抑制劑及其合成方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種嘧啶類EGFR??抑制劑及其合成方法和 應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來，表皮生長因子受體（EGFR)抑制劑作為非小細(xì)胞肺癌靶向治療藥物一直 受到化學(xué)家和藥物學(xué)家的重視。目前，已有多種EGFR抑制劑藥物進(jìn)入臨床試驗階段或陸 續(xù)上市。其中，被認(rèn)為是第一代EGFR抑制劑的易瑞沙（Gefinitib)、特羅凱（Erlotinib) 和我國自主研發(fā)上市的凱美納（Icotinib，2012年上市）等已在臨床NSCLC病人治療中 獲得巨大成功。但經(jīng)6~12個月的治療后往往會發(fā)生明顯的繼發(fā)性耐藥，極大的限制了 患者生存時間的延長，目前研究認(rèn)為這種耐藥通常是由于EGFR 20號外顯子T790M錯位 突變所引起。2013年，Boehringer Ingelheim公司成功開發(fā)了首個第二代EGFR抑制劑 Afatinib (BIBW2992)，其主要特點(diǎn)是可以顯著抑制EGFR??，有效逆轉(zhuǎn)T790M所引起的耐 藥。但是，Afatinib同時也強(qiáng)烈抑制野生型EGFR(EGFRwt)，阻止體內(nèi)正常組織EGFRwHj^i 的磷酸化和相關(guān)信號通路的激活，從而帶來較大的藥物毒副作用。
[0003] 2009年，Zhou等報道了首個第三代嘧啶類不可逆抑制劑WZ4002(化學(xué)名為 N-[3-[[5-氯-2-[[2-甲氧基-4-(4-甲基-1-哌嗪基）苯基]氨基]-4-嘧啶基]氧基] 苯基]-2-丙烯酰胺），該化合物在后續(xù)的體內(nèi)、外試驗中均體現(xiàn)了良好的EGFR??選擇性 抑制作用，但最終因知識產(chǎn)權(quán)糾紛停止了進(jìn)一步的研究開發(fā)。此外，現(xiàn)有的EGFR第二、三 代抑制劑為了提高對EGFR??的抑制效果，通常在結(jié)構(gòu)中引入可與靶蛋白產(chǎn)生共價結(jié)合的 Michael受體（α，β -不飽和羰基結(jié)構(gòu)片段），從而導(dǎo)致與多種蛋白質(zhì)的非特異性結(jié)合，使 得他們在臨床前和臨床試驗中表現(xiàn)出較大的副作用和風(fēng)險。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的之一是為降低現(xiàn)有化合物毒副作用，提供一種新型嘧啶類EGFRt79m抑制劑。
[0005] 本發(fā)明提供一種嘧啶類EGFR??抑制劑，具有如下結(jié)構(gòu)通式（化合物8):
[0006]
[0007]其中 η = 0 或 1;R 選自-CH3、-CH2-CH3' -F、-Cl、-Br、-CF3、-NHC0CH3、-N-CH = CH-N-、-C ξ CH、-NH-CH = CH-中的任一種。
[0008] 進(jìn)一步的，所述的嘧啶類EGFR??抑制劑及其可藥用鹽包括：
[0009] 8a :R = 4-NHC0CH3, η = 0 ;
[0010] 8b ：R = 3-Br, n = 0 ；
[0011] 8c :R = 3_CF3, n = 0 ;
[0012] 8d :R = 3,4, 5_F，n = 0 ;
[0013] 8e :R = 4_F，n = I ;
[0014] 8f :R = 3-N-CH = CH-N-4, n = 0 ;
[0015] 8g :R = 3-C E CH，n = 0〇
[0016] 本發(fā)明還提供一種上述嘧啶類EGFR??抑制劑的制備方法，其合成路線如下：
[0018] 以2, 4, 5-三氯嘧啶為原料，在DIEA (N，N-二異丙基乙胺）堿性催化條件下與化合 物2a_g發(fā)生親核取代反應(yīng)，得化合物3a_g ;
[0019] 對硝基氟苯在碳酸鉀的弱堿條件下，與化合物5反應(yīng)得到化合物6,所述化合物6 在鈀碳做催化劑的條件下，被氫氣還原得到化合物7 ;
[0020] 所述化合物7在2- 丁醇作用下，與所述化合物3a_g反應(yīng)，得到目標(biāo)化合物8a_g。
[0021] 進(jìn)一步的，所述合成路線包括以下步驟：
[0022] 將化合物2a_g和2, 4, 5-三氯嘧啶溶解于干燥的N，N-二甲基甲酰胺中，攪拌條件 下，加入DIEA，回流反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后向反應(yīng)液中加入超純水，析出沉淀，將沉淀抽濾，洗滌 濾餅后烘干，得到化合物3a_g ;
[0023] 將對氟硝基苯和4-甲基哌嗪（化合物5)溶解于二甲基亞砜中，攪拌中加入碳酸 鉀進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)后向反應(yīng)液中加水，冷卻后析出沉淀，將所述沉淀抽濾，濾餅烘干后得到 化合物6,將所述化合物6溶解于甲醇中，攪拌下緩慢加入10% Pd/C，并通入氫氣，常溫反 應(yīng)，反應(yīng)完成后，將反應(yīng)液抽濾，用甲醇洗滌濾餅，濾液減壓旋去甲醇，得到濃縮液，用乙酸 乙酯萃取濃縮液，合并有機(jī)相，將所述有機(jī)相先用飽和氯化鈉溶液洗滌，再用無水硫酸鈉干 燥，干燥后過濾，減壓濃縮濾液，將所述濃縮后的濾液經(jīng)柱色譜分離得到化合物7 ;
