LC監(jiān)測原料點消失后終止反應(yīng)。反應(yīng)物冷卻至室溫，減 壓過濾，濾液減壓濃縮至干，得12. 384g(95%)目標(biāo)化合物，為黃色固體。ESI-MS(m/e):345. 2[M+H]+。
[0035] 實施例4制備1-(4-異丙基苯基）-β-咔啉-3-羧酸（4)
[0036] 稱10. 320g(30mmol) 1-(4-異丙基苯基）-β -咔啉-3-羧酸甲酯加入250mL爺瓶 中，用100mL甲醇溶解，滴加氫氧化鈉水溶液（2M)至pH12,室溫反應(yīng)24h。TLC監(jiān)測原料消 失后終止反應(yīng)。冰浴下，反應(yīng)液用飽和硫酸氫鉀水溶液調(diào)pH至7,減壓濃縮除去溶劑，殘留 物加20mL蒸餾水溶解，再用飽和硫酸氫鉀水溶液調(diào)pH至2,用乙酸乙酯萃取3次，合并的乙 酸乙酯層用飽和氯化鈉水溶液萃洗3次。乙酸乙酯層用無水硫酸鈉干燥。減壓過濾，濾液 減壓濃縮至干，得9. llg(92%)目標(biāo)化合物，為淡黃色固體。ESI-MS(m/e) :329. 2[M-H]。
[0037] 實施例 5 制備 HC1 · Trp-Trp-Trp-〇Bzl
[0038] 1)制備L-色氨酸芐酯磷酸鹽
[0039] 向500mL爺瓶中依次加入16. 900g(50mmol)多聚磷酸,80mL苯甲醇和 10. 200g (50mmol) L-色氨酸。置于油浴中加熱至75°C，48h后TLC監(jiān)測原料點消失，終止反 應(yīng)。反應(yīng)物冷卻至室溫，加入300mL無水乙醚，冰浴下攪拌30min，過濾得15. 96g(89% )目 標(biāo)化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e) :295[M+H]+。
[0040] 2)制備 Boc_Trp-Trp-〇Bzl
[0041] 先后將 3. 344g(llmmol)Boc-L-Trp，1. 782g(13. 2mmol)N-羥基苯駢三氮唑（HOBt) 和2. 719g(13. 2mmol)N，N-二環(huán)己基碳二亞胺（DCC)加入250mL茄瓶中，冰浴下加入無水四 氫呋喃，攪拌30分鐘得到反應(yīng)液。2. 940g (10.0 mmol)色氨酸芐酯磷酸鹽用無水四氫呋喃溶 解，用N-甲基嗎啉（NMM)調(diào)pH至8,加入剛剛得到的反應(yīng)液中，用N-甲基嗎啉調(diào)節(jié)pH至 9,0°C攪拌6小時，室溫攪拌6小時，TLC監(jiān)測原料點消失結(jié)束反應(yīng)，反應(yīng)液減壓過濾，濾液 減壓濃縮，殘留物加乙酸乙酯溶解，冰浴下攪拌lh。減壓過濾，濾液依次用飽和NaHC03水溶 液，飽和NaCl水溶液，5 % KHS04水溶液，飽和NaCl水溶液，5 % NaHC03水溶液，飽和NaCl水 溶液萃洗，各萃洗重復(fù)3次。乙酸乙酯層用無水Na2S04干燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑， 殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化（石油醚：乙酸乙酯=3 : 1)，得4. 756g(82%)目標(biāo)化合物，為 無色固體。ESI-MS(m/e) :581[M+H]+。
[0042] 3)制備 HC1 · Trp-Trp-〇Bzl
[0043] 將4.000g(6mmol)Boc-Trp-Trp-0Bzl置于250mL茄瓶中，冰浴攪拌下緩慢向反 應(yīng)瓶中滴加50mL氯化氫的乙酸乙酯溶液（4M)，冰浴攪拌下反應(yīng)2小時后TLC監(jiān)測原料點 消失，終止反應(yīng)。攪拌下用水泵將反應(yīng)液減壓抽干，加乙酸乙酯溶解后再次用水泵減壓抽 干，重復(fù)三次。殘留物加無水乙醚充分混懸后靜置，傾倒出乙醚，抽干產(chǎn)物，重復(fù)三次，得 2.940g(95%)標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) :481[M+H]+。
[0044] 4)制備 Boc_Trp-Trp-Trp-〇Bzl
[0045] 按制備 Boc_Trp-Trp-〇Bzl 的方法，由 1. 824g(6mmol)Boc_Trp 和 2. 583g(5mmol) HC1 · Trp-L-Trp-〇Bzl 得 3. 14g(82% )目標(biāo)化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e)767[M+H] +。
[0046] 5)制備 HC1 · Trp-Trp-Trp-〇Bzl
[0047] 按制備 HC1 .Trp-Trp-OBzl 的方法，由 3. 14g(4. lmmol)Boc-Trp-Trp-Trp-〇Bzl 得 2.74g(95%)目標(biāo)化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) :667[M+H]+。
[0048] 實施例6制備1- (4-異丙基苯基）-β -咔啉-3-甲酰-Trp-Trp-Trp-〇Bzl (5)
