用于治療、診斷和監(jiān)測阿爾茨海默病的方法
【專利說明】用于治療、診斷和監(jiān)測阿爾茨海默病的方法
[0001] 本申請是申請日為2012年11月9日、發(fā)明名稱為"用于治療、診斷和監(jiān)測阿爾茨 海默病的方法"的中國專利申請No. 201280055180. 2的分案申請。 發(fā)明領(lǐng)域
[0002] 提供鑒定、診斷和預(yù)測阿爾茨海默?。ˋD)(包括AD的特定亞型）的方法，以及治 療AD (包括特定的患者亞群）的方法。還提供用于鑒定有效的AD治療劑并且預(yù)測對AD治 療劑的應(yīng)答性的方法。
[0003] 背景
[0004] 阿爾茨海默?。ˋlzheimer's Disease，AD)是一種與認知和記憶功能進行性喪失 和最終癡呆癥（dementia)相關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)變性疾病。AD是發(fā)達國家中最顯著的 和常見的癡呆癥病因，占所有癡呆癥病例的60%以上。在尸體解剖中在AD患者中觀察到兩 種病理性特征：在海馬、大腦皮質(zhì)和腦部對認知功能重要的其他區(qū)域中的細胞外斑塊和細 胞內(nèi)纏結(jié)。斑塊主要由淀粉狀蛋白0 (AP)的沉積形成，所述淀粉狀蛋白0是一種來源于 淀粉狀蛋白前體蛋白（APP)的肽。
[0005] AD的頻率隨成年期的每個十年增加，在85歲以上人群中達到20-40%。由于越來 越多的人將活到八十多歲和九十多歲，預(yù)計在接下來的20年內(nèi)患者數(shù)目將增至三倍。在美 國有超過五百萬人患有AD，其中每年有800, 000例死亡與AD相關(guān)。在2011年，護理AD患 者的費用估計為總共1830億美元。AD還對家庭成員和護理者產(chǎn)生沉重的感情代價：在美 國約有1490萬人護理AD患者。AD患者在診斷后平均生活7至10年，并且平均5年的時間 在家庭或在療養(yǎng)院的看護下。
[0006] 早發(fā)型阿爾茨海默?。‥arly-onset Alzheimer's disease，E0AD)是一種罕見形 式的阿爾茨海默病，其中個體在65歲之前診斷患有該病。所有阿爾茨海默病患者中不到 10%的患者具有E0AD。大約一半的E0AD病例是家族性的，其中疾病遺傳性按照常染色體 顯性模式遺傳。沒有發(fā)現(xiàn)明顯的遺傳性模式的AD病例稱為"偶發(fā)性的"。迄今為止，已經(jīng) 在具有家族性 E〇AD的家族中鑒定了三種基因中的突變，包括在21號染色體上的淀粉狀蛋 白前體蛋白（APP)，在14號染色體上的早老蛋白l(PSENl)和在1號染色體上的早老蛋白 2(PSEN2)。在APP和早老蛋白基因中的大部分致病性突變與APP的異常加工相關(guān)，這導(dǎo)致 淀粉狀蛋白斑塊中主要成分A 0 42的產(chǎn)生增加。
[0007] 晚發(fā)型阿爾茨海默病（Late-onset Alzheimer's disease，LOAD)是最常見形式的 阿爾茨海默病，占約90%的病例并且通常在65歲之后發(fā)生。LOAD幾乎占85歲以上的所有 個體中的一半，并且典型地是偶發(fā)性的。基于成對研究（twin studies)，該疾病的遺傳可能 性估計為79%，在男性和女性之間的流行性或遺傳可能性沒有差異（控制年齡后）（Gatz， 等，Arch. Gen. Psychiatry，63:168-74 (2006))。目前鑒定為與早發(fā)型阿爾茨海默病相關(guān)的 單基因突變似乎不參與晚發(fā)型阿爾茨海默病。
