一種黑果枸杞多糖提取物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及植物提取物領(lǐng)域，具體為一種具有滋陰強(qiáng)腎、明目滋肝、降脂、防癌、抗 衰老等功能的黑果構(gòu)杞多糖提取物及其制備方法。
【背景技術(shù)】 陽00引黑果構(gòu)杞是茄科構(gòu)杞屬黑果構(gòu)杞化ycium Ruthenicum Murr)的干燥果實(shí)，在中國 甘肅酒泉、青海東部、新疆中部、內(nèi)蒙古西部、寧夏和西藏等地皆有零星分布。它生長在人類 無法生存的荒山野嶺和河床沙灘，擁有著極強(qiáng)的生命力，青海格爾木的野生黑果構(gòu)杞被譽(yù) 為草原"軟黃金"。但隨著人類對大自然的開發(fā)，黑果構(gòu)杞的生存空間愈來愈少，造就了黑果 構(gòu)杞運(yùn)一珍稀珍貴的原生態(tài)高檔滋補(bǔ)佳品。其味甘、性平，具強(qiáng)腎、滋肝、明目、健胃、補(bǔ)腦、 抗衰和通經(jīng)的功能。維吾爾醫(yī)用其治療眩暈、視物昏花、腎虛陽瘡、身體虛弱等疾病。藏醫(yī) 用于治療屯、熱病、屯、臟病、降低膽固醇、興奮大腦神經(jīng)、增強(qiáng)免疫功能、防治癌癥、抗衰老、美 容養(yǎng)顏、月經(jīng)不調(diào)、停經(jīng)等且藥效顯著，也常用黑果構(gòu)杞果及根皮治療尿道結(jié)石、癖巧、齒銀 出血等癥。黑果構(gòu)杞果富含蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、游離氨基酸、有機(jī)酸、礦物質(zhì)、微量元素、生 物堿、維生素(：、81、82、巧、儀、銅、鋒、儘、鐵、鉛、儀、儒、鉆、銘、鐘、鋼等各種營養(yǎng)成分。黑果 構(gòu)杞同紅構(gòu)杞一樣能夠補(bǔ)腎益精，黑果構(gòu)杞中的花青素（Anthocyanosides)有清除自由基 的功效，亦可讓癌細(xì)胞無法順利擴(kuò)散，借此保護(hù)更多健康的細(xì)胞免于被癌細(xì)胞侵蝕。像是乳 腺癌的致病機(jī)制便是如此，因此服用花青素對于乳腺癌的發(fā)展會(huì)有很好的抑制作用。黑果 構(gòu)杞還可防治糖尿病，并具有明顯的抗疲勞、保肝、抗腫瘤、疏通血管、降壓和保護(hù)屯、血管系 統(tǒng)作用。特別是黑果構(gòu)杞多糖含量高，具有良好的保健價(jià)值和藥用價(jià)值。 陽003] 多糖（polysaccharide)又稱多聚糖，是由20個(gè)W上的單糖W糖昔鍵相連組成的 聚合物。它是組成高分子化合物家族中最豐富多彩的成員。多糖是來自于高等植物、動(dòng)物細(xì) 胞膜、微生物的細(xì)胞壁中的天然大分子物質(zhì)，是所有生命有機(jī)體的重要組成成分與維持生 命所必需的結(jié)構(gòu)材料。人們對糖的認(rèn)識首先是把它看作食物中的能量來源。對多糖的研究， 最早是在20世紀(jì)40年代，但其作為廣譜免疫促進(jìn)劑而引起人們的極大重視是在60年代， 經(jīng)過40余年的不斷發(fā)展，人們對多糖運(yùn)一類重要生命物質(zhì)產(chǎn)生了新的認(rèn)識，使運(yùn)一學(xué)科成 為目前生命科學(xué)中研究最活躍的領(lǐng)域之一。人們發(fā)現(xiàn)糖類在生物體中不僅是作為能量物質(zhì) 或結(jié)構(gòu)材料，更重要的是它參與了生命科學(xué)中細(xì)胞的各種活動(dòng)，具有多種多樣的生物功能。 因此糖的研究逐步活躍起來，其中，一些分子量在幾千W上，具有很強(qiáng)生物活性的活性多糖 的研究受到日益重視。運(yùn)些活性多糖的生理活性、化學(xué)結(jié)構(gòu)W及構(gòu)效關(guān)系成為多糖研究的 前沿陣地，并取得了很大的進(jìn)展?？茖W(xué)工作者逐漸發(fā)現(xiàn)多糖類化合物具有抗腫瘤、抗衰老、 抗感染、降血糖血脂和治療艾滋病等方面的生物活性。近年來，又發(fā)現(xiàn)多糖的糖鏈在控制細(xì) 胞的分裂和分化，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長和衰老方面起著決定性作用，多糖已逐漸顯示出越來越 廣泛的應(yīng)用前景。
