一株耐鹽芽孢桿菌及其在高鹽廢水處理中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及環(huán)保技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種微生物新菌種芽孢桿菌#.)CCZU-R6,以及該耐鹽菌在高鹽廢水中處理廢水的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 淡水資源危機(jī)問題，已成為制約我國沿海地區(qū)經(jīng)濟(jì)和社會發(fā)展的"瓶頸"。同時，隨 著工業(yè)的發(fā)展和水資源的缺乏，一些工業(yè)行業(yè)所產(chǎn)生的高鹽生產(chǎn)廢水，如石油開采廢水、染 料加工廢水、食品加工廢水等，其污染物濃度越來越高，成份也越來越復(fù)雜，排放量也將越 來越大，給生態(tài)環(huán)境造成的壓力也逐漸加大。
[0003] 目前對于高鹽度廢水采用的處理方法有：電解法、膜分離法、焚燒法或深井灌注 法，但這些方法因處理費用高而難于在實際中推廣。生物處理法是目前廢水處理最常用的 方法之一，是一種成熟有效的廢水處理技術(shù)，主要是利用微生物的新陳代謝功能，通過微 生物的吸附、降解廢水中的有機(jī)污染物，將廢水中呈溶解、膠體以及微細(xì)懸浮狀態(tài)的有機(jī) 物、有毒物等污染物質(zhì)，轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定、無害的物質(zhì)的廢水處理方法，具有較高的經(jīng)濟(jì)優(yōu)勢、無 二次污染的特點。但是普通的微生物不具有耐鹽特點，難以適合采油廢水等類似高鹽度廢 水的處理。
[0004] 隨著耐鹽高效降解菌的分離篩選和生物處理工藝的改進(jìn)完善，生物法處理廢水顯 示出相當(dāng)高的競爭優(yōu)勢和應(yīng)用潛力，具有處理成本低、適應(yīng)性強(qiáng)且運(yùn)行較為穩(wěn)定等優(yōu)點。
[0005] 為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種新型耐鹽高效降解菌，該菌用于處理高鹽 廢水耗時短，效果好，且處理成本低。
[0006]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 發(fā)明目的：本發(fā)明目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種可供處理高鹽廢水的 耐鹽菌，以及該菌株在處理高鹽廢水中的應(yīng)用，其反應(yīng)條件溫和、工藝簡單易行、高效可靠。
[0008] 本發(fā)明為了達(dá)到上述目的所采用的技術(shù)方案是： 本發(fā)明所述的一種耐鹽廢水菌芽孢桿菌（你ciWM耶.）CCZU-R6,保藏于位于北京市 朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所內(nèi)的中國微生物菌種保藏管理委員會 普通微生物中心（CGMCC)，保藏日期2015年5月18日，保藏號CGMCC10813。
[0009] 該芽孢桿菌（你ciWM耶.）CCZU-R6菌落特征：光學(xué)顯微鏡下菌株呈桿狀，瓊脂 平板培養(yǎng)基上呈淡紅色，較濕潤，邊緣整齊、圓形，小而凸起。
[0010] 菌株來源：本發(fā)明中所述的微生物菌株芽孢桿菌CCZU-R6是從吉林市某煤化工廠 的廢水中篩選得到的。
[0011] 將上述芽孢桿菌CCZU-R6在高鹽廢水的處理方法，按照如下步驟進(jìn)行的： (1)芽孢桿菌濕菌體的制備 將芽孢桿菌CCZU-R6活化培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)后得到發(fā)酵培養(yǎng)液，經(jīng)離心得到芽孢桿菌 CCZU-R6濕菌體，用pH5~9的磷酸鹽緩沖液配制成濃度菌懸液； (2) 在投加耐鹽菌前，待處理廢水的處理 抽濾2~3次后，在廢水中加入l~2mol/L的NaOH調(diào)pH至7. 0左右； (3) 往待處理廢水中投加耐鹽菌 在步驟（2)廢水中加入步驟（1)所述的濕菌體，放入搖床有氧培養(yǎng)，溫度20~50°C，搖床 轉(zhuǎn)速100~250r/min條件下培養(yǎng)l~40h; (4) 耐鹽菌處理廢水效果的測定 在步驟（3)投加耐鹽菌后，定時取樣測定耐鹽菌作用前后廢水中污染物的變化值，測定 方法：測定化學(xué)需氧量C0D，得到廢水COD由未處理前的700mg/L降至50mg/L以下。