[0008] 盡管還沒有發(fā)現(xiàn)引起晚發(fā)型形式的AD的特定的基因，但是增加人們發(fā)生該疾病 的危險的一個遺傳風(fēng)險因素與在19號染色體上發(fā)現(xiàn)的載脂蛋白E(AP0E)基因相關(guān)。早 期的AD遺傳研究證明與19號染色體上含有APOE基因的這一區(qū)域的相關(guān)性和連鎖性 (Schellenberg,等，J. Neurogenet?(神經(jīng)遺傳學(xué)雜志），4:97-108 (1987) ;Pericak_Vance， 等，Am. J. Hum. Gen.(美國人類遺傳學(xué)雜志），48:1034-1050 (1991))。APOE基因具有三 個常見的等位基因，稱為e 2、e 3和e 4。與常見的e 3等位基因相比，e 4等位基因 增加AD的危險性，而e2等位基因減少AD的危險性。（Corder,等（1993)Science(科 學(xué)），281:921-923 ;Corder 等（1994) Nat. Genet.(自然遺傳學(xué)）7:180-184)。盡管對于一般 群體到85歲的AD的終生危險（lifetime risk，LTR)為11-14%，但是對于APOE 3/4攜帶者 LTR升高至 23-35%，并且對于 APOE 4/4攜帶者升高至 51-68% (Genin 等（2011)Molecular Psychiatry (分子精神病學(xué)）16:903-907)。對于APOE 2/4攜帶者的AD危險性與具有中性 基因型APOE 3/3的受試者的相同，而APOE 2/3攜帶者具有減少的危險性。盡管40-65%的 AD患者具有至少一個拷貝的APOE- e 4等位基因，但是APOE- e 4不是該疾病的必需的決定 因素，原因在于至少三分之一的AD患者是APOE- e 4陰性的，并且一些APOE- e 4純合子從 來不發(fā)生該疾病。因此，該等位基因本身對于AD診斷是不充分的（Ertekin-Taner(2007) Neurol. Clin. 25:811)〇
[0009] 目前，診斷AD的主要方法包括考慮詳細的患者病史、實施記憶和心理學(xué)測試并且 排除其他關(guān)于記憶喪失的解釋，包括暫時性（例如，抑郁或維生素B12缺乏）或永久性（例 如中風(fēng)）病況。以這種方法，直至死亡后AD才能被最終診斷，在死亡后，尸體解剖揭示在患 者腦中的疾病特有的淀粉狀蛋白斑塊和神經(jīng)原纖維纏結(jié)。另外，臨床診斷步驟僅在患者已 經(jīng)開始表現(xiàn)出顯著的、異常的記憶喪失或個性變化后有幫助。到那時，患者可能已經(jīng)患有AD 數(shù)年了。例如，能夠允許醫(yī)師在疾病進程的早期鑒定AD或鑒定處于發(fā)生該疾病的高危險性 中的個體的診斷測試將提供在該疾病進程的早期階段進行干預(yù)的選擇。與晚期干預(yù)相比， 在疾病進程的早期干預(yù)通過延遲疾病發(fā)病或進展的確通常導(dǎo)致更好的治療結(jié)果。因此，需 要診斷和輔助AD診斷的其他方法。
[0010] 概述
[0011] 本發(fā)明提供診斷和預(yù)后受試者中的阿爾茨海默病（AD)的方法，所述方法包括檢 測在來自所述受試者的樣品中存在或不存在一種或多種遺傳變異，其中所述遺傳變異的存 在表示所述受試者患有或有危險發(fā)生AD，如本文公開的。
[0012] 在一個實施方案中，本發(fā)明提供一種篩選在具有至少一種APOE-e4等位基因的 受試者中對AD的發(fā)生具有有害或有益作用的遺傳變異的方法，所述方法包括，與年齡在75 歲以上、無AD并且具有至少一種APOE- e 4等位基因的對照受試者相比，鑒定在年齡在65 歲以下、患有AD并且具有至少一種APOE- e 4等位基因的受試者中以增加或減小的頻率存 在的遺傳變異，其中，與對照受試者相比，在患有AD的受試者中增加的頻率指示所述遺傳 變異與具有至少一種APOE- e 4等位基因的受試者中的有害作用相關(guān)，并且，與對照受試者 相比，在患有AD的受試者中減小的頻率指示所述遺傳變異與具有至少一種APOE- e 4等位 基因的受試者中的有益作用相關(guān)。在一些實施方案中，所述遺傳變異使用全基因組關(guān)聯(lián)掃 描（genome-wide association scan)鑒定。
[0013] 本發(fā)明還提供一種篩選在具有至少一種APOE- e 4等位基因的受試者中對AD的發(fā) 生具有有害或有益作用的遺傳變異的方法，所述方法包括：(a)確定在多名年齡在65歲以 下、患有AD并且具有至少一種APOE- e 4等位基因的受試者的一個或多個基因座的基因型； (b)確定在多名年齡在75歲以上、無AD并且具有至少一種APOE- e 4等位基因的對照受試 者的一個或多個基因座的基因型；并且（c)與對照受試者相比，鑒定在患有AD的受試者中 以增加的或減小的頻率存在的遺傳變異，其中，與對照受試者相比，在患有AD的受試者中 增加的頻率指示所述遺傳變異與具有至少一種APOE- e 4等位基因的受試者中的有害作用 相關(guān)，并且，與對照受試者相比，在患有AD的受試者中減小的頻率指示所述遺傳變異與具 有至少一種APOE- e 4等位基因的受試者中的有益作用相關(guān)。