[0024] 將化合物3a_g和化合物7溶于2-丁醇中，攪拌條件下加入三氟乙酸，加熱回流， 反應(yīng)結(jié)束后，冷卻到室溫，將反應(yīng)液用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)PH至中性后，用乙酸乙酯萃 取，合并有機(jī)相，將所述有機(jī)相先用飽和氯化鈉溶液洗滌，再用無水硫酸鈉干燥，干燥后過 濾，減壓濃縮濾液，將所述濃縮后的濾液用柱色譜分離得到目標(biāo)化合物8a_g。
[0025] 本發(fā)明再提供一種上述嘧啶類EGFR??抑制劑及其可藥用鹽在制備治療抗腫瘤藥 物中的應(yīng)用。
[0026] 進(jìn)一步的，所述的嘧啶類EGFR??抑制劑及其可藥用鹽在制備抑制EGFR突變體過 度表達(dá)或異常激活的細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。
[0027] 本發(fā)明再提供一種藥物、藥物組合物或試劑，包括上述的嘧啶類EGFR??抑制劑及 其可藥用鹽。
[0028] 進(jìn)一步的，所述藥物、藥物組合物或試劑用于抑制EGFR突變體過度表達(dá)或異常激 活的細(xì)胞增殖。
[0029] 進(jìn)一步的，所述EGFR突變體是在T790M位點(diǎn)產(chǎn)生突變的EGFR激酶。
[0030] 進(jìn)一步的，所述藥物、藥物組合物或試劑用于治療或預(yù)防腫瘤。
[0031] 進(jìn)一步的，所述腫瘤是EGFR依賴性腫瘤。
[0032] 進(jìn)一步的，所述腫瘤包括肺癌、腸癌、卵巢癌、腎癌、膀胱癌、空腔癌、胃癌或乳腺 癌。
[0033] 本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明沿用經(jīng)典的藥物設(shè)計及構(gòu)效關(guān)系研究方法，將 WZ4002嘧啶環(huán)4-位取代基上的氧原子替換為亞氨基，并進(jìn)一步去除2-位苯環(huán)上的甲氧基， 最終通過4-位苯環(huán)上的取代基進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾替代原有的Michael受體，設(shè)計并合成了 7個 未見文獻(xiàn)報道的新型嘧啶類化合物，豐富了嘧啶類EGFR??抑制劑的結(jié)構(gòu)類型。體外抗腫 瘤活性測試結(jié)果表明，化合物8a和8f對EGFR??激酶有較強(qiáng)的增殖抑制活性。因該類抑 制劑去除了的Michael受體結(jié)構(gòu)片段，可以有效避免抑制劑與體內(nèi)各蛋白中半胱氨酸殘產(chǎn) 生的共價結(jié)合反應(yīng)，降低體內(nèi)的毒副作用，為進(jìn)一步設(shè)計合成活性更高、選擇性更強(qiáng)的新型 EGFR??抑制劑提供參考。
【具體實施方式】
[0034] 下文將結(jié)合具體實施例詳細(xì)描述本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)注意的是，下述實施例中描述的技 術(shù)特征或者技術(shù)特征的組合不應(yīng)當(dāng)被認(rèn)為是孤立的，它們可以被相互組合從而達(dá)到更好的 技術(shù)效果。
[0035] 實施例一
[0036] I. 1合成路線
[0037] 目標(biāo)化合物的合成是以2, 4, 5-三氯嘧啶（化合物1)為原料，在DIEA堿性條件下 與具各種取代基的苯（芐）胺（化合物2a_g)發(fā)生親核取代反應(yīng)，得到4-苯（芐）胺基嘧 啶類中間體3a-3g。同時，對硝基氟苯（化合物4)在碳酸鉀（K2CO3)的弱堿條件下，與對甲 基哌嗪（化合5)反應(yīng)得到化合物6,化合物6經(jīng)在Pd/C條件下，被氫氣還原得到苯胺中間 體7。最后，中間體7在2-丁醇作用下，與先前得到的4-苯（芐）胺基嘧啶類中間體3a-3g 反應(yīng)，分別得到目標(biāo)化合物8a-8g。
[0038]
[0039] I. 2合成實驗
[0040] I. 2. 1化合物3a~3g的合成通法（以3a為例）
[0041 ]將 I. 0g(6. 66mmol)對乙酰氨基苯胺（化合物 2a)、I. 22g(6. 66mmol) 2, 4, 5-三氯 嘧啶（化合物1)溶解于IOmL干燥的N，N-二甲基甲酰胺（DMF)中。攪拌條件下，緩緩加入 0. 9g(6. 66mmol)碳酸鉀，60°C回流反應(yīng)2h。反應(yīng)結(jié)束后向反應(yīng)液中加入大量超純水，析出 沉淀后，抽濾。濾餅烘干后得到白色中間體（化合物3a) 1.5g。反應(yīng)收率69. 3%~75. 8%。
[0042] I. 2. 2 4-(4-甲基哌嗪）硝基苯（化合物6)的合成
[0043] 將5. 0g(35. 44mmol)對氟硝基苯（化合物4)和7. 10g(70. 87mmol)N-甲基哌嗪 (化合物5)溶解于20mL二甲基亞砜（DMSO)中，攪拌中緩緩加入9. 79g(70.87mmol)碳酸 鉀，反應(yīng)5h后。向反應(yīng)液中加入水，冷卻析出沉淀后，抽濾。濾餅烘干后得到黃色目標(biāo)化合 物（化合物6)，反應(yīng)收率75. 25 %。
[0044] I. 2. 3 4-(4-甲基哌嗪）苯胺（化合物7)的合成
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