一種堿蓬黃酮及其制備方法和用圖
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，是一種具有治療免疫力相關疾病的新化合物一一堿蓬 黃酮 B，化學名：7,2' -二羥基-5,6-二甲氧基-異黃酮（7,2' -dihydroxy-5,6_dimethox yiso avone)的制備方法和在醫(yī)藥領域中的治療免疫力低下疾病的用途。具體涉及從堿蓬 全草乙醇提取物中分離得到的一種新化合物，該化合物具有對脂多糖誘導的B淋巴細胞增 殖以及ConA誘導的T淋巴細胞增殖有顯著的抑制活性，研究結果發(fā)現(xiàn)堿蓬黃酮B具有很好 的免疫抑制活性。
【背景技術】
[0002] 喊蓬 Si/aei/a (Bunge) Bunge 為薬科 Chenopodiaceae 喊蓬屬 SwaeiZa Forsk. ex Scop. -年生草本真鹽植物。它廣泛分布于我國新疆、山東、河北、遼寧、吉林、 內(nèi)蒙古及甘肅等地的鹽堿荒漠和沿海灘涂。已知天然存在的植物黃酮表現(xiàn)出廣泛的生物活 性，包括抗氧化、抗腫瘤、抗動脈粥樣硬化、抗炎等。研究表明，堿蓬中含有豐富的營養(yǎng)成分， 堿蓬種子脂肪含量較高，約占其干物質(zhì)的36. 5%，高于大豆；堿蓬鮮嫩莖葉的蛋白質(zhì)含量為 40%;除以上營養(yǎng)成分外，堿蓬中還含有豐富人類所必需的維生素以及微量元素，堿蓬中含 有大量黃酮類化合物，但對它的化學成分研究較少。堿蓬藥材始載于《救荒本草》，云："其 葉味微咸，性微寒"。據(jù)清代《本草綱目拾遺》記載：堿蓬"味咸性涼，清熱消積"，現(xiàn)代醫(yī)學研 究發(fā)現(xiàn)，堿蓬具有抗炎、保肝、降血脂、抗衰老等藥理活性而且對老年人、高血壓病人具有一 定的保健作用，另有文獻報道異黃酮類化合物具有較好的免疫抑制活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明提供一種具有顯著抑制脾細胞增殖的新化合物一一堿蓬黃酮B(7, 2'-二 羥基-5, 6-二甲氧基-異黃酮）的制備方法和在醫(yī)藥領域中治療免疫力相關疾病的用途。
[0004] 本發(fā)明公開了該化合物的結構式(見摘要附圖） 分子式為：C17H14O6，不飽和度為11。分子量：314。
[0005] 命名為：堿蓬黃酮B，化學名：7, 2'-二羥基-5, 6-二甲氧基-異黃酮（7, 2' -dih ydroxy-5,6-dimethoxyiso avone)。
[0006] 本發(fā)明中上述化合物的制備方法如下： 其特征在于以8月份產(chǎn)自山東省壽光市的堿蓬為原料，經(jīng)反復通過硅膠或球形硅膠、 Sephadex LH-20 (Sep.)凝膠柱層析、反相材料ODS中的一種或幾種柱層析和重結晶等手段 分離純化得到該化合物。
[0007] 本發(fā)明的新化合物及其衍生物與醫(yī)學上可接受的藥用輔料組成藥物制劑用于免 疫力相關疾病?？芍苽涞膭┬陀校浩瑒⒛z囊劑、顆粒劑和注射劑。
[0008] 四、【附圖說明】： 以下圖可作為附件材料上報。
[0009] 圖1、化合物的1H-NMR譜 圖2、化合物的 13C-NMR譜 圖3、化合物的DEPT譜 圖4、化合物的1H-1H COSY的譜 圖5、化合物的HSQC譜 圖6、化合物的HMBC譜 圖7、化合物的ROESY譜 圖8、化合物的ES I-MS譜 五、【具體實施方式】： 結合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不僅僅限于所列舉的實 施方式。
