的方法，其中 如本發(fā)明第二方面所述的表達(dá)載體被引入真核宿主細(xì)胞。
[0033] 根據(jù)第五方面，本發(fā)明提供生成目標(biāo)多肽的方法，所述方法包括在允許所述目標(biāo) 多肽表達(dá)的條件下，以細(xì)胞培養(yǎng)方式，培養(yǎng)如本發(fā)明第三方面所述的宿主細(xì)胞。
[0034] 根據(jù)第六方面，本發(fā)明涉及處于表達(dá)盒中的5' UTR序列與h⑶33分泌性前導(dǎo)序列 的組合在由所述表達(dá)盒高產(chǎn)率表達(dá)目標(biāo)多肽中的應(yīng)用，其中所述5' UTR多核苷酸序列選自 下組
[0035] i)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0036] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcctcc gcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtctatagg cccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatttaggt gacactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgca(SEQ ID NO 1);
[0037] ii)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0038] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcct ccgcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtcta taggcccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatt taggtgacactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctc ggttctatcg(SEQ ID NO 2);
[0039] iii)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0040] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcct ccgcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtcta taggcccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatt taggtgacactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctc ggttctatcgaaaacgcgtccacc(SEQ ID NO 3)；
[0041] iv)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0042] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcctcc gcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtctatagg cccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatttaggtg acactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctcggttctat cgcgattgaattccccggggatcctctagggtgaccgtttggtgccgccacc(SEQ ID NO 4)；
[0043] v)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0044] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcctcc gcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtctatagg cccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatttaggtg acactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctcggttctat cgaaaacgcgcctctagagccgccacc(SEQ ID NO 5)；
[0045] vi)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0046] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcct ccgcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtcta taggcccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatt taggtgacactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctc ggttctatcgaaaaacgcgtgccgccacc(SEQ ID NO 6)；
[0047] vii)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0048] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcct ccgcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtcta taggcccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatt taggtgacactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctc ggttctatcgaaaacgcgtgccgccacc(SEQ ID NO 7)；
[0049] viii)包含與SEQ ID NO 1、SEQ ID NO 2、SEQ ID NO 3或SEQ ID NO 4或SEQ ID NO 5、SEQ ID NO 6或SEQ ID NO 7所示序列至少85%，優(yōu)選至少90%同一的序列的5'UTR 多核苷酸序列。
[0050]本申請的其它目的、特征、優(yōu)勢和方面通過以下說明書和所附權(quán)利要求書對本領(lǐng) 域技術(shù)人員是顯而易見的。然而，應(yīng)理解以下說明書和所附權(quán)利要求書以及具體實(shí)施例盡 管描述本申請的優(yōu)選實(shí)施方式，其僅以說明方式給出。本領(lǐng)域技術(shù)人員通過閱讀以下內(nèi)容 可清楚了解本發(fā)明精神和范圍內(nèi)的多種變化和修改。
【具體實(shí)施方式】
[0051]本發(fā)明提供表達(dá)目標(biāo)多肽的表達(dá)盒，所述表達(dá)盒包括遺傳元件即特定5' UTR多核 苷酸序列和hCD33分泌性前導(dǎo)序列的新型組合。該遺傳元件的特定組合引起編碼的目標(biāo)多 肽表達(dá)效率顯著增加。此外，發(fā)現(xiàn)所述前導(dǎo)序列的加工可加以改善，從而能減少由于前導(dǎo)序 列誤加工引起的不需的序列擴(kuò)展或截?cái)啵ㄒ卜Q為"截短"（clipping))。
[0052]根據(jù)第一方面，提供表達(dá)目標(biāo)多肽的表達(dá)盒，所述表達(dá)盒包括：
[0053] a)啟動(dòng)子
[0054] b)5' UTR多核苷酸序列，其中所述5' UTR多核苷酸序列選自下組
[0055] i)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0056] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcctcc gcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtctatagg cccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatttaggt gacactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgca(SEQ ID NO 1);
[0057] ii)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0058] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcct ccgcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtcta taggcccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatt taggtgacactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctc ggttctatcg(SEQIDNO 2);
[0059] iii)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0060] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcct ccgcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtcta taggcccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatt taggtgacactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctc ggttctatcgaaaacgcgtccacc(SEQIDNO 3)；
[0061] iv)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0062] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcctcc gcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtctatagg cccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatttaggtg acactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctcggttctat cgcgattgaattccccggggatcctctagggtgaccgtttggtgccgccacc(SEQIDNO 4)；
[0063] v)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0064] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcctcc gcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtctatagg cccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatttaggtg acactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggtgtccactcccaggtccaactgcacctcggttctat cgaaaacgcgcctctagagccgccacc(SEQIDNO 5)；
[0065] vi)包括以下序列的5' UTR多核苷酸序列
[0066] agatcgcctggagacgccatccacgctgttttgacctccatagaagacaccgggaccgatccagcct ccgcggccgggaacggtgcattggaacgcggattccccgtgccaagagtgacgtaagtaccgcctatagagtcta taggcccacccccttggcttcgttagaacgcggctacaattaatacataaccttatgtatcatacacatacgatt taggtgacactatagaataacatccactttgcctttctctccacaggt