凝膠微球掃描電鏡照片； 圖4是本發(fā)明實(shí)施例4還原前凝膠微球掃描電鏡照片； 圖5是本發(fā)明實(shí)施例7還原前凝膠微球掃描電鏡照片。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合附圖和【具體實(shí)施方式】，對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0019] 實(shí)施例1 該基于葡聚糖的水凝膠微球，其結(jié)構(gòu)式可表示如下：
[0020] 該上述的基于葡聚糖的水凝膠微球的制備方法，其具體步驟包括如下： (1) 醛基化葡聚糖的制備 將5. 0g葡聚糖(葡聚糖T10,分子量為10000g/m〇l)在室溫下按照固液比為10 :100g/ml溶解在水中，然后置于冰水浴中按照糖單元/104摩爾比為1:1加入高碘酸鈉獲得混合 液，將混合液在室溫、避光條件下攪拌反應(yīng)4h，獲得的溶液用再生纖維素透析袋(截留分子 量為5kD)在去離子水中透析2~3天，透析過程中每3~5h換一次去離子水，透析完成后冷 凍干燥得到醛基化程度為60%的部分醛基化葡聚糖固體(即每100個(gè)糖單元中有60個(gè)被氧 化）； (2) 葡聚糖水凝膠微球的制備 將步驟（1)得到的0. 15g部分醛基化葡聚糖固體溶于1.OmL去離子水中得到濃度為 150mg/mL的醛基化葡聚糖水溶液，在室溫下，將醛基化葡聚糖水溶液加入溶解了乳化劑的 環(huán)己烷溶液中，劇烈攪拌15min乳化形成反相微乳液，然后加入胺類交聯(lián)劑攪拌12h，最后 通過離心（1500rpm，5min)收集沉淀物，沉淀物經(jīng)乙醇清洗5~6次后得到化學(xué)交聯(lián)型葡聚糖 水凝膠微球，分散于2.OmL去離子水中保存，該化學(xué)交聯(lián)型葡聚糖水凝膠微球通過真空干 燥獲得淡黃色固體粉末，其紅外光譜如圖1 (a)所示；采用掃描電子顯微鏡對獲得的凝膠微 球的形貌進(jìn)行了觀察，結(jié)果如圖2所示：該條件下獲得的葡聚糖凝膠微球具有規(guī)整的球形 結(jié)構(gòu)，微球表面光滑，粒徑分布在30~90μm之間；其中環(huán)己烷用量為8.OmL，醛基化葡聚糖 水溶液與環(huán)己燒體積比為1 :8,乳化劑為Span80,加入量為2. 0g(乳化劑的加入量為環(huán)己燒 溶液質(zhì)量的32%)，攪拌為機(jī)械攪拌；其中胺類交聯(lián)劑為乙二胺，加入量為按照部分醛基化 葡聚糖中醛基與胺類交聯(lián)劑中氨基的摩爾比為2:1加入(約18μL); (3) 葡聚糖水凝膠微球的還原 向步驟（2)得到分散于去離子水中的化學(xué)交聯(lián)型葡聚糖水凝膠微球中加入50mg硼氫 化鈉(硼氫化鈉與葡聚糖水凝膠微球中C=N雙鍵的摩爾比約為2. 5:1 )，在室溫下攪拌24h， 最后通過離心（1500rpm，5min)收集沉淀物，沉淀物經(jīng)去離子水清洗5~6次后得到還原后的 葡聚糖水凝膠微球，分散于2.OmL去離子水中保存。還原后的葡聚糖水凝膠微球通過真空 干燥后獲得白色固體粉末，其紅外光譜如圖1 (b)所示。
[0021] 實(shí)施例2 該基于葡聚糖的水凝膠微球，其結(jié)構(gòu)式可表示如下：
[0022] 該上述的基于葡聚糖的水凝膠微球的制備方法，其具體步驟包括如下： (1) 醛基化葡聚糖的制備 將5. 0g葡聚糖(葡聚糖T40,分子量為40000g/mol)在室溫下按照固液比為10 :100g/ml溶解在水中，然后置于冰水浴中按照糖單元/104摩爾比為1:1加入高碘酸鈉獲得混合 液，將混合液在室溫、避光條件下攪拌反應(yīng)4h，獲得的溶液用再生纖維素透析袋(截留分子 量為7kD)在去離子水中透析2~3天，透析過程中每3~5h換一次去離子水，透析完成后冷 凍干燥得到醛基化程度為60%的部分醛基化葡聚糖固體(即每100個(gè)糖單元中有60個(gè)被氧 化）； (2) 葡聚糖水凝膠微球的制備 將步驟（1)得到的0. 15g部分醛基化葡聚糖固體溶于1.OmL去離子水中得到濃度為 150mg/mL的醛基化葡聚糖水溶液，在室溫下，將醛基化葡聚糖水溶液加入溶解了乳化劑的 環(huán)己烷溶液中，劇烈攪拌15min乳化形成反相微乳液，然后加入胺類交聯(lián)劑攪拌12h，最后 通過離心（3000rpm，5min)收集沉淀物，沉淀物經(jīng)乙醇清洗5~6次后得到化學(xué)交聯(lián)型葡聚糖 水凝膠微球，分散于2. 