[0004] 黑果構(gòu)杞多糖是黑果構(gòu)杞的主要有效成分，藥理與臨床研究十分引人矚目。黑果 構(gòu)杞多糖具有廣泛的藥理學(xué)作用，可促進(jìn)造血、降血脂、保肝及抗癌等作用明目滋肝、降脂、 防癌和抗衰老等功能。
[0005] 目前現(xiàn)有技術(shù)制備多糖常用的提取方法有：熱水浸提法、酸浸提法、堿浸提法和酶 法。運(yùn)些方法都存在著許多的問題，比如破壞了多糖結(jié)構(gòu)，多糖提取效率低下，提取時(shí)間過 長和提取的過程復(fù)雜等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種有效成分損失少、品質(zhì)高、提取成本低的黑果構(gòu)杞多糖 的提取方法。該方法提取出的黑果構(gòu)杞多糖具備具有滋陰強(qiáng)腎、明目滋肝、降脂、防癌和抗 衰老等功能。 陽007] 具體的，本發(fā)明的提取方法如下：
[0008] 一種黑果構(gòu)杞多糖的提取方法，其特征在于，采用黑果構(gòu)杞，經(jīng)破碎后，采用回流 法提取。
[0009] 一種黑果構(gòu)杞多糖的提取方法，其特征在于包括W下步驟：
[0010] 1、清理：將黑果構(gòu)杞篩除泥沙，用清水洗凈；
[0011] 2、干燥：將清洗干凈的黑果構(gòu)杞在5~30°C下低溫干燥10~24h;
[0012] 3、破碎：將步驟2得到的黑果構(gòu)杞進(jìn)行超微粉碎，得到顆粒粒徑范圍為1~75ym 粉末；
[0013] 4、除雜：將步驟3得到的粉末置于連續(xù)微波反應(yīng)器中450~650W功率下，用乙酸 回流提取15~30min，得到藥渣I;藥渣I用乙酸回流提取15~30min;得到藥渣II;將藥 渣II用乙醇回流提取得藥渣III;藥渣III揮干溶劑；
[0014] 5、提?。簩⒌玫降乃幵麵II加入10~15倍的水，置于超聲回流提取系統(tǒng)中，超聲 回流提取1~化，超聲功率0. 5~1. 5KW，提取溫度40~60。，得到濾液I; 陽01引 6、脫色：在濾液I中加入0. 1 %活性炭，脫色，得到濾液II;
[0016] 7、除蛋白：將濾液II用Sevage法除蛋白得到濾液III;
[0017]8、濃縮：將濾液III放至微波真空干燥器中，微波功率密度和真空度的取值范圍 為（2~8w/g)和化02~0.OSMpa)，得到黑果構(gòu)杞多糖濃縮提取液；
[0018] 9、純化：將經(jīng)過預(yù)處理的Dioi大孔樹脂濕法裝柱，取上述粗提液于0. 3~0. 9ml/ min的不同流速上樣，用80%濃度的乙醇W0. 4~1. 5ml/min的不同流速洗脫，將洗脫液合 并，濃縮，干燥即得純度較高的多糖提取物。
[0019] 第一步中，若不仔細(xì)清選，滲雜的泥沙枯葉等會(huì)影響提取效率。
[0020] 第二步中，低溫下進(jìn)行干燥，可W保證多糖有效成分的保存。
[0021] 第=步中，超微粉碎技術(shù)可W使粉末粒徑?。ㄒ话阍?5ymW下）且分布均勻，球 性度及均質(zhì)度明顯改善，松密度及比表面顯著提高，植物細(xì)胞破壁率高，黑果構(gòu)杞中的有效 成分（特別是難溶性成分）的溶解和釋放加快，有效成分的溶出速率加快。
