取代三氨基三嗪類分泌型天冬氨酸蛋白酶抑制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，是一種新型的取代三氨基三嗪類分泌型天 冬氨酸蛋白酶抑制劑一一N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[2-(取代-基甲烯基）肼基]-N4-取 代-1，3, 5-二嘆-2, 4-二胺化合物以及制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來，侵入性真菌感染的發(fā)病率和相關(guān)的死亡率已經(jīng)極大程度上增加。臨床上， 白念珠菌（致死率：20%~40% )、新型隱球菌（致死率：20%~70% )和煙曲霉菌（致死 率：50%~90% )被確證為侵染性真菌感染的三大主要病因。目前，抗真菌藥物大體可分 為四大類：多烯類（如兩性霉素 B，作用于真菌細(xì)胞膜脂質(zhì)）、氟胞嘧啶類（如5-氟胞嘧啶， 作用于真菌核酸）、唑類（如氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑，作用于羊毛留醇14 α-去甲基化 酶）和棘白菌素類（如阿尼芬凈、卡泊芬凈，作用于真菌細(xì)胞壁β_1，3葡聚糖合成酶）。然 而，這些抗真菌藥物普遍存在抗菌譜窄、副作用強、生物利用度差、易產(chǎn)生耐藥性、藥物-藥 物相互作用嚴(yán)重等問題。例如，兩性霉素 B存在嚴(yán)重的腎毒性副作用，并產(chǎn)生大量一氧化 氮，導(dǎo)致神經(jīng)毒性；唑類化合物的耐藥性問題顯著；棘白菌素類口服無效，并且對新型隱球 菌無效。因此，尋找具有全新作用機制、抗菌譜廣、無交叉耐藥性的新型抗真菌化學(xué)實體成 為了抗真菌藥物研宄中的迫切任務(wù)。
[0003] 大量實驗證明，分泌型天冬氨酸蛋白酶（secreted aspartic protease，Sap)是白 色念珠菌致病的重要毒力因素，并已經(jīng)顯示了作為抗真菌新靶點的良好前景。Sap2已經(jīng)被 證實具有多種生物學(xué)功能，如為自身細(xì)胞提供營養(yǎng)、附著和入侵宿主細(xì)胞、破壞宿主的保護 屏障、損害宿主免疫應(yīng)激反應(yīng)等。同時，Sap2小分子抑制劑的研宄仍處于起步階段。
[0004] 為了發(fā)現(xiàn)具有全新結(jié)構(gòu)類型的新型Sap2小分子抑制劑，通過基于結(jié)構(gòu)的虛擬篩 選和進一步結(jié)構(gòu)改造，得到N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[2-(取代-基甲烯基）肼基]-N4-取 代-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺化合物，其具有Sap2抑酶活性，目前尚未見有該類化合物的合 成及其Sap2抑酶活性和線蟲體內(nèi)抗真菌活性的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種取代三氨基三嗪類化合物。
[0006] 本發(fā)明的第二個目的是，提供所述的三氨基三嗪類化合物的藥學(xué)上可接受的鹽 類。
[0007] 本發(fā)明的第三個目的是，提供所述的三氨基三嗪類化合物的制備方法。
[0008] 本發(fā)明的第四個目的是，提供所述的三氨基三嗪類化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 類的應(yīng)用。
[0009] 為實現(xiàn)上述第一個目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：一種取代三氨基三嗪類化合 物，所述的化合物的結(jié)構(gòu)通式為：
[0010]
[0011] 其中=R1為取代的苯環(huán)，R2為取代的芳環(huán)、萘環(huán)或芳香雜環(huán)；
[0012] (1)苯環(huán)、萘環(huán)和芳香雜環(huán)各種取代基位置位于除去連接位置的其它任何位置，單 取代或多取代，取代基指：氫、羥基、氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、硝基、氰基、三氟甲基 或鹵素；其中，鹵素包括F、Cl、Br、I ;
[0013] (2)取代芳香雜環(huán)獨立地表示：喹啉、四氫喹啉、異喹啉、四氫異喹啉、吡啶、噻吩、 噻唑、吡唑、呋喃、噁唑、異噁唑、噠嗪、吡嗪。
[0014] 優(yōu)選的，所述的化合物選自如下所示的化合物：
[0015]
[0016]
[0017]
[0018]
[0019]
[0020]

[0041] 為實現(xiàn)上述第二個目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：所述的三氨基三嗪類化合物 的藥學(xué)上可接受的鹽類，所述的鹽類是所述的化合物的有機堿鹽或無機堿鹽，無機堿包括 但不限于氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸鈉，有機堿包括但不限于甲胺、乙胺。
[0042] 為實現(xiàn)上述第三個目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：所述的三氨基三嗪類化合物 的制備方法，包括以下步驟：
[0043] (1)制備 4, 6-二氯-N-(取代）苯基-1，3, 5-三嗪-2-胺（II )
[0044] 三聚氯氰（I )和（取代）苯胺于丙酮中，冰浴攪拌反應(yīng)2小時，4, 6-二氯-N-(取 代）苯基-1，3, 5-三嗪-2-胺（II );
[0045] (2)制備6-氯-N2-(呋喃-2-基甲基）-N4-(取代）苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二 胺（III )
