一種龜裂鏈霉菌發(fā)酵生產土霉素的培養(yǎng)基的制作方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及發(fā)酵技術領域，特別是涉及龜裂鏈霉菌發(fā)酵生產土霉素的培養(yǎng)基配方。
【背景技術】
[0002]土霉素是龜裂鏈霉菌發(fā)酵產生的廣譜抗生素。是我國生產研宄早、工藝成熟、成本低、產量大的抗生素品種。在醫(yī)療、畜牧業(yè)和農業(yè)方面用途廣泛。土霉素主要用于防治畜禽大腸桿菌、沙門氏菌感染、巴氏桿菌、布氏桿菌感染及豬喘氣病、雞慢性呼吸道病；也常用于治療構的立克次氏體病、貓的傳染性貧血，預防狗的衣原體病和鈞端螺旋體病。目前，國內企業(yè)土霉素工業(yè)生產，存在的主要問題有以下幾點:1、種子、發(fā)酵培養(yǎng)基成分復雜。國內采用發(fā)酵模式生產土霉素，其培養(yǎng)基中的溶磷分別由磷酸二氫鉀和玉米漿組成，其成分比例對發(fā)酵生產影響較大。使用玉米漿為培養(yǎng)基提供溶磷，由于其穩(wěn)定性差，溶磷含量高低不定，影響菌種代謝生長，為調控發(fā)酵生產造成了較大影響。2、土霉素發(fā)酵培養(yǎng)添加的玉米漿，由于受到產地和加工等環(huán)節(jié)不穩(wěn)定因素的影響，質量很難均一穩(wěn)定。3、土霉素發(fā)酵生產中使用的玉米漿由于價格昂貴，給生產廠家造成沉重的成本負擔。4、國內幾個大的土霉素生產廠家有配套的淀粉糖車間，種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基淀粉已用淀粉乳代替淀粉，但由于補料液糖濃度較高，需要加入大量淀粉才能滿足生產需要，淀粉占到補料液成本的80%以上。而葡萄糖母液一般作為葡萄糖車間的副產品進行銷售，價格低廉。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種龜裂鏈霉菌發(fā)酵生產土霉素的培養(yǎng)基，它具有質量均一穩(wěn)定、成本低廉、可實現土霉素穩(wěn)定、高效生產的特點；本發(fā)明還可有效利用葡萄糖母液，降低生產成本。
[0004]為解決上述技術問題，本發(fā)明所采取的技術方案是:
[0005]一種龜裂鏈霉菌發(fā)酵生產土霉素的培養(yǎng)基，包括一級種子培養(yǎng)基、二級種子培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基和補料液，一級種子培養(yǎng)基的組成為:黃豆餅粉4.4-5.6kg/m3、硫酸銨
3.9-5.6kg/m3、淀粉 13.9-16.7kg/m3、碳酸 1? 3.9_5kg/m3、氯化鈉 3.9-5.6kg/m3、磷酸二氫鉀 0.8-1.2kg/m3、氯化鈷 8.3-llg/m3、酵母粉 5-6.7kg/m3、糊精 15-16.7kg/m3、玉米油15-20L/m3、淀粉酶0-0.4kg/m3; 二級種子培養(yǎng)基的組成為:黃豆餅粉18.5-20.5kg/m3、硫酸銨 7.3-8.8kg/m3、淀粉 48.8-53.7kg/m3、碳酸鈣 7.3-8.8kg/m3、氯化鈉 3.9-4.9kg/m3、磷酸二氫鉀 0.5-1.2kg/m3、氯化鈷 7.3-8.8g/m3、糊精 5.6-6.3kg/m3、有機硅消沫劑 0.24-0.97L/m3、淀粉酶0.024-0.097kg/m3;發(fā)酵培養(yǎng)基由如下重量kg/m 3數的各組分組成:黃豆餅粉
27.3-32.7kg/m3、硫酸銨 9-llkg/m3、淀粉 83.6-92.7kg/m3、碳酸鈣 8.7-lOkg/m3、氯化鈉
2.2-2.7kg/m3、磷酸二氫鉀 0.5-0.8kg/m3、硫酸鋅 0.15-0.22kg/m3、淀粉酶 0.02-0.09kg/m3；補料液的組成為:磷酸二氫鉀0.92-1.12kg/m3、淀粉260-280kg/m3、葡萄糖母液132_140kg/m3、碳酸1? 2.12kg/m3、淀粉酶0.2kg/m3、有機娃消沫劑0.8L/m3。
[0006]本發(fā)明進一步改進在于:
[0007]一級種子培養(yǎng)基的重量配比為:黃豆餅粉5.0kg/m3、硫酸銨4.9kg/m3、淀粉14.9kg/m3、碳酸 1? 4.5kg/m3、氯化鈉 4.9kg/m3、磷酸二氫鉀 1.0kg/m3、氯化鈷 9g/m3、酵母粉5.8kg/m3、糊精15.8kg/m3、玉米油18L/m3、淀粉酶0.2kg/m3;二級種子培養(yǎng)基的重量配比為:黃豆餅粉 19.lkg/m3、硫酸錢 8.lkg/m3、淀粉 50.2kg/m3、碳酸 1? 8.0kg/m3、氯化鈉 4.3kg/m3、磷酸二氫鉀0.8kg/m3、氯化鈷8.2g/m3、糊精5.8kg/m3、有機娃消沫劑0.55L/m3、淀粉酶
