一種鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明公開(kāi)了一種鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑的制備方法，屬于產(chǎn)品精深加工及其副產(chǎn)物綜合利用的技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來(lái)，由于化學(xué)抗氧化添加劑的不安全性和食品安全的考慮，化學(xué)抗氧化添加劑如BHA、BHT和TBHQ等的應(yīng)用受到了較大的限制。因此，高效、低毒的天然食品抗氧化劑的開(kāi)發(fā)成為研究熱點(diǎn)領(lǐng)域。
[0003]目前，已從各種植物、動(dòng)物組織中提取得到了抗氧化活性顯著的物質(zhì)，如茶葉中的茶多酚、大豆中的異黃酮、枸杞中的多糖等物質(zhì)，而已有的研究發(fā)現(xiàn)，生物體內(nèi)天然多肽也具有顯著的抗氧化活性，比如鮑魚(yú)。鮑魚(yú)，最常用的是指一種原始的海洋貝類(lèi)，屬于單殼軟體動(dòng)物，其只有半面外殼，殼堅(jiān)厚、扁而寬，鮑魚(yú)是中國(guó)傳統(tǒng)的名貴食材，位居四大海味之首，它的內(nèi)臟也是極其富有營(yíng)養(yǎng)的，含有生物蛋白抗氧化肽，抗氧化肽穩(wěn)定性比較差、在高溫、潮濕等條件下極易發(fā)生變性反應(yīng)，這使得性肽的應(yīng)用受到了很大的影響。因此為了延長(zhǎng)功能肽的作用時(shí)間和效果，并增加肽的穩(wěn)定性，對(duì)肽進(jìn)行微囊化可以起到緩釋和提高其穩(wěn)定性的作用。
[0004]海藻酸鈉載體適合于有生物活性的蛋白質(zhì)類(lèi)食品，且其來(lái)源豐富，成本低廉，是很有前途的緩釋載體，是一種極其適合的微膠囊壁材，而氯化鈣的來(lái)源也非常廣泛，價(jià)格低廉，且能與海藻酸鈉能夠很好的結(jié)合，從而增強(qiáng)其微囊的穩(wěn)定性，加強(qiáng)其緩釋放性能。因此，我們采用海藻酸鈉和氯化鈣結(jié)合法制備大豆抗氧化肽微膠囊。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問(wèn)題:針對(duì)目前化學(xué)抗氧化劑的應(yīng)用受到了較大的限制，因而轉(zhuǎn)為從各種植物和動(dòng)物組織中提取抗氧化活性顯著的物質(zhì)，但是提取出來(lái)的抗氧化肽穩(wěn)穩(wěn)定性比較差、在高溫和潮濕的條件下極易發(fā)生變性反應(yīng)，影響應(yīng)用的弊端，提供了一種鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑的制備方法，該方法以鮑魚(yú)內(nèi)臟為原料，通過(guò)脫脂、除蛋白處理后，用熱水浸提高速離心和透析后得到鮑魚(yú)內(nèi)臟抗氧化鈦粉末，之后將其與海藻酸鈉充分混合溶解后逐滴加入到氯化鈣中，形成凝膠小球?qū)⒌鞍纂陌?，最后真空干燥得到一種鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑。該方法制得的抗氧化劑不僅安全無(wú)毒副作用，穩(wěn)定性比較好，而且抗氧化活性強(qiáng)，在高溫和潮濕的情況下也不會(huì)變性。
[0006]為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
(1)取海鮮加工廠(chǎng)遺留的鮑魚(yú)內(nèi)臟，用去離子水浸泡沖洗3?5次，之后放入水浴鍋中，升溫至70?80°C，水熱脫除內(nèi)臟表皮脂肪，水浴時(shí)間為I?2h，再將初步脫脂的鮑魚(yú)內(nèi)臟移入組織粉碎機(jī)中進(jìn)彳丁粉碎;
(2)取50?10g粉碎后的鮑魚(yú)內(nèi)臟放入IL的燒杯中，加入300?400mL質(zhì)量濃度為6?7%的碳酸鈉溶液，用玻璃棒攪拌10?15min后過(guò)濾得鮑魚(yú)內(nèi)臟漿液，繼續(xù)用體積比為I: I的異丙醇水溶液漂洗4?5h，以進(jìn)一步脫除鮑魚(yú)內(nèi)臟組織間的脂肪；
(3)將上述脫脂后的鮑魚(yú)內(nèi)臟漿液用200?300mL質(zhì)量濃度為4?6%的氯化鈉溶液浸泡，搖床振蕩反應(yīng)12?24h，去除鮑魚(yú)內(nèi)臟中的雜蛋白；
