H), 7. 84 (t, J=4. 0Hz, 2H, Ar-H), 5.40 (s, 2H, ArCH2N+), 3.48 (t, J=7.6Hz, 4H, 2 X "NCH2C7H15), 3.34 (s, 3H, "N-CH3), 1.86-1.82 (m, 4H, 2 X "NCH2CH2C8H17), 1.41-1.27 (m, 28H, 2 X - (CH2) 7CH3), 0.90 (t，J=6.8Hz，6H，2X-CH3); 13C NMR (400MHz，CDCl3) δ: 181.92，180.91， 139.62, 134.51, 134.47, 134.32, 133.71, 133.42, 133.11, 133.02, 130.91, 128.32, 127.34, 127.31, 64.04, 60.92, 48.04,31.82, 29.42, 29.23, 26.44, 22.72，22.63，13.92; ESI-MS, m/z: 532. 34(M-Br) + ; HRMS 理論值：C36H54N02[M-Br]+=532. 4149，實(shí)驗(yàn)值：532. 4144。
[0019] 實(shí)施例6 :蒽醌季銨鹽（簡稱3b)的合成（b方案） 取實(shí)施例2合成的2-溴甲基蒽醌2 300mg (LOOmmol)置于150mL三口瓶中，用70mL 氯仿溶解，加熱攪拌回流，滴加〇.3mL (過量）甲基二辛基癸胺，IOh后停止反應(yīng)。冷卻旋蒸 除去溶劑得粗品，硅膠柱層析提純。采用梯度洗脫的方法，洗脫劑為二氯甲烷一二氯甲烷： 乙醇=50 :1 (v/v)-二氯甲燒：乙醇（v/v)=40 :1 (v/v)-二氯甲燒：乙醇=30 :1 (v/v)，得相 應(yīng)蒽醌季銨鹽淡黃色固體（3b) 532. 3mg，產(chǎn)率87. 3%。
[0020] 實(shí)施例7 :溴丁氧基萘醌（簡稱4)的合成 將 2-羥基-1,4-萘醌（348.1mg, 2.0mmol)，K2C03 (6 24mg，2.0mmol)加入到 50mL三 口瓶中，用30mL DMF溶劑溶解后，加入1，4-二溴丁烷（428mg，2. Ommol)，控溫40°C，攪拌 15h后停止反應(yīng)。加入IOOmL水，析出沉淀，抽濾得黃色固體粗產(chǎn)物，用硅膠柱層析提純，洗 脫劑為CH2Cl2，得淡黃色固體化合物溴丁氧基萘醌（4) 345. Omg，產(chǎn)率56. 2%。產(chǎn)物表征數(shù) 據(jù)如下： 1H NMR (400MHz，CDCl3) δ: 8. 1卜8· 05 (m，2H，Ar-H), 7.76-7.68 (m，2H， Ar-H), 6.15 (s, 1H, CH=), 4.05 (t, J=5.6Hz, 2H, OCH2), 3.51 (t, J=6.4Hz, 2H, CH2-Br), 2.09-2.08 (m, 4H, OCH2 (CH2) 2CH2Br) 〇
[0021] 實(shí)施例8 :萘醌季銨鹽（簡稱5)的合成 在50mL三口瓶中加入實(shí)施例7制備的溴丁氧基萘醌4 (107. 8mg, 0. 35mmol)和0.1 mL (過量）甲基二辛基叔胺，用25mL乙二醇甲醚溶解，通N2保護(hù)，控溫100°C攪拌24h后停止 反應(yīng)。旋蒸除去溶劑，得固體粗品。柱層析梯度提純，洗脫劑為二氯甲烷：乙醇=50 :l(v/ v)-二氯甲烷：乙醇=40:1 (v/v)-二氯甲烷：乙醇=30:1 (v/v)，得棕色油狀固體萘醌季 銨鹽（簡稱5) 124. 6mg，產(chǎn)率63. 2%。