0.062kg/m3;發(fā)酵培養(yǎng)基的重量配比為:黃豆餅粉30.lkg/m 3、硫酸銨10kg/m3、淀粉88.8kg/m3、碳酸 1? 9.2kg/m3、氯化鈉 2.5kg/m3、磷酸二氫鉀 0.65kg/m3、硫酸鋅 0.018kg/m\ 淀粉酶0.06kg/m3;補料液的重量配比為:磷酸二氫鉀0.99kg/m3、淀粉270kg/m3、葡萄糖母液138kg/m3、碳酸媽2.12kg/m3、淀粉酶0.2kg/m3、有機娃消沫劑0.8L/m3。
[0008]采用上述技術方案所產生的有益效果在于:
[0009]本發(fā)明不使用玉米漿作為培養(yǎng)基原料，克服了玉米漿產地和加工等環(huán)節(jié)不穩(wěn)定因素的影響，質量很難均一穩(wěn)定的缺陷；本發(fā)明龜裂鏈霉菌發(fā)酵生產土霉素的培養(yǎng)基使用磷酸二氫鉀代替玉米漿，配方成分穩(wěn)定，價格低廉，由此培養(yǎng)基發(fā)酵生產土霉素易于調控，并且極大的降低了生產成本。同時，本發(fā)明提供了一種有效利用葡萄糖母液的補料液。采用葡萄糖母液代替淀粉，減少了淀粉的用量，母液價格低廉，極大的降低了生產成本，而且降低了配料崗位工人的勞動強度，減少了崗位粉塵的產生，達到了清潔生產和安全的目的。本發(fā)明具有質量均一穩(wěn)定、成本低廉、可實現土霉素穩(wěn)定、高效生產的特點；本發(fā)明還可有效利用葡萄糖母液，降低生產成本。
【具體實施方式】
[0010]下面將結合具體實施例對本發(fā)明進行進一步詳細說明。
[0011]下述發(fā)酵采用雙種發(fā)酵，其中I號一級種子培養(yǎng)基對應I號二級種子培養(yǎng)基。各種培養(yǎng)基配制完成后，實鍾滅囷，冷卻后待用。
[0012]實施例1
[0013]I號一級種子培養(yǎng)基制備:將黃豆餅粉7.92kg、硫酸銨7.02kg、淀粉(折干)25.02kg、碳酸1? 7.02kg、氯化鈉7.02kg、磷酸二氫鉀1.44kg、氯化鈷14.94g、酵母粉9kg、糊精27kg、玉米油27L，配置體積為1.Sm3放入一級種子罐。
[0014]2號一級種子培養(yǎng)基制備:將黃豆餅粉7.92kg、硫酸銨7.02kg、淀粉(折干)25.02kg、碳酸1? 7.02kg、氯化鈉7.02kg、磷酸二氫鉀1.44kg、氯化鈷14.94g、酵母粉9kg、糊精27kg、玉米油27L，配制體積為1.8m3放入一級種子罐。
[0015]I號二級種子培養(yǎng)基制備:將黃豆餅粉351.5kg、硫酸銨138.7kg、淀粉(折干)927.2kg、碳酸鈣138.7kg、氯化鈉74.1kg、磷酸二氫鉀9.5kg、氯化鈷138.7g、糊精106.4kg、有機硅消沫劑4.56L、淀粉酶0.456kg，配制體積為19m3放入二級種子罐。
[0016]2號二級種子培養(yǎng)基制備:將黃豆餅粉351.5kg、硫酸銨138.7kg、淀粉(折干)927.2kg、碳酸鈣138.7kg、氯化鈉74.1kg、磷酸二氫鉀9.5kg、氯化鈷138.7g、糊精106.4kg、有機硅消沫劑4.56L、淀粉酶0.456kg，配制體積為19m3放入二級種子罐。
[0017]發(fā)酵培養(yǎng)基配制過程:將黃豆餅粉1501.5kg、硫酸銨495kg、淀粉(折干)4598kg、碳酸1? 478.5kg、氯化鈉121kg、磷酸二氫鉀27.5kg、硫酸鋅8.25kg、淀粉酶1.1kg，配制體積為55m3放入發(fā)酵罐。
[0018]補料液配制過程:將磷酸二氫鉀23kg、淀粉(折干)6500kg、葡萄糖母液(折干)3300kg、碳酸1? 53kg、淀粉酶5kg、有機娃消沫劑20L放入罐體，配置體積為25m3。
[0019]利用上述培養(yǎng)基進行發(fā)酵生產，發(fā)酵結束，發(fā)酵單位為33090u/ml，發(fā)酵周期為
160ho
[0020]實施例2
[0021]I號一級種子培養(yǎng)基制備:將黃豆餅粉9kg、硫酸銨8.82kg、淀粉(折干)26.82kg、碳酸媽8.1kg、氯化鈉8.82kg、磷酸二氫鉀1.8kg、氯化鈷16.2g、酵母粉10.44kg、糊精28.44kg、玉米油32.4L、淀粉酶0.36kg，配制體積為1.8m3放入一級種子罐。
[0022]2號一級種子培養(yǎng)基制備:將黃豆餅粉9kg、硫酸銨8.82kg、淀粉(折干)26.82kg、碳酸媽8.1kg、氯化鈉8.82kg、磷酸二氫鉀1.8kg、氯化鈷16.2g、酵母粉10.44kg、糊精
28.44kg、玉米油32.4L、淀粉酶0.36kg，配制體積為1.8m3放入一級種子罐。
[0023]I號二級種子培養(yǎng)基制備:將黃豆餅粉362.9kg、硫酸銨153.9kg、淀粉(折干)953.8kg、碳酸1? 152kg、氯化鈉81.7kg、磷酸二氫鉀15.2kg、氯化鈷155.8g、糊精110.2kg、有機硅消沫劑10.45L、淀粉酶1.178kg，配制體積為19m3，放入二級種子罐。
[0024]2號二級種子培養(yǎng)基制備:將黃豆餅粉36