[0014] 在這些篩選方法的一些實施方案中，所述有害作用是增加的發(fā)生AD的危險。在一 些實施方案中，所述有害作用是AD在較低年齡發(fā)病。在一些實施方案中，所述有益作用是 減少的發(fā)生AD的危險。在一些實施方案中，所述有益作用是AD在較晚年齡發(fā)病。
[0015] 在一個實施方案中，本發(fā)明提供一種用于檢測受試者中存在或不存在指示阿爾茨 海默?。ˋD)的遺傳變異的方法，所述方法包括：(a)使來自所述受試者的樣品與能夠檢測 基因或其基因產(chǎn)物中存在或不存在遺傳變異的試劑接觸，所述基因選自編碼IL6R、NTF4和 UNC5C的基因；并且（b)確定存在或不存在所述遺傳變異，其中所述遺傳變異的存在指示所 述受試者患有或有危險發(fā)生AD。
[0016] 在不同的實施方案中，所述至少一種遺傳變異是單核苷酸多態(tài)性（SNP)、等位基 因、單元型、插入或缺失。在一些實施方案中，所述遺傳變異是SNP。在一個實施方案中，所 述遺傳變異是在IL6R的氨基酸序列（SEQ ID N0:1)中導(dǎo)致氨基酸置換D358A的SNP。在另 一個實施方案中，所述遺傳變異是在rs2228145的'C'等位基因。在一個實施方案中，所述 遺傳變異是在NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中導(dǎo)致氨基酸置換R206W的SNP。在另一 個實施方案中，所述遺傳變異是在rsl21918427的'T'等位基因。在一個實施方案中，所述 遺傳變異是在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中導(dǎo)致氨基酸置換T835M的SNP。在另 一個實施方案中，所述遺傳變異是在UNC5C(SEQ ID N0:3)中編碼位置835的氨基酸的密碼 子中用G置換A的SNP。
[0017] 在其他實施方案中，所述至少一種遺傳變異是氨基酸置換、插入或缺失。在一些實 施方案中，所述遺傳變異是氨基酸置換。在一個實施方案中，所述遺傳變異是在IL6R的氨 基酸序列（SEQ ID NO: 1)中的氨基酸置換D358A。在一個實施方案中，所述遺傳變異是在 NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中的氨基酸置換R206W。在一個實施方案中，所述遺傳 變異是在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中的氨基酸置換T835M。
[0018] 在所述方法的一些實施方案中，所述試劑選自寡核苷酸、DNA探針、RNA探針和核 酶。在其他實施方案中，所述試劑是與包含所述遺傳變異的蛋白特異性結(jié)合的抗體。在一 些實施方案中，所述試劑是被標記的。
[0019] 在所述方法的一些實施方案中，所述樣品選自腦脊液、血液、血清、痰、唾液、黏膜 刮除物、組織活檢、淚分泌物、精液或汗水中的一種。
[0020] 在一個實施方案中，所述方法還包括基于步驟（b)的結(jié)果治療所述患者的AD。在 一個實施方案中，所述方法還包括檢測所述樣品中至少一種AP0E- e 4等位基因的存在。在 一個實施方案中，與具有至少一種AP0E- e 4等位基因但是不存在所述至少一種遺傳變異 的受試者相比，所述至少一種遺傳變異的存在連同至少一種AP0E- e 4等位基因的存在指 示在較早年齡有AD診斷結(jié)果的增加的危險。
[0021] 本發(fā)明還提供用于檢測指示受試者中的阿爾茨海默病（AD)的遺傳變異的方法， 所述方法包括確定來自受試者的生物樣品中存在或不存在選自編碼IL6R、NTF4和UNC5C的 基因的基因或其基因產(chǎn)物中的遺傳變異，其中所述遺傳變異的存在指示所述受試者患有或 有危險發(fā)生AD。