(4)稱(chēng)取20?30g上述處理后的鮑魚(yú)內(nèi)臟漿液放入500mL燒杯中，加入200?300mL雙蒸水，油浴升溫至100?110°C，熱水浸提10?12h后移入臥式離心機(jī)，以9000?1000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理15?20min，分離得到上清液；
(5)稱(chēng)取15?35g硫酸銨加入到上清液中，緩慢攪拌析出鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽，之后放入離心機(jī)，以4000?5000r/min的轉(zhuǎn)速離心分離得到鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽，將蛋白肽沉淀重新溶解后裝入透析袋，在流動(dòng)水中透析20?30h，直至透析液不能讓氯化鋇溶液變渾濁為止，之后將透析袋中的鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度為180?200°C，出風(fēng)溫度為80?90°C，干燥后放入研缽研磨成粉，即得到具有強(qiáng)抗氧化性的鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽粉末；
(6)稱(chēng)取10?20g海藻酸鈉放入500mL燒杯中，加入200?300mL蒸餾水，移入水浴鍋，升溫至40?50°C，用磁力攪拌機(jī)攪拌10?15min，攪拌轉(zhuǎn)速為300?400r/min，使海藻酸鈉充分溶解，之后降低攪拌轉(zhuǎn)速至200?300r/min，在攪拌狀態(tài)下加入20?40g上述制得的鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽粉末，繼續(xù)攪拌10?20min，制得鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽海藻酸鈉混合液；
(7)將上述制得的混合液一滴一滴的加入到質(zhì)量濃度為90%的氯化鈣溶液中，邊滴加邊晃動(dòng)燒杯，使混合液滴凝聚成均勻小球，之后過(guò)濾分離得到蛋白肽凝膠小球，用去離子水沖洗3?5次后用真空冷凍干燥機(jī)干燥，即得一種鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑。
[0007]本發(fā)明的應(yīng)用方法是:將本發(fā)明所制得的一種鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑均勻放置在肉類(lèi)柜臺(tái)中，其中每隔80?120cm處放置10?15g抗氧化劑，I?2天即可發(fā)現(xiàn)放置抗氧化劑的肉類(lèi)柜臺(tái)中的肉比沒(méi)有放置抗氧化劑的肉類(lèi)柜臺(tái)中的肉，顏色更加鮮艷，色澤更加誘人，大大延長(zhǎng)了肉類(lèi)貨柜期。
[0008]本發(fā)明的有益效果是:
(1)本發(fā)明制得的抗氧化劑不僅安全無(wú)毒副作用，穩(wěn)定性比較好，而且抗氧化活性強(qiáng)，在高溫和潮濕的情況下也不會(huì)變性；
(2)將本發(fā)明制得的抗氧化劑用于肉類(lèi)食品的保鮮方面，效果顯著，可以提高肉類(lèi)80%以上的貨柜期。
【具體實(shí)施方式】
[0009]首先取海鮮加工廠(chǎng)遺留的鮑魚(yú)內(nèi)臟，用去離子水浸泡沖洗3?5次，之后放入水浴鍋中，升溫至70?80°C，水熱脫除內(nèi)臟表皮脂肪，水浴時(shí)間為I?2h，再將初步脫脂的鮑魚(yú)內(nèi)臟移入組織粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎；然后取50?10g粉碎后的鮑魚(yú)內(nèi)臟放入IL的燒杯中，加入300?400mL質(zhì)量濃度為6?7%的碳酸鈉溶液，用玻璃棒攪拌10?15min后過(guò)濾得鮑魚(yú)內(nèi)臟漿液，繼續(xù)用體積比為I: I的異丙醇水溶液漂洗4?5h，以進(jìn)一步脫除鮑魚(yú)內(nèi)臟組織間的脂肪；之后將上述脫脂后的鮑魚(yú)內(nèi)臟漿液用200?300mL質(zhì)量濃度為4?6%的氯化鈉溶液浸泡，搖床振蕩反應(yīng)12?24h，去除鮑魚(yú)內(nèi)臟中的雜蛋白；隨后稱(chēng)取20?30g上述處理后的鮑魚(yú)內(nèi)臟漿液放入500mL燒杯中，加入200?300mL雙蒸水，油浴升溫至100?110°C，熱水浸提10?12h后移入臥式離心機(jī)，以9000?10000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理15?20min，分離得到上清液；接下來(lái)稱(chēng)取15?35g硫酸銨加入到上清液中，緩慢攪拌析出鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽，之后放入離心機(jī)，以4000?5000r/min的轉(zhuǎn)速離心分離得到鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽，將蛋白肽沉淀重新溶解后裝入透析袋，在流動(dòng)水中透析20?30h，直至透析液不能讓氯化鋇溶液變渾濁為止，之后將透析袋中的鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度為180?200°C，出風(fēng)溫度為80?90°C，干燥后放入研缽研磨成粉，即得到具有強(qiáng)抗氧化性的鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽粉末；稱(chēng)取10?20g海藻酸鈉放入500mL燒杯中，加入200?300mL蒸餾水，移入水浴鍋，升溫至40?50°C，用磁力攪拌機(jī)攪拌10?15min，攪拌轉(zhuǎn)速為300?400r/min，使海藻酸鈉充分溶解，之后降低攪拌轉(zhuǎn)速至200?300r/min，在攪拌狀態(tài)下加入20?40g上述制得的鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白妝粉末，繼續(xù)攬摔10?20min，制得鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白妝海操酸納混合液；最后將上述制得的混合液一滴一滴的加入到質(zhì)量濃度為90 %的氯化鈣溶液中，邊滴加邊晃動(dòng)燒杯，使混合液滴凝聚成均勻小球，之后過(guò)濾分離得到蛋白肽凝膠小球，用去離子水沖洗3?5次后用真空冷凍干燥機(jī)干燥，即得一種鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽抗氧化劑。
[0010]實(shí)例I
首先取海鮮加工廠(chǎng)遺留的鮑魚(yú)內(nèi)臟，用去離子水浸泡沖洗3次，之后放入水浴鍋中，升溫至70°C，水熱脫除內(nèi)臟表皮脂肪，水浴時(shí)間為lh，再將初步脫脂的鮑魚(yú)內(nèi)臟移入組織粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎；然后取50g粉碎后的鮑魚(yú)內(nèi)臟放入IL的燒杯中，加入300mL質(zhì)量濃度為6%的碳酸鈉溶液，用玻璃棒攪拌1min后過(guò)濾得鮑魚(yú)內(nèi)臟漿液，繼續(xù)用體積比為1:1的異丙醇水溶液漂洗4h，以進(jìn)一步脫除鮑魚(yú)內(nèi)臟組織間的脂肪；之后將上述脫脂后的鮑魚(yú)內(nèi)臟漿液用200mL質(zhì)量濃度為4%的氯化鈉溶液浸泡，搖床振蕩反應(yīng)12h，去除鮑魚(yú)內(nèi)臟中的雜蛋白；隨后稱(chēng)取20g上述處理后的鮑魚(yú)內(nèi)臟漿液放入500mL燒杯中，加入200mL雙蒸水，油浴升溫至100°C，熱水浸提1h后移入臥式離心機(jī)，以9000r/min的轉(zhuǎn)速離心處理15min，分離得到上清液；接下來(lái)稱(chēng)取15g硫酸銨加入到上清液中，緩慢攪拌析出鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽，之后放入離心機(jī)，以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心分離得到鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽，將蛋白肽沉淀重新溶解后裝入透析袋，在流動(dòng)水中透析20h，直至透析液不能讓氯化鋇溶液變渾濁為止，之后將透析袋中的鮑魚(yú)內(nèi)臟蛋白肽噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為80°C，干燥后放入研缽研磨成粉，即得到具有強(qiáng)抗氧化性的鮑魚(yú)