci2。
[0027] 實(shí)施例3 :
[0028] 分別稱取MgCl2 · 6H20和AlCl3 · 9H20,加入去離子水，配制總金屬離子濃度為 24mmol/L的MgCljP AlCl 3混合鹽溶液，向其中加入血紅蛋白使其濃度為0. 2g/L，混合均勻 后記為溶液A ;配制濃度為0. 02mol/L的氫氧化鈉溶液，記為溶液B ;打開T型微反應(yīng)器，將 溶液A、溶液B分別加入T型微反應(yīng)器的鹽液管和堿液管中，控制流速，保持反應(yīng)混合液的 pH在9. 0左右，在混合液出口處接收反應(yīng)產(chǎn)物；反應(yīng)混合液在N2保護(hù)條件下，低溫?cái)嚢?4h， 結(jié)束后將混合液12000rpm下離心10min，超純水將沉淀洗滌3次，得血紅蛋白/類水滑石納 米復(fù)合物膠狀物，記為Hb-LDH m。
[0029] 實(shí)施例4 :
[0030] 分別稱取MgCl2 · 6H20和AlCl3 · 9H20,加入去離子水，配制總金屬離子濃度為 48mmol/L的MgCljP AlCl 3混合鹽溶液，向其中加入血紅蛋白使其濃度為0. 2g/L，混合均勻 后記為溶液A ;配制濃度為0. 02mol/L的氫氧化鈉溶液，記為溶液B ;打開T型微反應(yīng)器，將 溶液A、溶液B分別加入T型微反應(yīng)器的鹽液管和堿液管中，控制流速，保持反應(yīng)混合液的 pH在9. 0左右，在混合液出口處接收反應(yīng)產(chǎn)物；反應(yīng)混合液在N2保護(hù)條件下，低溫?cái)嚢?4h， 結(jié)束后將混合液12000rpm下離心10min，超純水將沉淀洗滌3次，得血紅蛋白/類水滑石納 米復(fù)合物膠狀物，記為Hb_LDH T48。
[0031] 對(duì)比例1 :
[0032] 分別稱取MgCl2 · 6H20和AlCl3 · 9H20,加入去離子水，配制總金屬離子濃度為 48mmol/L的MgCljP AlCl 3混合鹽溶液，向其中加入血紅蛋白使其濃度為0. 2g/L，混合均勻 后記為溶液A ;配制濃度為0. 02mol/L的氫氧化鈉溶液，記為溶液B ;將溶液A、溶液B分別 滴加到反應(yīng)瓶中，保持反應(yīng)混合液的pH在9. 0左右，在混合液出口處接收反應(yīng)產(chǎn)物；反應(yīng)混 合液在N2保護(hù)條件下，低溫?cái)嚢?4h，結(jié)束后將混合液12000rpm下離心10min，超純水將沉 淀洗滌3次，得血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物膠狀物，記為Hb-LDH C48。
[0033] 圖1為實(shí)施例1~4所得小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（a~d)和對(duì)比 例1所得血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（e)的XRD衍射圖。采用T型微反應(yīng)器制備的 Hb-LDH雜化物中，Hb-LDHT12、Hb-LDHm和Hb-LDH T48與傳統(tǒng)共沉淀法得到的Hb-LDH C48樣品 都出現(xiàn)了類水滑石所有的特征衍射峰（JCPDS card No. 51-1528)，表明雜化物具有類水滑 石的晶形結(jié)構(gòu)。上述四個(gè)樣品在低2 Θ處出現(xiàn)的三個(gè)峰型尖銳的衍射峰，分別對(duì)應(yīng)于〇〇3、 006和009晶面的衍射峰，在高2 Θ處存在強(qiáng)度較弱的衍射峰，對(duì)應(yīng)11〇晶面衍射峰，為類水 滑石的特征衍射峰。從圖中可以看出，隨著金屬鹽濃度的逐漸增大，所得雜化物的峰強(qiáng)度變 大，結(jié)晶度增高，晶面生長的有序度較高，結(jié)晶性較好。然而Hb_LDH T6樣品只在低衍射角處 出現(xiàn)了一個(gè)來自于玻璃樣品臺(tái)的很寬的衍射峰，表明了片層結(jié)構(gòu)堆積較少，只是由幾層類 水滑石片堆積而成。所得四種Hb-LDHj^ (!^在0. 938~0. 784nm之間，而NOf插層的類水 滑石的層間距通常為〇· 79nm，血紅蛋白的三維尺寸為6. 5nmX5. 4nmX5. 3nm，所以可判斷 血紅蛋白只是吸附在雜化物的表面。
[0034] 圖2為實(shí)施例1~4所得小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（a~d)和游離 血紅蛋白（Hb)分別在25°C (圖2A)和90°C (圖2B)時(shí)的紫外吸收光譜圖。圖2A顯示，當(dāng) 采用T型微反應(yīng)器共沉淀法將血紅蛋白固定在類水滑石上，血紅蛋白與類水滑石之間存在 較強(qiáng)的相互作用，在25°C相較于游離血紅蛋白在404nm處較強(qiáng)的吸附峰，這種作用力使固 定后血紅蛋白的Soret峰非常弱，但是仍然出現(xiàn)在400nm左右。圖2B顯示，當(dāng)將游離血紅 蛋白和冊(cè)-〇)4雜化物經(jīng)90 °C高溫處理后，游離血紅蛋白的Soret峰完全消失，證明高溫使 血紅蛋白發(fā)生了變性，然而Hb_LDHT雜化物仍在395nm處存在微弱的Soret峰，證明血紅蛋 白得到了類水滑石無機(jī)層狀納米片的保護(hù)，其二級(jí)結(jié)構(gòu)并沒有改變。
[0035] 圖3為實(shí)施例1~4所得小粒徑血紅蛋白/類水滑石納米復(fù)合物（a~d)、