產(chǎn)物表征數(shù)據(jù)如下： m.p· 56-58Γ; 1HNMR (400MHz，CDCl3) δ: 8.00 (d，J=8.2Hz，2H，Ar-H), 7.70 (m, 1H, Ar-H), 7.65 (m, 1H, Ar-H), 6.19 (s, 1H, CH=), 4.13 (t, J=4.8Hz, 2H, OCH2), 3.72 (t, J=4.8Hz, 2H, OCH2CH2CH2CH2N+), 3.39 (t, J=8.0Hz, 4H, 2 X N+CH2), 3. 28 (s, 3H, N+CH3), 2.05 (m, 4H, -OCH2(CH2)2CH2), I. 70 (m, 4H, 2 XN+CH2CH2), 1.31-1.19 (m, 20H, 2 X N+CH2CH2 (CH2) 5CH3), 0.81 (t, J=6. 4Hz, 6H, 2 X CH3) ; 13CNMR (400MHz, CDCl3) 5:184.75, 180.07, 159.22, 134.39, 133.30, 131.91, 130.88, 126.43, 126.15, 110.65, 68.89, 61.71, 61.59, 48.90, 31.61, 29.12, 29.02, 26.35，25.01，22.53，22.44，19.67，14.04; ESI-MS, m/z: 484.45 (M-Br) + ; HRMS 理 論值：C31H50NO3 [M-Br]+=484. 3785，實(shí)驗(yàn)值：484. 3788。
[0022] 實(shí)施例9 :抗癌活性測試 將白血病HL60細(xì)胞的細(xì)胞密度調(diào)整為I. 5 X 105/mL，接種于96孔培養(yǎng)板，每孔100 μ L， 置37° C，5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h ;移去舊培養(yǎng)基，加入受試衍生物，每孔100 yL，另設(shè)空 白對照組，每組設(shè)6個復(fù)孔。藥物作用72h后，吸棄含藥培養(yǎng)基，于每孔中加入無血清、無酚 紅1640培養(yǎng)基100 μ L，再加入MTT溶液10 μ L，繼續(xù)孵育4h，終止培養(yǎng)；小心吸棄96孔板 孔內(nèi)上清液，每孔加入150 yL DMSO,振蕩lOmin，于490nm波長處在酶標(biāo)儀上測定各孔光吸 收值（OD值)，計(jì)算半數(shù)抑制濃度IC5。值。結(jié)果如表1所示。
[0023] 表1大黃素及大黃素季鱗鹽對不同癌細(xì)胞株的細(xì)胞毒性（ICsn，ymol/L)
由表1可見，在沒有抗癌活性的2-甲基蒽醌和2-羥基-1，4-萘醌分子上引入親脂性 陽離子，都可以使化合物的抗白血病活性大大提高。尤其本發(fā)明報道的蒽醌季銨鹽3b，抗 白血病活性比先導(dǎo)化合物（2-甲基蒽醌）高40倍以上，具有較好的應(yīng)用于抗白血病藥物制 備的前景。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種蒽醌和萘醌季銨鹽，其特征在于：所述的蒽醌和萘醌季銨鹽為如下式結(jié)構(gòu)的化 合物：N-辛基-N-[(9, 10-蒽醌-2-)甲基]-N-甲基辛烷-1-溴化銨，N-癸基-N-[(9, 10-蒽 醌_2_)甲基]-N-甲基癸烷-1-溴化銨和N-[4-(1，4-二氧代-1，4-二氫萘-2-基）氧丁 基]-N-甲基-N-辛基辛烷-1-溴化銨； L .錢：、、!..2. -種如權(quán)利要求1所述的蒽醌季銨鹽的制備方法，其特征在于：包括以下步驟： 大黃素N-溴代丁二酰亞胺在過氧化苯甲酰存在下發(fā)生溴化反應(yīng)，生成2-溴甲基蒽 醌； 2-溴甲基蒽醌與甲基二辛基叔胺或甲基二癸基叔胺發(fā)生親核取代反應(yīng)生成蒽醌季銨 鹽。