脂肪酰胺（I)的制備
[0027]
[0028] 式中R、R1選自：氫、氘、C1~C2烷基、C 3~C4直鏈或支鏈烷基；X1、X2、X4、X 6、X7、X9 選自：氫、氘或C1-C2烷基；X3選自：氟、氯、溴；X5選自：氰基；X s、Xw選自：氫、氘、C1-C2 烷基或硝基；X11選自：氫、氘、C1~C2烷基或氨基。
[0029] 按實(shí)施例1的方法制備N-(批啶-2-基）-2- (4-苯氧基苯氧基）脂肪酰胺（I)。
[0030] 實(shí)施例4
[0031] N-(吡啶-4-基）-2- (4-苯氧基苯氧基）脂肪酰胺（II )的制備
[0032]
[0033] 式中R、R1選自：氫、氘、C1~C2烷基、C 3~C4直鏈或支鏈烷基；X1、X2、X4、X 6、X7、X9 選自：氫、氘或C1-C2烷基；X3選自：氟、氯、溴；X5選自：氰基；X s、Xw選自：氫、氘、C1-C2 烷基或硝基；X11選自：氫、氘、C1~C2烷基或氨基。
[0034] 按實(shí)施例1的方法制備N-(批啶-4-基）-2- (4-苯氧基苯氧基）脂肪酰胺（II)。
[0035] 實(shí)施例5
[0036] 2- (4-苯氧基苯氧基）脂肪酰吡啶胺的抗腫瘤活性
[0037] 1.抗腫瘤活性原理
[0038] MTT法生物活性測試又稱MTT比色法，是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。MTT分 析法以活細(xì)胞代謝物還原劑噻唑藍(lán)[3_(4, 5-二甲基-2-噻唑）-2,5_二苯基溴化四氮唑； 3_(4, 5-dimethylthiazol_2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide，MTT]為基礎(chǔ)。MTT是 一種能接受氫原子的染料?；罴?xì)胞線粒體中與NADP相關(guān)的脫氫酶在細(xì)胞內(nèi)可將黃色的MTT 轉(zhuǎn)化成不溶性的藍(lán)紫色的甲瓚（formazon)，而死細(xì)胞則無此功能。用DMSO溶解formazon 后，在一定波長下用酶標(biāo)儀測定光密度值，既可定量測出細(xì)胞的存活率。根據(jù)光密度值的變 化觀察樣品對腫瘤細(xì)胞的抑制作用。
[0039] 2.抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)
[0040] 試樣：2_ (4-苯氧基苯氧基）脂肪酰吡啶胺（I或II):
[0041]
[0042] 式中R、R1選自：氫、氘、C1~C2烷基、C 3~C4直鏈或支鏈烷基；X1、X2、X4、X 6、X7、X9 選自：氫、氘或C1-C2烷基；X3選自：氟、氯、溴；X5選自：氰基；X s、Xw選自：氫、氘、C1-C2 烷基或硝基；X11選自：氫、氘、C1~C2烷基或氨基。
[0043] 細(xì)胞系：肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549 (中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院細(xì)胞庫提供）。
[0044]試劑：噻唑藍(lán)（MTT)、RPMI1640培養(yǎng)液、新生牛血清、抗生素（美國英杰生命技術(shù) 公司）；胰酶（美國AMRESC0公司）；96孔培養(yǎng)板（美國英杰生命技術(shù)公司）；二甲基亞砜 (美國Sigma公司）。
[0045] 儀器：HFsafe-1500型超凈工作臺、HF151UV型CO2培養(yǎng)箱（上海力申科學(xué)儀器有 限公司）；XSP-15C型倒置顯微鏡（上海長方光學(xué)儀器有限公司）；Multiskan MK3型酶標(biāo)儀 (美國Thermo公司）；超純水制備儀（美國Milli-Q公司）。
[0046] 實(shí)驗(yàn)操作：試樣對于癌細(xì)胞的測試。一次實(shí)驗(yàn)過程中，每種試樣設(shè)置5個濃度梯 度（1. 000 U mol/mL、0. 300 u mol/mL、0. 100 u mol/mL、0. 030 u mol/mL 和 0? 010 u mol/mL), 每個濃度四個平行試樣，每組實(shí)驗(yàn)平行3次，并通過空白組對照得出結(jié)論。酶標(biāo)儀檢測各孔 OD值，檢測波長570nm。