[0046] 化合物4,6_二氯-N-(取代）苯基_1，3, 5-三嗪-2-胺（II )、2_呋喃甲胺及5 % 的Na2CO3溶液，室溫攪拌反應(yīng)12小時，得到6-氯-N 2_ (呋喃-2-基甲基）-N4-(取代）苯 基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（III);
[0047] (3)制備N2-(呋喃-2-基甲基）-6-肼基-N4-(取代）苯基-1，3,5-三嗪-2, 4-二 胺（IV)
[0048] 6-氯-N2-(呋喃-2-基甲基）-N4-(取代）苯基-1,3, 5-三嗪-2, 4-二胺（III)和 肼于二氯甲烷中，回流攪拌反應(yīng)12小時，得到N2-(呋喃-2-基甲基）-6-肼基-N4-(取代） 苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（IV );
[0049] (4)制備N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代）肼基]-N4-苯基_1，3, 5-三嗪-2, 4-二 胺（V)
[0050] N2-(呋喃-2-基甲基）-6-肼基-N4-(取代）苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（IV ) 和不同取代的醛于甲苯中，回流攪拌反應(yīng)3小時，得到N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代） 肼基]-N4-苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（V );
[0051] (5)制備N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代）肼基]-N4-(取代）苯基-1，3, 5-三 嗪-2, 4-二胺（VI)
[0052] 6-氯-N2-(呋喃-2-基甲基）-N4-(4-甲氧苯基）_1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺和不同 取代的苯甲醛于甲苯中，回流攪拌反應(yīng)3小時，得到N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代）肼 基]-N4-(取代）苯基-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺（VI);
[0053] (6)制備取代-{2-[(2-{4_[(呋喃-2-基甲基）胺基]_6-[((取代）苯基）胺 基]-1，3, 5-三嗪-2-基}肼基）甲烯基]苯氧基}乙酸（VII)
[0054] N2-(呋喃-2-基甲基）-6-[(取代）肼基]-N4- (4-甲氧苯基）-1，3, 5-三嗪-2, 4-二 胺（VI)和LiOH-H2O于混合溶劑（THF:Me0H:H20 = 3:2:1)中，室溫攪拌反應(yīng)1小時，取 代-{2-[(2-{4-[(呋喃-2-基甲基）胺基]-6-[((取代）苯基）胺基]-1，3,5-三嗪_2_基} 肼基）甲烯基]苯氧基}乙酸（VII)。
[0055] 為實現(xiàn)上述第四個目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：所述的三氨基三嗪類化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽類在制備抗真菌、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、抗腫瘤、抗高血壓或抗血栓藥 物中的應(yīng)用。
[0056] 所述的三氨基三嗪類化合物抑制Sap2的活性。
[0057] 本發(fā)明優(yōu)點在于：
[0058] 1、本發(fā)明通過基于結(jié)構(gòu)的虛擬篩選和進一步結(jié)構(gòu)改造，合成一種全新的取代三氨 基三嗪類化合物；
[0059] 2、本發(fā)明所述化合物是一類全新結(jié)構(gòu)類型的真菌Sap2抑制劑，具有較好的抑酶 活性和線蟲體內(nèi)抗真菌活性，為深入研宄和開發(fā)新結(jié)構(gòu)類型抗真菌藥物開辟了新的途徑， 可用于制備治療抗真菌感染的藥物及與現(xiàn)有抗菌藥物聯(lián)用藥物。
【附圖說明】
[0060] 圖I. (A) Sap2水解底物原理；(B) FRET-pair吸收和激發(fā)波譜。
[0061] 圖2.純化前后Sap2的SDS-PAGE。M道：標(biāo)記蛋白；1道：未誘導(dǎo)蛋白；2道：誘導(dǎo) 蛋白；3道：純化重組蛋白。
[0062] 圖3.化合物27對線蟲的Kaplan-Meier生存曲線。
【具體實施方式】
[0063] 本發(fā)明提供一種新型的取代三氨基三嗪類抗真菌化合物，包括N2-(呋喃-2-基甲 基）-6-[2-(取代-基甲烯基）肼基]-N4-取代-1，3, 5-三嗪-2, 4-二胺化合物。
[0064] 本發(fā)明化合物的結(jié)構(gòu)通式如下：
[0065]
[0066] 其中=R1為取代的苯環(huán)，R2為取代的芳環(huán)、萘環(huán)或芳香雜環(huán)。
[0067] (1)苯環(huán)、萘環(huán)和芳香雜環(huán)各種取代基位置可以位于除去連接位置的其它任何位 置，可以是單取代，也可以多取代，取代基指：氫、羥基、氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、硝 基、氰基、三氟甲基或鹵素。其中，鹵素包括F、Cl、Br、I。
[0068] (2)取代芳香雜環(huán)獨立地表示：喹啉、四氫喹啉、異喹啉、四氫異喹啉、吡啶、噻吩、 噻唑、吡唑、呋喃、噁唑、異噁唑、噠嗪、吡嗪等。
[0069] 通式化合物優(yōu)選自札和R