3. -種如權(quán)利要求1所述的萘醌季銨鹽的制備方法，其特征在于：包括以下步驟： 2-羥基萘醌與1，4-二溴丁烷在K2C03存在下發(fā)生Williamson醚化反應(yīng)，生成溴丁氧 基萘醌； 溴丁氧基萘醌與甲基二辛基叔胺發(fā)生親核取代反應(yīng)生成相應(yīng)的萘醌季銨鹽。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的蒽醌季銨鹽的制備方法，其特征在于：具體的步驟如下： (1) 2-溴甲基蒽醌的合成：取大黃素溶解于四氯化碳中，加入N-溴代丁二酰亞胺，控 溫，回流后加入過氧化苯甲酰，繼續(xù)回流后停止反應(yīng)；旋蒸除去溶劑后得粗產(chǎn)品，經(jīng)硅膠柱 層析分離得到淡黃色固體2-溴甲基蒽醌，洗脫劑為二氯甲烷/石油醚； (2) 蒽醌季銨鹽的合成：取2-溴甲基蒽醌置于三口瓶中，用氯仿溶解，加熱攪拌至 55°C-75°C，滴加甲基二辛基叔胺或甲基二癸基叔胺，完成反應(yīng)后，旋蒸除去溶劑得粗品，柱 層析梯度洗脫，洗脫劑依次為二氯甲烷一和二氯甲烷：乙醇，得相應(yīng)蒽醌季銨鹽黃色或淡黃 色固體化合物。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的萘醌季銨鹽的制備方法，其特征在于： ⑴溴丁氧基萘醌的合成：將2-羥基-1，4-萘醌和1(20)3用DMF溶劑溶解后，加入 1，4-二溴丁烷，控溫30-50°C，攪拌，完成反應(yīng)后，加入水，析出沉淀，抽濾得黃色固體粗產(chǎn) 物，用硅膠柱層析提純，洗脫劑為CH2C12，得淡黃色固體化合物溴丁氧基萘醌； ⑵萘醌季銨鹽的合成：溴丁氧基萘醌和甲基二辛基叔胺，用乙二醇甲醚溶解，通隊(duì)保 護(hù)，控溫90°C-1KTC，攪拌，完成反應(yīng)，旋蒸除去溶劑，得固體粗品，柱層析梯度洗脫，洗脫 劑依次為二氯甲烷一以及二氯甲烷：乙醇，得棕色油狀固體萘醌季銨鹽。6. 權(quán)利要求1所述的蒽醌季銨鹽和萘醌季銨鹽在制備治療白血病藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種具有抗白血病功能的蒽醌和萘醌季銨鹽的制備方法，蒽醌季銨鹽的制備方法：大黃素N-溴代丁二酰亞胺在過氧化苯甲酰存在下發(fā)生溴化反應(yīng)，生成2-溴甲基蒽醌；2-溴甲基蒽醌與甲基二辛基叔胺或甲基二癸基叔胺發(fā)生親核取代反應(yīng)生成蒽醌季銨鹽。萘醌季銨鹽的制備方法：2-羥基萘醌與1,4-二溴丁烷在K2CO3存在下發(fā)生Williamson醚化反應(yīng)，生成溴丁氧基萘醌；溴丁氧基萘醌<b>與</b>甲基二辛基叔胺發(fā)生親核取代反應(yīng)生成相應(yīng)的萘醌季銨鹽。實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明的蒽醌和萘醌季銨鹽對白血病細(xì)胞具有較強(qiáng)抑制作用，其抗癌活性比先導(dǎo)物2-甲基蒽醌高50倍以上，因此具有成為抗白血病藥物的應(yīng)用前景。
【IPC分類】A61P35/02, C07C221/00, C07C225/24, C07C213/02, C07C217/18
【公開號】CN105017042
【申請?zhí)枴緾N201510406814
【發(fā)明人】胡建達(dá), 陳英玉
【申請人】福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院
【公開日】2015年11月4日
【申請日】2015年7月13日