一種新的檸檬苦素類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從干燥的川楝子中分離得到的一種檸檬苦素 類化合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 川楝子（又名金鈴子）為楝科植物川楝MeliatoosendanSieb.etZucc.的干燥 成熟果實，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，冬季果實成熟時采收，為傳統(tǒng)理氣、驅(qū)蟲藥，廣泛分布于四 川、湖南、湖北、貴州等地，以四川的產(chǎn)者最為上乘，故名為川楝子。其味微苦，有小毒，具有 疏肝泄熱、行氣止痛、殺蟲等功效，適用于肝郁化火、胸脅、脘腹脹痛、疝氣疼痛、蟲積腹痛等 癥，臨床上具有較為廣泛的應(yīng)用。
[0003] 據(jù)研究報道，川楝子中含有多種化學(xué)成分，主要包括砲類、揮發(fā)油、朽1檬苦素、黃 酮、脂肪酸、酚酸類和多糖等化合物。其中三萜類成分川楝素為楝屬植物的特征性成分，又 是川楝子的毒性成分和驅(qū)蟲的有效成分。川楝子揮發(fā)油的主要成分包括飽和有機酸、醇類、 醛酮類、酯類，其炮制品的揮發(fā)油成分相對于生品明顯減少，而飽和有機酸的相對含量明顯 增加。
[0004] 川楝子作為傳統(tǒng)中藥臨床應(yīng)用十分廣泛，目前國內(nèi)外對其藥理作用的研究主要集 中在楝烷型三萜及檸檬苦素類化合物。研究表明川楝子具有驅(qū)蛔殺蟲、抗腫瘤、抗病毒、呼 吸抑制、抗氧化、抑制破骨細胞、鎮(zhèn)痛等作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從干燥的川楝子中分離得到的一種檸檬苦素類化合物， 含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I):
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：(a)將干燥的川楝子粉碎， 用80~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽 和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟（a) 中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個柱體積，再用75%乙醇洗脫8個柱體 積，收集75 %洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟（b)中75 %乙醇洗脫濃縮 物用正相硅膠分離，依次用體積比為65:1、30:1、15:1和8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得 到4個組分；（d)步驟（c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為15:1、8:1和 5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0010] 進一步地，步驟（a)中，用85%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0011] 進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0012] 藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的載體。
[0013] 所述的化合物（I)在制備治療急性T淋巴細胞白血病的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療急性T淋巴細胞白血病的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物（I)計算E⑶和實驗E⑶圖。
【具體實施方式】
[0020] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0021] 主要材料、試劑來源及儀器類型：
[0022] 乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學(xué)試劑有限 公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023] 實施例1 :化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0024] (a)將干燥的川楝子（8kg)粉碎，用85%乙醇熱回流提?。?0LX3次），合并提取 液，濃縮至無醇味（6L)，依次用石油醚（6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正丁醇 (6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（375g)和正丁醇萃取物；(b)步 驟（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔樹脂除雜，先用5 %乙醇洗脫6個柱體積，再用75% 乙醇洗脫8個柱體積，收集75%洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫濃縮物（129g) ;(c)步驟 (b)中75%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為65:1 (8個柱體積）、30:1 (8 個柱體積）、15:1 (8個柱體積）和8:1 (10個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個 組分；（d)步驟（c)中組分4(27g)用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為12:1(8個柱體 積）、8:1 (10個柱體積）和5:1 (8個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e) 步驟（d)中組分2(15g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲 醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I) (40mg) 〇