[0022] 第五步中，結(jié)合了超聲與回流提取的優(yōu)勢，提取效率較高。
[0023] 此外，出于控制成本的考慮，本發(fā)明各步驟中的低溫干燥、回流、超聲、等均是成熟 的技術(shù)，操作簡單，易上手。但與現(xiàn)有技術(shù)相比，簡化了提取過程卻得到了較高的收率和品 質(zhì)很好的產(chǎn)品。
[0024] 優(yōu)選的，一種黑果構(gòu)杞多糖的提取方法，其特征在于包括W下步驟： 陽O巧]1、清理：將黑果構(gòu)杞Ikg篩除泥沙，用清水洗凈；
[0026] 2、干燥：將清洗干凈的黑果構(gòu)杞在20°C下低溫干燥IOh;
[0027] 3、破碎：對步驟2得到的黑果構(gòu)杞進(jìn)行超微粉碎，得到顆粒粒徑范圍為30ym粉 末；
[00測 4、除雜：將步驟3得到的粉末置于連續(xù)微波反應(yīng)器中450W功率下，用乙酸回流提 取20min，得到藥渣I;藥渣I用乙酸回流提取20min;得到藥渣II;將藥渣II用乙醇回流 提取得藥渣III;藥渣III揮干溶劑；
[0029] 5、提?。簩⒌玫降乃幵麳I加入10倍的水，置于超聲回流提取系統(tǒng)中，超聲回流提 取比，超聲功率0. 5KW，提取溫度40°，得到濾液I;
[0030] 6、脫色：在濾液I中加入0. 1 %活性炭，脫色，得到濾液II;
[0031] 7、除蛋白：將濾液II用Sevage法除蛋白得到濾液III;
[0032]8、濃縮：將濾液HI放至微波真空干燥器中，微波功率密度8w/g和0.02Mpa，得到 黑果構(gòu)杞多糖濃縮提取液；
[0033] 9、純化：將經(jīng)過預(yù)處理的DlOl大孔樹脂濕法裝柱，取上述粗提液于0. 3ml/min的 流速上樣，用80 %濃度的乙醇W1. 5ml/min的流速洗脫，將洗脫液合并，濃縮，干燥即得純 度較高的多糖提取物。
[0034] 優(yōu)選的，一種黑果構(gòu)杞多糖的提取方法，其特征在于包括W下步驟：
[0035] 1、清理：將黑果構(gòu)杞Ikg篩除泥沙，用清水洗凈；
[0036] 2、干燥：將清洗干凈的黑果構(gòu)杞在30°C下低溫干燥IOh;
[0037] 3、破碎：對步驟2得到的黑果構(gòu)杞進(jìn)行超微粉碎，得到顆粒粒徑范圍為35ym粉 末；
[00測 4、除雜：將步驟3得到的粉末置于連續(xù)微波反應(yīng)器中500W功率下，用乙酸回流提 取25min，得到藥渣I;藥渣I用乙酸回流提取25min;得到藥渣II;將藥渣II用乙醇回流 提取得藥渣III;藥渣III揮干溶劑；
[0039] 5、提?。簩⒌玫降乃幵麵II加入9倍的水，置于超聲回流提取系統(tǒng)中，超聲回流提 取1.化，超聲功率1. 5KW，提取溫度50°，得到濾液I; W40] 6、脫色：在濾液I中加入0. 1 %活性炭，脫色，得到濾液II;
[0041] 7、除蛋白：將濾液II用Sevage法除蛋白得到濾液III;
[0042]8、濃縮：將濾液HI放至微波真空干燥器中，微波功率密度5w/g和0.05Mpa，得到 黑果構(gòu)杞多糖濃縮提取液；
[00創(chuàng) 9、純化：將經(jīng)過預(yù)處理的DlOl大孔樹脂濕法裝柱，取上述粗提液于0.SmVmin的 流速上樣，用80%濃度的乙醇W1.OmVmin的流速洗脫，將洗脫液合并，濃縮，干燥即得純 度較高的多糖提取物。
【具體實(shí)施方式】
[0044]W下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加W限定。
[0045] 實(shí)施例1 :黑果構(gòu)杞多糖的制備
[0046] 1、清理：將黑果構(gòu)杞化g篩除泥沙，用清水洗凈；
[0047] 2、干燥：將清洗干凈的黑果構(gòu)杞在30°C下低溫干燥