[0010] 實施例1.從堿蓬全草中分離和鑒定該新化合物 堿蓬干燥全草約10 Kg，粉碎，經(jīng)80%乙醇加熱回流提取3次，濃縮，得到總浸膏，依次經(jīng) 石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等體積萃取3次，得乙酸乙酯部位浸膏180 g，經(jīng)硅膠柱層析，石 油醚-乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫，共收集11個流份，流份6反復經(jīng)硅膠柱、Sephadex LH-20 柱、反相柱層析從堿蓬干燥全草乙醇提取物中得到該單體化合物，通過理化性質(zhì)、波譜方法 鑒定為堿蓬黃酮B，經(jīng)文獻檢索該化合物是新化合物。
[0011] 該化合物結構經(jīng)核磁共振譜鑒定如下： 無色針狀結晶，易溶于氯仿、甲醇等有機溶劑。用TLC法顯示紫外365nm下無明顯熒 光，在254nm紫外燈光下有暗斑，噴濃硫酸-香草醛顯色劑并加熱后顯顯粉色逐漸變亮黃 色，噴 FeCl3顯污綠色，Molish 和 Liebermann-Burchard 反應都呈陰性。ESI-MS (m/z):315 ([M+H]+)得出其分子量為314。結合1H-NMR和13C-NMR圖譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C 17H14O6,不 飽和度為11，推斷化合物是一個黃酮類化合物。
[0012] 1H-NMR (500MHz，DMS0-成）心:10· 77 (lH，brs)，9. 31 (lH，brs)酚羥基的信號峰， ~在低場出現(xiàn)，懷疑可能是形成了分子內(nèi)氫鍵，使其向低場方向移動，其中~:10.77(1H， brs)為黃酮 7-OH 氫信號，心:9.31 (lH，brs)可能與 C-6、C-8 或 C-2'相連；心:6.86 (1H， dd，^8.05，L6Hz)，6.82(lH，dt，^8.05，L6Hz)，7.18(lH，dt，^8.05，L6Hz)，7.13 (lH，dd，方8.05，1.6 Hz)是芳香氫的信號峰，推測該化合物存在AA^ 系統(tǒng)的4個芳香 氫信號；A:3. 77 (6H，s)是-OMe的信號峰，說明存在2個-OMe。
[0013] 13C-NMR (135MHz，DMSO-成）與 DEPT 譜結合，可知有 6 個-CH 即心:152. 5,99. 4， 115. 7,118. 7,129. 1，131. 7 ;2 個-CH3即心:61· 6,60· 9 ;9 個季碳即 Jc:122. 4,173. 9， 152. 4,139. 4,156. 0,153. 4, 111. 8,119. 7,155. 5 ;不含有-CH2。
[0014] 1H-H COSY 譜和 ROESY 譜中心:9· 31 (1H，brs)與 8· 04 (1H，s)，7. 18 (1H，dt， ^8.05，L6Hz)，6.86(lH，dd，^8.05，L6Hz)，6.82(lH，dt，^8.05，L6Hz)，3.77(3H， 8)有相關峰推斷出：(：-2/上連接-0!1;以及心:7.18(1!1，社，方8.05，1.6抱）與9.31(1!1， brs)，8. 04 (1H，s)，7. 13 (1H，dd，方8. 05,1. 6 Ηζ)，6· 86 (1H，dd，方8. 05,1. 6 Ηζ)，6· 82 (1!1，社，方8.05，1.6抱）以及7.13(1!1，(1(1，方8.05，1.6抱）與9.31(1!1，1^8)，8.04(1!1， s),7. 18 (1H, dt, ^8. 05,1. 6 Hz),6. 86 (1H, dd, ^8. 05,1. 6 Hz),6. 82 (1H, dt, ^8. 05, 1.6抱）有相關峰，6.86(1!1，(1(1，方8.05，1.6抱）與9.31(1!1，1^8)，7.18(1!1，社，方8.05， 1.6抱），7.13(1!1，（1(1，方8.05，1.