[0012] 作為本發(fā)明的限定，在上述步驟（1)中活化培養(yǎng)是按照以下步驟進(jìn)行的：將活 化培養(yǎng)基的各組分按照以下濃度配制：酵母浸出粉l〇~l〇〇g/L，蛋白胨10~100g/L，NaCl 10~100g/L，pH自然，121°C滅菌20分鐘，滅菌后冷卻，接入斜面種子，在20~40°C，搖床轉(zhuǎn)速 100~250r/min的條件下培養(yǎng)1~3天，作為活化培養(yǎng)種子液。
[0013] 在上述步驟（1)中發(fā)酵培養(yǎng)是按以下步驟制備的：將發(fā)酵培養(yǎng)基的各組分按照以 下濃度配制：蔗糖 10 ~l〇〇g/L，蛋白胨 10 ~100g/L，NaC110~100g/L，pH5~9，121°C滅菌 20 分鐘，滅菌后冷卻，按接種量體積比3~10%接種活化培養(yǎng)種子液，在溫度20~40°C，搖床轉(zhuǎn)速 100~250r/min的條件下培養(yǎng)1~3天后，得發(fā)酵培養(yǎng)液。
[0014] 在上述步驟（3)中芽孢桿菌CCZU-R6在高鹽廢水處理中的應(yīng)用，其特征在于步驟 (3)中所述的濕菌體的加入量為0. 5~1. 5g/L。
[0015] 本發(fā)明的廢水處理效果分析方法：重鉻酸鉀法COD測定。消解條件為：120°C消解 60min〇
[0016] 采用上述的技術(shù)方案后，本發(fā)明取得的有益效果是，通過實驗室篩選獲得的耐鹽 性芽孢桿菌（Bacillus耶.）CCZU-R6,用磷酸鹽緩沖溶液配成菌懸液后投加到高含鹽廢水 處理廢水，廢水C0D由未處理前的700mg/L降至50mg/L以下，尤其5g/L接菌量，處理時間 一天，廢水C0D去除率達(dá)到93%以上。在廢水中加入0. 5~1. 5g/L的濕菌體，可以自行廢水 處理，成本低廉，對設(shè)備要求不高，在工業(yè)上是一種有效的降解高難度有機(jī)廢水的新方法。
[0017]
【具體實施方式】
[0018] 本發(fā)明將就以下實施例作進(jìn)一步說明，但應(yīng)該了解的是，這些實施僅為例示說明 之用，而不應(yīng)被解釋為本發(fā)明實施的限制。
[0019] 實施例1 :芽孢桿菌5/7. )CCZU-R6的分離馴化 1、樣品 廢水樣品：吉林市某煤化工廠的廢水。
[0020] 2、培養(yǎng)基 分尚培養(yǎng)基：牛肉霄蛋白胨培養(yǎng)基。
[0021] 馴化培養(yǎng)基：含鹽5~14g/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基。
[0022] 無機(jī)鹽培養(yǎng)基：葡萄糖 5g，氯化銨lg/L、K2HP04 0? 5g/L、MgS04 0? 5g/L、FeS04 0.01g/L、CaCl2 0.01g/L、NaCl0.998g/L、蒸餾水 100mL、pH7.0。
[0023] 3、分離純化和馴化培養(yǎng)操作 取廢水樣品1mL作為原始菌源，采用常規(guī)的逐量分批馴化進(jìn)行人工篩選和馴化，具體 操作包括：取〇. 2mL原始菌源涂布于牛肉膏蛋白胨瓊脂平板培養(yǎng)基中，30°C、180r/min條件 下培養(yǎng)一天，轉(zhuǎn)接牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)一天；并依次將所培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)接入5g/ L、6g/L、7g/L、8g/L、9g/L、10g/L、llg/L、12g/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基當(dāng)中，直至無機(jī)鹽濃度達(dá)到 所要求濃度12g/L;取最終獲得的菌液，先取lmL加入到9mL的無菌水中，制成10 1的稀釋 液，再從10 1的稀釋液中同樣取lmL加入到9mL的無菌水中，制成10 2的稀釋液，以此類推， 對最終獲得的菌液做一系列梯度稀釋，并分別取〇. 2mL涂布于含鹽12g/L的無機(jī)鹽瓊脂平 板，得到生長較好的單菌落，通過劃線分離獲得純培養(yǎng)，編號為CCZU-R6。
[0024] 該芽孢桿菌（你ciWM耶.）CCZU-R6菌落特征：光學(xué)顯微鏡下菌株呈桿狀，瓊脂 平板培養(yǎng)基上呈淡紅色，較濕潤，邊緣整齊、圓形，小而凸起。菌株CCZU-R6經(jīng)鑒定為芽孢桿 菌。
[0025] 上述的芽孢桿菌（你ciWM耶.）CCZU-R6,保藏于位于北京市朝陽區(qū)北辰西路1 號院3號中國科學(xué)院微生物研究所內(nèi)的中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心 (CGMCC)，保藏日期2015年5月18日，保藏號CGMCC10813