[0022] 在不同的實施方案中，所述至少一種遺傳變異是單核苷酸多態(tài)性（SNP)、等位基 因、單元型、插入或缺失。在一些實施方案中，所述遺傳變異是SNP。在一個實施方案中，所 述遺傳變異是在IL6R的氨基酸序列（SEQ ID N0:1)中導(dǎo)致氨基酸置換D358A的SNP。在另 一個實施方案中，所述遺傳變異是在rs2228145的'C'等位基因。在一個實施方案中，所述 遺傳變異是在NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中導(dǎo)致氨基酸置換R206W的SNP。在另一 個實施方案中，所述遺傳變異是在rsl21918427的'T'等位基因。在一個實施方案中，所述 遺傳變異是在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中導(dǎo)致氨基酸置換T835M的SNP。在另 一個實施方案中，所述遺傳變異是在UNC5C(SEQ ID N0:3)中編碼位置835的氨基酸的密碼 子中用G置換A的SNP。
[0023] 在其他實施方案中，所述至少一種遺傳變異是氨基酸置換、插入或缺失。在一些實 施方案中，所述遺傳變異是氨基酸置換。在一個實施方案中，所述遺傳變異是在IL6R的氨 基酸序列（SEQ ID NO: 1)中的氨基酸置換D358A。在一個實施方案中，所述遺傳變異是在 NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中的氨基酸置換R206W。在一個實施方案中，所述遺傳 變異是在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中的氨基酸置換T835M。
[0024] 在所述方法的不同實施方案中，所述一種或多種遺傳變異的存在的檢測通過選自 由下述組成的組的方法進行：直接測序、等位基因-特異性探針雜交、等位基因-特異性引 物延伸、等位基因-特異性擴增、等位基因-特異性核苷酸摻入、5'核酸酶消化、分子信標測 定（molecular beacon assay)、寡核苷酸連接測定、大小分析和單鏈構(gòu)象多態(tài)性。在一些實 施方案中，在確定所述一種或多種遺傳變異的存在之前擴增來自所述樣品的核酸。
[0025] 在所述方法的其他實施方案中，檢測所述一種或多種遺傳變異在蛋白中的存在通 過選自下述的方法進行：電泳、色譜、質(zhì)譜、蛋白水解消化、蛋白測序、免疫親和測定或它們 的組合。在一些實施方案中，在確定所述一種或多種遺傳變異的存在之前，來自所述樣品的 蛋白用與所述蛋白結(jié)合的抗體或肽進行純化。
[0026] 在所述方法的一些實施方案中，所述樣品選自腦脊液、血液、血清、痰、唾液、黏膜 刮除物、組織活檢、淚分泌物、精液或汗水中的一種。
[0027] 在一個實施方案中，所述方法還包括基于步驟（b)的結(jié)果治療所述受試者的AD。 在一個實施方案中，所述方法還包括檢測所述樣品中至少一種AP0E- e 4等位基因的存在。 在一個實施方案中，與具有至少一種AP0E- e 4等位基因但是不存在所述至少一種遺傳標 記的受試者相比，所述至少一種遺傳變異的存在連同至少一種AP0E- e 4等位基因的存在 指示在較早年齡有AD診斷結(jié)果的增加的危險。
[0028] 本發(fā)明還提供一種用于診斷或預(yù)測受試者中的AD的方法，所述方法包括：（a)使 來自所述受試者的樣品與能夠檢測基因或其基因產(chǎn)物中存在或不存在遺傳變異的試劑接 觸，所述基因選自編碼IL6R、NTF4和UNC5C的基因；并且（b)確定存在或不存在所述遺傳變 異，其中所述遺傳變異的存在指示所述受試者患有或有危險發(fā)生AD。