[0049] 將 1. 19g(3. 6mmol) l-(4_ 異丙基苯基）-β -咔琳 _3_ 竣酸和 1. 629g(4. 3mmol) 苯并三氮唑四甲基脲六氟磷酸鹽（HBTU)加入250mL茄瓶中，冰浴下加入無水N，N-二甲基 甲酰胺，攪拌30分鐘，得到反應(yīng)液。2. 81g(4mmol)HCl · Trp-Trp-Trp-〇Bzl用無水二甲基 甲酰胺溶解，用N-甲基嗎啉（NMM)調(diào)pH至8,加入剛剛得到的反應(yīng)液中，用N-甲基嗎啉調(diào) 節(jié)pH至9,0°C攪拌6小時，室溫攪拌6小時，TLC顯示原料點消失，結(jié)束反應(yīng)。反應(yīng)液減壓 過濾，濾液減壓濃縮，殘留物用乙酸乙酯溶解，冰浴下攪拌lh，減壓過濾，濾液依次用飽和 NaHC03水溶液，飽和NaCl水溶液，5% KHS04水溶液，飽和NaCl水溶液，5% NaHC03水溶液， 飽和NaCl水溶液各洗3次。乙酸乙酯層用無水Na2S04干燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到的無 色固體經(jīng)硅膠柱層析純化（石油醚/丙酮=1 : 1)，得1.76g(45%)目標(biāo)化合物，為無色 固體。ESI-MS(m/e) :979[M+H]+。
[0050] 實施例7制備1- (4-異丙基苯基）-β -咔啉-3-甲酰-Trp-Trp-Trp (6)
[0051] 將 0· 98g (lmmol) 1_ (4_ 異丙基苯基）-β -咔琳 _3_ 甲醜-Trp-Trp-Trp-〇Bzl 溶解 在甲醇中，冰浴下滴加氫氧化鈉水溶液（2M)至反應(yīng)體系pH為12,攪拌4h后原料完全消失。 反應(yīng)化合物用5% KHS04水溶液調(diào)節(jié)pH至中性，減壓濃縮，殘留物加入5mL蒸餾水溶解，溶 液用5% KHS04水溶液調(diào)節(jié)pH至4,用乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯層。減壓濃縮除去 溶劑，得8. 36g(95%)目標(biāo)化合物，為灰白色固體。ESI-MS(m/e) :889[M+H] +。
[0052] 實施例 8 制備 Leu-Asp (OBzl) -Val-OBzl
[0053] 1)制備 Boc-Asp (OBzl)-Val-OBzl
[0054] 按制備 Boc_Trp-Trp-〇bzl 的方法，由 2. 411g(7mmol)Boc_Asp (OBzl)和 3·556g(8·4mmol)TosH·Val-0Bzl得3·592g(94%)目標(biāo)物，為無色固體。ESI-MS(m/e):513. 5[M+H]+。
[0055] 2)制備 HC1 · Asp (OBzl)-Val-OBzl
[0056] 按制備 HC1 ·Τγρ_Τγρ-〇Βζ1 的方法，由 3. OOg (5mmol) Boc-Asp (OBzl)-Val-OBzl 得 2.47g(95%)標(biāo)題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e) :413.1[M+H]+。
[0057] 3)制備 Boc-Leu-Asp (OBzl)-Val-OBzl
[0058] 按制備 Boc_Trp-Trp-〇bzl 的方法，由 0· 508g(2mmol)Boc_Leu 和 0· 897g(2mmol) HCl.Asp(0Bzl)-Val_0Bzl 得 1.063g(85%)目標(biāo)化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e): 625. 3[M+H]+。
[0059] 4)制備 HC1 · Leu-Asp (OBzl)-Val-〇Bzl
[0060] 按制備 HC 1 · Tr p _Tr p-〇B z 1 的方法，由 1 · 2 5 1 g (2mmo 1) Boc-Leu_Asp(0Bzl)-Val-0Bzl 得 1.067g(95%)標(biāo)題化合物，為無色粉末。ESI-MS(m/e): 525. 3[M+H]+。
[0061] 實施例 9 制備 1- (4_ 異丙基苯基）-β -咔琳 _3_ 甲醜-Trp-Trp-Trp-Leu-Asp (OBz 1)-Val-OBzl (7)
[0062] 按制備 Boc_Trp-Trp-〇bzl 的方法，由 0· 627g(0· 7mmol) 1-(4-異丙基苯 基）-β -咔啉-3-甲酉先-Trp-Trp-Trp 和 0· 413g (0· 7mmo1) HC1 · Leu-Asp (OBzl)-Val-〇Bzl 得 0.438g(44.4%)目標(biāo)化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) :1396.7[M+H] +。
[0063] 實施例 10制備 1_(4_異丙基苯基）_β -咔琳_3_ 甲醜-Trp-Trp-Trp-Leu-Asp-Val (8)
[0064] 稱 0· 500g(0· 4mmo 1) 1_(4_ 異丙基苯基）-β -咔琳 _3_ 甲醜-Trp-Trp-Trp-Leu -Asp(0Bzl)-Val-0BZl，用10mL甲醇溶解，加入0. 196g鈀碳，插入氫解套管并連接三通， 一端連接氫氣袋，另一端連接水泵，打開水泵，抽除體系中的空氣，調(diào)節(jié)三通活塞使體系 只連通氫氣袋，通入氫氣；重復(fù)抽氣-通氣操作三次，然后調(diào)節(jié)三通活塞使體系只連通氫 氣袋，向體系持續(xù)通入氫氣，室溫下攪拌。TLC顯示原料消失，拆除氫解裝置，反應(yīng)液減壓 過濾，濾液減壓濃縮至干，得〇.457g(94.0%)目標(biāo)化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e):1216. 6[M+H]+. mp :164.9-166