0ml去離子水中保存，采用掃描電子顯微鏡對獲得的凝膠微球的形 貌進(jìn)行了觀察，結(jié)果如圖3所示：該條件下獲得的葡聚糖凝膠微球具有規(guī)整的球形結(jié)構(gòu)，微 球表面光滑，粒徑分布在10~50μm之間；其中環(huán)己烷用量為8.OmL，醛基化葡聚糖水溶液與 環(huán)己燒體積比為1 :8,乳化劑為Span80/Tween80的復(fù)配劑，加入量Span80為2. 0g，Tween80 為0. 2g(乳化劑的加入量為環(huán)己烷質(zhì)量的35%)，攪拌為機(jī)械攪拌；其中胺類交聯(lián)劑為乙二 胺，加入量為按照部分醛基化葡聚糖中醛基與胺類交聯(lián)劑中氨基的摩爾比為2:1加入(約 18yL)； (3) 葡聚糖水凝膠微球的還原 向步驟（2)得到分散于去離子水中的化學(xué)交聯(lián)型葡聚糖水凝膠微球中加入50mg硼氫 化鈉(硼氫化鈉與化學(xué)交聯(lián)型葡聚糖水凝膠微球中C=N雙鍵的摩爾比為2. 5:1 )，在室溫下 攪拌24h，最后通過離心（3000rpm，5min)收集沉淀物，沉淀物經(jīng)去離子水清洗5~6次后得到 還原后的葡聚糖水凝膠微球，分散于2.OmL去離子水中保存。還原后的葡聚糖水凝膠微球 分散于一系列不同pH的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液中，對其穩(wěn)定性進(jìn)行了觀察，結(jié)果如表 1所示：在pH> 4. 0環(huán)境條件下，葡聚糖凝膠微球在水溶液中具有良好的穩(wěn)定性，當(dāng)溶液pH < 4. 0時(shí)，葡聚糖凝膠微球結(jié)構(gòu)被破壞，穩(wěn)定性較差。
[0023] 表 1 實(shí)施例3
該基于葡聚糖的水凝膠微球，其結(jié)構(gòu)式可表示如下：
[0024] 該上述的基于葡聚糖的水凝膠微球的制備方法，其具體步驟包括如下： (1) 醛基化葡聚糖的制備 將5. 0g葡聚糖(葡聚糖T70,分子量為70000g/mol)在室溫下按照固液比為10 :100g/ml溶解在水中，然后置于冰水浴中按照糖單元/104摩爾比為1:1加入高碘酸鈉獲得混合 液，將混合液在室溫、避光條件下攪拌反應(yīng)4h，將攪拌后的溶液用再生纖維素透析袋(截留 分子量為7kD)在去離子水中透析2~3天，透析過程中每3~5h換一次去離子水，透析完成后 冷凍干燥得到醛基化程度為60%的部分醛基化葡聚糖固體(即每100個(gè)糖單元中有60個(gè)被 氧化）； (2) 葡聚糖水凝膠微球的制備 將步驟（1)得到的0.lg部分醛基化葡聚糖固體溶于l.OmL去離子水中得到濃度為 100mg/mL的醛基化葡聚糖水溶液，在室溫下，將醛基化葡聚糖水溶液加入溶解了乳化劑的 環(huán)己烷溶液中，劇烈攪拌15min乳化形成反相微乳液，然后加入胺類交聯(lián)劑攪拌12h，最后 通過離心（3000rpm，5min)收集沉淀物，沉淀物經(jīng)乙醇清洗5~6次后得到化學(xué)交聯(lián)型葡聚 糖水凝膠微球，分散于2. 0ml去離子水中保存；其中環(huán)己烷用量為8.OmL，醛基化葡聚糖水 溶液與環(huán)己烷體積比為1 :8,乳化劑為Span80/Tween80的復(fù)配劑，加入量Span80為2. 0g， Tween80為0. 4g(乳化劑的加入量為環(huán)己烷溶液質(zhì)量的38%)，攪拌為機(jī)械攪拌；其中胺類 交聯(lián)劑為乙二胺，加入量為按照部分醛基化葡聚糖中醛基與胺類交聯(lián)劑中氨基的摩爾比為 2:1 加入(約 12μL); (3) 葡聚糖水凝膠微球的還原 向步驟（2)得到分散于去離子水中的化學(xué)交聯(lián)型葡聚糖水凝膠微球中加入50mg硼氫 化鈉(硼氫化鈉與化學(xué)交聯(lián)型葡聚糖水凝膠微球中C=N雙鍵的摩爾比約為4:1)，在室溫下 攪拌24h，最后通過離心（3000rpm，5min)收集沉淀物，沉淀物經(jīng)去離子水清洗5~6次后得到 還原后的葡聚糖水凝膠微球，分散于2.OmL去離子水中保存。
[0025] 實(shí)施例4 該基于葡聚糖的水凝膠微球，其結(jié)構(gòu)式可表示如下：
[0026] 該上述的基于葡聚糖的水凝膠微球的制備方法，其具體步驟包括如下： (1) 醛基化葡聚糖的制備 將5.