一種煙草內(nèi)生生防菌的接種方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于煙草病害防治技術(shù)領(lǐng)域,具體設(shè)及一種煙草內(nèi)生生防菌的接種方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物內(nèi)生菌是指在其生活史的一定階段或全部階段,生活于健康植物的各種組織 和器官的細(xì)胞間隙或細(xì)胞內(nèi)的微生物,包括植物內(nèi)生真菌、內(nèi)生細(xì)菌和內(nèi)生放線菌。植物內(nèi) 生菌幾乎存在于所有已研究過的植物中,分布廣,種類多。內(nèi)生菌產(chǎn)生豐富多樣的次生代謝 產(chǎn)物,具有多種生物活性,在農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥業(yè)具有重要的應(yīng)用潛力。內(nèi)生菌與其寄主植物共同 進(jìn)化,生活在植物體內(nèi),植物為內(nèi)生菌提供了一個穩(wěn)定且有保護(hù)性的環(huán)境和充足的營養(yǎng)來 源,運些特性使其有可能作為潛在的生防因子而加W研究和利用。
[0003] 具有生物防治作用的內(nèi)生菌稱為內(nèi)生生防菌。用內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行生物防治的原理, 主要是利用內(nèi)生細(xì)菌在植物體內(nèi)產(chǎn)生的一些抗生素對病原菌的括抗作用,有些內(nèi)生細(xì)菌能 產(chǎn)生殺菌蛋白,也能起到殺滅病原菌的作用;有些內(nèi)生細(xì)菌能產(chǎn)生幾下質(zhì)酶,可W裂解真菌 性病原菌的細(xì)胞壁從而起到生防作用。另外,內(nèi)生細(xì)菌定殖在植物體內(nèi)實際上是占據(jù)了植 物體內(nèi)的生態(tài)位點,由于位點和生存空間的限制,阻止了病原菌的入侵和定殖。內(nèi)生細(xì)菌還 可W與病原菌形成營養(yǎng)競爭的對抗關(guān)系,使病原菌因得不到正常的營養(yǎng)供給而消亡。
[0004] 煙草是葉用經(jīng)濟(jì)作物,對煙草的外觀和內(nèi)在質(zhì)量有特殊的要求,農(nóng)藥殘留、病原菌 抗藥性W及對卷煙衛(wèi)生的影響限制了農(nóng)藥的大規(guī)模使用,因此有必要探討煙草病害的最佳 控制途徑,尋找新的防治措施W克服煙葉農(nóng)藥殘留和病原菌抗藥性問題。煙草內(nèi)生菌種類 較多,是寶貴的微生物資源庫,在煙草病害生物防治、煙草促生菌劑開發(fā)及降低煙草有害物 質(zhì)等方面有著巨大的應(yīng)用潛力??蒞人工篩選對病原菌有抑制作用的內(nèi)生菌,得到具有防 病活性的內(nèi)生生防菌。通過人工接種方法將具有防病活性的內(nèi)生菌接種到煙草植株內(nèi),發(fā) 揮內(nèi)生菌的防病作用。 陽〇化]目前,常用的人工接種內(nèi)生菌的方法主要有W下Ξ種:一是灌根接種法,用內(nèi)生菌 懸浮液誘灌植株根際,可W使內(nèi)生菌進(jìn)入植物根莖內(nèi);二是浸種接種法,在播種前將植物的 種子在含有內(nèi)生菌懸浮液中浸泡一定時間,在生長出得植物體內(nèi)可W檢測到被標(biāo)記的內(nèi)生 菌;Ξ是涂抹或噴灑葉片接種法,將內(nèi)生菌液涂抹或噴灑至植物葉片,也可將內(nèi)生菌菌株接 種至多種植物體內(nèi)。上述方法都是在不損傷植物的前提下進(jìn)行外部接種的方法,接種成功 率低,內(nèi)生生防菌在植株體內(nèi)的定殖成活率低,防病效果差,不適合大規(guī)模使用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種煙草內(nèi)生生防菌的接種方法,接種成功率高,內(nèi)生生防 菌在植株體內(nèi)的定殖成活率高,防病效果好,適合大規(guī)模應(yīng)用。
[0007] 為了實現(xiàn)W上目的,本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