[0029] 在不同的實施方案中，所述至少一種遺傳變異是單核苷酸多態(tài)性（SNP)、等位基 因、單元型、插入或缺失。在一些實施方案中，所述遺傳變異是SNP。在一個實施方案中，所 述遺傳變異是在IL6R的氨基酸序列（SEQ ID N0:1)中導(dǎo)致氨基酸置換D358A的SNP。在另 一個實施方案中，所述遺傳變異是在rs2228145的'C'等位基因。在一個實施方案中，所述 遺傳變異是在NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中導(dǎo)致氨基酸置換R206W的SNP。在另一 個實施方案中，所述遺傳變異是在rsl21918427的'T'等位基因。在一個實施方案中，所述 遺傳變異是在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中導(dǎo)致氨基酸置換T835M的SNP。在另 一個實施方案中，所述遺傳變異是在UNC5C(SEQ ID N0:3)中編碼位置835的氨基酸的密碼 子中用G置換A的SNP。
[0030] 在其他實施方案中，所述至少一種遺傳變異是氨基酸置換、插入或缺失。在一些實 施方案中，所述遺傳變異是氨基酸置換。在一個實施方案中，所述遺傳變異是在IL6R的氨 基酸序列（SEQ ID NO: 1)中的氨基酸置換D358A。在一個實施方案中，所述遺傳變異是在 NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中的氨基酸置換R206W。在一個實施方案中，所述遺傳 變異是在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中的氨基酸置換T835M。
[0031] 在所述方法的一些實施方案中，所述試劑選自寡核苷酸、DNA探針、RNA探針和核 酶。在其他實施方案中，所述試劑是與包含所述遺傳變異的蛋白特異性結(jié)合的抗體。在一 些實施方案中，所述試劑是被標記的。
[0032] 在所述方法的一些實施方案中，所述樣品選自腦脊液、血液、血清、痰、唾液、黏膜 刮除物、組織活檢、淚分泌物、精液或汗水中的一種。
[0033] 在一個實施方案中，所述方法還包括基于步驟（b)的結(jié)果治療所述受試者的AD。 在一個實施方案中，所述方法還包括檢測所述樣品中至少一種AP0E- e 4等位基因的存在。 在一個實施方案中，與具有至少一種AP0E- e 4等位基因但是不存在所述至少一種遺傳標 記的受試者相比，所述至少一種遺傳變異的存在連同至少一種AP0E- e 4等位基因的存在 指示在較早年齡有AD診斷結(jié)果的增加的危險。
[0034] 在一些實施方案中，所述方法還包括使所述受試者進行選自由下述組成的組的一 種或多種另外的AD診斷測試：篩查一種或多種另外的遺傳標記、實施精神狀態(tài)檢查或使所 述受試者進行成像步驟。
[0035] 在一些實施方案中，所述方法還包括分析所述樣品以檢測作為AP0E修飾物 (modifier)的至少一種另外的遺傳標記的存在，其中所述至少一種另外的遺傳標記處于選 自下述的基因中：編碼IL6R的基因、編碼NTF4的基因、編碼UNC5C的基因和表3中列出的 基因。在不同的實施方案中，所述至少一種另外的遺傳標記是在IL6R的氨基酸序列（SEQ ID N0:1)中導(dǎo)致氨基酸置換D358A的SNP、在NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中導(dǎo)致氨 基酸置換R206W的SNP、在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中導(dǎo)致氨基酸置換T835W的 SNP或表3中列出的SNP。
[0036] 本發(fā)明還提供一種診斷或預(yù)測受試者中的AD的方法，所述方法包括：確定來自受 試者的生物樣品中存在或不存在選自編碼IL6R、NTF4和UNC5C的基因的基因或其基因產(chǎn)物 中的遺傳變異，其中所述遺傳變異的存在指示所述受試者患有或有危險發(fā)生AD。
[0037] 在不同的實施方案中，所述至少一種遺傳變異是單核苷酸多態(tài)性（SNP)、等位基 因、單元型、插入或缺失。在一些實施方案中，所述遺傳變異是SNP。在一個實施方案中，所 述遺傳變異是在IL6R的氨基酸序列（SEQ ID N0:1)中導(dǎo)致氨基酸置換D358A的SNP。在另 一個實施方案中，所述遺傳變異是在rs2228145的'C'等位基因。在一個實施方案中，所述 遺傳變異是在NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中導(dǎo)致氨基酸置換R206W的SNP。在另一 個實施方案中，所述遺傳變異是在rsl21918427的'T'等位基因。在一個實施方案中，所述 遺傳變異是在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中導(dǎo)致氨基酸置換T835M的SNP。在另 一個實施方案中，所述遺傳變異是在UNC5C(SEQ ID N0:3)中編碼位置835的氨基酸的密碼 子中用G置換A的SNP。