[0047] 3?抗腫瘤活性評價
[0048] 1)細(xì)胞抑制率計(jì)算：
[0049]
[0050] 2) IC50 值計(jì)算
[0051] 試樣濃度對數(shù)值與細(xì)胞抑制率線性回歸，利用軟件計(jì)算試樣對細(xì)胞的半數(shù)抑制濃 度IC5。值?；钚詼y試結(jié)果顯不N-(3-硝基批陡-2-基）_2_ [4-(4-氰基-2-氟苯氧基）苯 氧基]丙酰胺和N- (6-氨基-5-硝基吡啶-2-基）-2- [4- (4-氰基-2-氟苯氧基）苯氧基] 丙酰胺對肺腺癌細(xì)胞A549的IC5。分別為0. 012mM和0. 031mM。
[0052] 活性測試結(jié)果表明，2-(4-苯氧基苯氧基）脂肪酰吡啶胺對癌細(xì)胞具有良好的抑 制活性，可用于制備抗癌藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 化學(xué)結(jié)構(gòu)式I或式II所示的2-(4-苯氧基苯氧基）脂肪酰吡啶胺：式中R、R1選自：氫、氘、Q~C2烷基、C3~C4直鏈或支鏈烷基；X1、X2、X4、X6、X7、X9選 自：氫、氘或烷基；X3選自：氟、氯、溴；X5選自：氰基；XS、X1(]選自：氫、氘、(；~(：2烷 基或硝基；X11選自：氫、氘、Q~C2烷基或氨基；式I所示的2-(4-苯氧基苯氧基）脂肪酰 吡啶胺又名N-(批啶-2-基）-2- (4-苯氧基苯氧基）脂肪酰胺；式II所示的2- (4-苯氧基 苯氧基）脂肪醜批陡胺又名N-(批陡_4_基）_2_ (4-苯氧基苯氧基）脂肪醜胺。 2. N-(批啶-2-基）-2-(4-苯氧基苯氧基）脂肪酰胺（I)的制備方法，其特征在于它的 制備反應(yīng)如下：其中，R、R1、X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7、Xs、X9、X1(]和X11 的定義如權(quán)利要求 1 所述。 3. N-(批啶-4-基）-2-(4-苯氧基苯氧基）脂肪酰胺（II)的制備方法，其特征在于它 的制備反應(yīng)如下：其中，R、R1、X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7、Xs、X9、X1(]和X11 的定義如權(quán)利要求 1 所述。4. 權(quán)利要求1所述的2-(4-苯氧基苯氧基）脂肪酰吡啶胺在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。 5. N- (3-硝基吡陡-2-基）-2- [4- (4-氰基-2-氟苯氧基）苯氧基]丙酰胺在制備抗肺 腺癌藥物中的應(yīng)用。 6. N- (6-氨基-5-硝基吡啶-2-基）-2- [4- (4-氰基-2-氟苯氧基）苯氧基]丙酰胺在 制備抗肺腺癌藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及化學(xué)結(jié)構(gòu)式I或式Ⅱ所示的2-(4-苯氧基苯氧基)脂肪酰吡啶胺：式中R、R1選自：氫、氘、C1～C2烷基、C3～C4直鏈或支鏈烷基；X1、X2、X4、X6、X7、X9選自：氫、氘或C1～C2烷基；X3選自：氟、氯、溴；X5選自：氰基；X8、X10選自：氫、氘、C1～C2烷基或硝基；X11選自：氫、氘、C1～C2烷基或氨基；2-(4-苯氧基苯氧基)脂肪酰吡啶胺在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。
【IPC分類】A61K31/44, A61K31/4409, A61P35/00, C07D213/75, A61P11/00, A61K31/4402
【公開號】CN105085386
【申請?zhí)枴緾N201410208259
【發(fā)明人】胡艾希, 方毅林, 劉祈星, 丁娜
【申請人】湖南大學(xué)
【公開日】2015年11月25日
【申請日】2014年5月16日