[0008] 一種煙草內(nèi)生生防菌的接種方法,包括在煙草剪葉后,將煙草內(nèi)生生防菌菌液噴 灑或涂抹至煙草剪葉傷口,使煙草內(nèi)生生防菌通過剪葉傷口定殖到煙草植株內(nèi)。
[0009] 煙草剪葉是煙草幼苗在移栽定植前對葉片進(jìn)行適當(dāng)剪除,是現(xiàn)代煙草種植中必要 的環(huán)節(jié)。剪葉的作用主要是:培育更發(fā)達(dá)的根系;獲得更粗壯的莖;使幼苗個體間均衡生 長;控制早花;使幼苗更適應(yīng)定植等。利用煙苗地上部和地下部的相關(guān)性原理,通過剪葉調(diào) 控?zé)熋缟a(chǎn),避免形成高腳苗,增加莖粗、促進(jìn)根系發(fā)育,提高抗逆性。
[0010] 煙草剪葉的操作可采用本領(lǐng)域常規(guī)剪葉技術(shù)根據(jù)煙苗長勢長相進(jìn)行;當(dāng)當(dāng)煙苗生 長到五葉一屯、,莖高至少5cm,完全封盤之時開始第一次剪葉;之后5~7天剪第二次,依此 類推,最后一次剪葉宜在移栽前5天左右;天氣而言,晴天上午,而且必須在露水干后進(jìn)行。
[0011] 本發(fā)明的煙草內(nèi)生生防菌的接種方法,在原有煙草種植必須剪葉的基礎(chǔ)上,在煙 草剪葉后,將煙草內(nèi)生生防菌菌液噴灑或涂抹至煙草剪葉傷口,煙草內(nèi)生生防菌很容易通 過剪葉傷口定殖到煙草植株內(nèi),接種成功率高,內(nèi)生生防菌在植株體內(nèi)的定殖成活率高,從 而達(dá)到顯著的防治病害的效果;不需要對煙草植株造成額外的機(jī)械傷口,操作簡單,省時省 力,適合大規(guī)模應(yīng)用;可W在剪葉的同時進(jìn)行剪葉傷口接種,避免了其他病原菌通過剪葉傷 口進(jìn)入煙草植株內(nèi),從而避免了剪葉傷口受病毒、細(xì)菌等雜菌的浸染,防止病害的傳染,在 實際生產(chǎn)中具有廣泛的應(yīng)用價值。
[0012] 所述的煙草內(nèi)生生防菌的接種方法中,在煙草剪葉后化內(nèi),將煙草內(nèi)生生防菌菌 液噴灑或涂抹至煙草剪葉傷口。上述接種方法中,優(yōu)選在煙草剪葉之后立即將煙草內(nèi)生生 防菌菌液噴灑或涂抹至煙草剪葉傷口,避免剪葉傷口受病毒、細(xì)菌等雜菌的浸染;如間隔時 間過長,其他病原菌通過剪葉傷口進(jìn)入煙草植株內(nèi),接種時還要對傷口進(jìn)行人工消毒,不僅 費時費力,而且農(nóng)藥消毒會對煙草、環(huán)境及人類造成安全隱患,農(nóng)藥殘留會給卷煙衛(wèi)生帶來 不良影響。
[0013] 所述煙草內(nèi)生生防菌為煙草內(nèi)生細(xì)菌。優(yōu)選的,所述煙草內(nèi)生生防菌菌液中所 含的煙草內(nèi)生生防菌為解淀粉芽抱桿菌或煙草賴氨酸芽抱桿菌。所述的解淀粉芽抱桿菌 優(yōu)選為專利文件CN102925393B記載的兼抗根結(jié)線蟲和煙草疫霉的煙草內(nèi)生菌-解淀粉芽 抱桿菌BacillusamyloliquefaciensZY-9-13菌株;所述的煙草賴氨酸芽抱桿菌優(yōu)選為 專利文件CN102851245B記載的抗煙草青枯病的煙草內(nèi)生菌菌株-煙草賴氨酸芽抱桿菌 化ysinibacillustobaccocum化pa菌株。相對應(yīng)的煙草內(nèi)生生防菌菌液的制備方法可參照 專利文件CN102925393B、CN102851245B的記載。
[0014] 所述煙草內(nèi)生生防菌菌液中,煙草內(nèi)生生防菌的活菌數(shù)不低于IXl〇Sc化/ml。
[0015] 所述煙草內(nèi)生生防菌菌液的噴灑或涂抹量為1~1. 5ml/株。
[0016] 本發(fā)明的煙草內(nèi)生生防菌的接種方法中,適用的煙草內(nèi)生生防菌并不局限于上述 所列,現(xiàn)有技術(shù)中用于煙草生物防治的煙草內(nèi)生生防菌都是可用的;優(yōu)選的,所述煙草內(nèi)生 生防菌優(yōu)選芽抱桿菌類生防菌。
【具體實施方式】
[0017] 下面結(jié)合【具體實施方式】對