[0038] 在其他實施方案中，所述至少一種遺傳變異是氨基酸置換、插入或缺失。在一些實 施方案中，所述遺傳變異是氨基酸置換。在一個實施方案中，所述遺傳變異是在IL6R的氨 基酸序列（SEQ ID NO: 1)中的氨基酸置換D358A。在一個實施方案中，所述遺傳變異是在 NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中的氨基酸置換R206W。在一個實施方案中，所述遺傳 變異是在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中的氨基酸置換T835M。
[0039] 在所述方法的不同實施方案中，檢測所述一種或多種遺傳變異的存在通過選自由 下述組成的組的方法進行：直接測序、等位基因-特異性探針雜交、等位基因-特異性引物 延伸、等位基因-特異性擴增、等位基因-特異性核苷酸摻入、5'核酸酶消化、分子信標測 定、寡核苷酸連接測定、大小分析和單鏈構(gòu)象多態(tài)性。在一些實施方案中，在確定所述一種 或多種遺傳變異的存在之前擴增來自所述樣品的核酸。
[0040] 在所述方法的其他實施方案中，檢測所述一種或多種遺傳變異在蛋白中的存在通 過選自下述的方法進行：電泳、色譜、質(zhì)譜、蛋白水解消化、蛋白測序、免疫親和測定或它們 的組合。在一些實施方案中，在確定所述一種或多種遺傳變異的存在之前，來自所述樣品的 蛋白用與所述蛋白結(jié)合的抗體或肽進行純化。
[0041 ] 在所述方法的一些實施方案中，所述樣品選自腦脊液、血液、血清、痰、唾液、黏膜 刮除物、組織活檢、淚分泌物、精液或汗水中的一種。
[0042] 在一個實施方案中，所述方法還包括基于步驟（b)的結(jié)果治療所述受試者的AD。 在一個實施方案中，所述方法還包括檢測所述樣品中至少一種AP0E- e 4等位基因的存在。 在一個實施方案中，與具有至少一種AP0E- e 4等位基因但是不存在所述至少一種遺傳標 記的受試者相比，所述至少一種遺傳變異的存在連同至少一種AP0E- e 4等位基因的存在 指示在較早年齡有AD診斷結(jié)果的增加的危險。
[0043] 在一些實施方案中，所述方法還包括分析所述樣品以檢測作為AP0E修飾物的至 少一種另外的遺傳標記的存在，其中所述至少一種另外的遺傳標記處于選自下述的基因 中：編碼E6R的基因、編碼NTF4的基因、編碼UNC5C的基因和表3中列出的基因。在不同 的實施方案中，所述至少一種另外的遺傳標記是在IL6R的氨基酸序列（SEQ ID NO: 1)中導(dǎo) 致氨基酸置換D358A的SNP、在NTF4的氨基酸序列（SEQ ID N0:2)中導(dǎo)致氨基酸置換R206W 的SNP、在UNC5C的氨基酸序列（SEQ ID N0:3)中導(dǎo)致氨基酸置換T835W的SNP或表3中列 出的SNP。
[0044] 本發(fā)明還提供一種鑒定具有增加的在較早的年齡發(fā)生AD的危險的受試者的方 法，所述方法包括：(a)確定來自受試者的生物樣品中存在或不存在選自編碼IL6R、NTF4 和UNC5C的基因的基因或其基因產(chǎn)物中的遺傳變異；并且（b)確定存在或不存在至少一種 AP0E- e 4等位基因，其中與不存在所述遺傳變異和至少一種AP0E- e 4等位基因的受試者 相比，所述遺傳變異和至少一種AP0E- e 4等位基因的存在指示所述受試者具有在較早年 齡有AD診斷結(jié)果的增加的危險。
[0045] 在不同的實施方案中，所述至少一種遺傳變異是單核苷酸多態(tài)性（SNP)、等位基 因、單元型、插入或缺失。在一些實施方案中，所述遺傳變異是SNP。在一個實施方案中，所 述遺傳變異是在IL6R的氨基酸序列（SEQ ID N0:1)中導(dǎo)致氨基酸置換D358A的SNP。