[0025]結(jié)構(gòu)確證：HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z 621. 2306,結(jié)合核磁特征可得分子式 為C32H3S0n，不飽和度為14。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)SH(ppm，DMS0-d6,400MHz) :H-3(5.04, s)， Η-5 (3· 18, dd，J = 7· 6, 5· 7)，Η-6 (2· 38, dd，J = 16. 5, 5· 7)，Η-6 (2· 27, dd，J = 16. 5, 7· 6)， Η-11(3· 16, m)，Η-12 (1.89, d，J = 15.3)，Η-12 (2.30, d，J = 15.3)，Η-14 (1.54, dd，J = 12. 5,7· 0)，Η-15(2· 66, dd，J = 18. 6,7· 0)，Η-15(3· 51，dd，J = 18. 6,12. 5)，Η-17(4· 89， s)，Η-18 (0· 98, s)，Η-19 (0· 93, s)，Η-21 (7· 21，s)，Η-22 (6· 07, s)，Η-23 (7· 29, t，J = 1· 6)， Η-28 (0· 83, s)，Η-29 (0· 75, s)，Η-30 (3· 33, s)，Η-3'（6· 97, q，J = 7· 1)，Η-4'（1· 84, d，J =7· 1)，Η-5'（1.87, s)，7-0CH3(3.64, s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)Sc(ppm，DMS0-d6，100MHz): 208. 1 (C，1-C)，77. 7 (C，2-C)，84. 2 (CH，3-C)，38. 7 (C，4-C)，42. 3 (CH，5-C)，31. 1 (CH2,6-C)， 172. 7(C，7-C)，61. 0(C，8-C)，61. 6(C，9-C)，49. 9(C，10-C)，55. 7(CH，11-C)，26. 8(CH2， 12-C)，33. 5 (C，13-C)，38. 8 (CH，14-C)，28. 2 (CH2,15-C)，168. 3 (C，16-C)，82. 1 (CH，17-C)， 22. 6 (CH3,18-C)，16. 1 (CH3,19-C)，121. 1 (C，20-C)，140. 0 (CH，2卜C)，108. 5 (CH，22-C)， 143. 1 (CH，23-C)，23. 2 (CH3, 28-C)，20. 1 (CH3, 29-C)，64. 0 (CH，30-C)，166. 1 (C，Γ -C)， 127.2(C，2' -C)，139. 1(CH，3' -C)，14.2(CH3,4' -C)，12.3(CH3,5' -C)，52. 1(CH3,7-0CH3); 碳原子標記參見圖1。紅外光譜顯示該化合物含有羥基和羰基基團（3437cm1和1726cm4。 13CNMR和DEPT譜共顯示32個碳信號，包括七個甲基（一個甲氧基），三個亞甲基，十個 次甲基（四個烯烴碳，四個含氧碳），以及十二個季碳（三個含氧季碳，四個羰基碳，兩個 烯烴碳）。此外，該化合物含有一個典型的β取代呋喃環(huán)（δΗ7. 21，s，lH;6. 07,s，lH和 7.29，t，J= 1.6 ;δ(：121· 1，140·0，108·5 和 143. 1)，一個酮羰基（SC208. 1)和三個酯羰基 (δC172. 7,168. 3和166. 1)。4和13CNMR數(shù)據(jù)的分析表明該化合物為檸檬苦素類化合物。 兩個碳信號（δC77. 7, 2-C;64· 0, 30-C)以及質(zhì)子信號（δH3. 33,s，H-30)表明該化合物含 有一個30, 2-環(huán)氧基團。此外，另兩個含氧碳信號（δC61. 6,9-C;55. 7,11-C)以及質(zhì)子信號 (δΗ3· 16，m，H-ll)表明該化合物還含有一個9, 11-環(huán)氧基團。HMBC譜中，Η3-19(δΗ0·93， s)和Η-30與C-1 (δC208. 1)的相關(guān)性表明C-1為酮羰基。此外，-0CH3(δΗ3. 64,s)與 C-7 (δC172. 7)，Η2-6 (δΗ2· 38,dd，J= 16. 5, 5. 7Hz和 2. 27,dd，J= 16. 5, 7. 6Hz)與 C-5(δC42. 3)和C-7的相關(guān)性表明C-6(δC31. 1)連有一個甲氧羰基片段。根據(jù)HMBC譜中 H-17 (4. 89,s)與C-20 (δC121. 1)，C-21 (δC140. 0)和C-22 (δC108. 5)的相關(guān)性，可推斷 呋喃環(huán)位于C-17 (δC82. 1)位上。此外，C-3 (δC84. 2)位上連有一個巴豆酰氧基；HMBC譜 中，Η-3'（δ冊·町，q，J=7·1Hz)和Η_3(δH5· 04,s)與C-Γ(δCl66· 1)的相關(guān)性驗證