一種酶解豬血聯(lián)產(chǎn)蛋白肽和血紅素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及蛋白肽和血紅素的制備方法,具體涉及一種酶解豬血聯(lián)產(chǎn)蛋白肽和血紅素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前國內(nèi)豬血資源非常豐富,但有效利用率并不高,除少數(shù)食用或噴霧干燥為血球血漿蛋白粉、血球蛋白粉外,多數(shù)被排放入周圍環(huán)境中,產(chǎn)生極大污染。因此,豬血的有效利用仍亟待開發(fā)。
[0003]現(xiàn)有技術(shù)中豬血球的開發(fā)技術(shù)主要圍繞利用豬血球單一生產(chǎn)蛋白肽或者血紅素開展,原料利用率不高,也有部分研究是關(guān)于聯(lián)產(chǎn)血紅素和蛋白肽,但由于其用酶較為單一,酶解不充分,且對分離血球肽和血紅素的條件研究不透徹,使得目前采用酶法聯(lián)產(chǎn)血球肽和血紅素收率比較低,且所得蛋白肽含苦味肽較多,使得產(chǎn)品苦澀味較重,動物適口性較差。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的在于:提供一種以豬血球為原料制備蛋白肽產(chǎn)品,同時聯(lián)產(chǎn)血紅素粗品的方法。
[0005]為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
[0006]—種酶解豬血聯(lián)產(chǎn)蛋白肽和血紅素的方法,包括如下步驟:以屠宰場豬血離心所得血球為原料,依次經(jīng)過加入蒸餾水稀釋溶血、沸水變性,蛋白酶酶解、滅酶、板框壓濾、調(diào)節(jié)pH、離心,離心后的沉淀干燥即得血紅素;離心后的上清液經(jīng)過超濾和納濾膜濃縮脫鹽、真空濃縮、噴霧干燥得豬血蛋白肽。
[0007]優(yōu)選地,所述的酶解豬血聯(lián)產(chǎn)蛋白肽和血紅素的方法,具體步驟如下:
[0008]1)血球預(yù)處理
[0009]取管式離心機(jī)離心所得血球液,先加入1-1.5倍體積的蒸餾水,攪拌溶血2-10h ;然后再加入1倍體積的沸水?dāng)嚢枞苎?0-60min ;
[0010]2)酶解
[0011]預(yù)處理后的血球稀釋液測定pH在7-7.5之間,直接加熱至50-55°C,然后依次加入堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶進(jìn)行酶解反應(yīng);
[0012]3)滅酶
[0013]酶解完成后,將酶解液加熱至83-87°C,保溫處理18-22min,滅活蛋白酶;
[0014]4)板框壓濾
[0015]滅酶后的酶解液降溫至45_50°C,導(dǎo)入板框壓濾機(jī)壓濾后,得到清液和濾渣,濾渣烘干后作為進(jìn)一步提取血紅素的原料;
[0016]5)調(diào)節(jié)pH和離心
[0017]上述壓濾所得濾液用6M HC1調(diào)節(jié)pH至2.75-3之間,4000rpm離心15_30min,得到上清液和沉淀,沉淀干燥即得血紅素;
[0018]6)膜濃縮
[0019]上述步驟離心所得上清液使用超濾和納濾設(shè)備脫除未酶解蛋白及大分子肽類以及部分水分、鹽分,濃縮脫水0.8-1.2倍;
[0020]7)三效真空濃縮
[0021]膜濃縮所得濃縮液經(jīng)三效真空濃縮設(shè)備處理后使其固含達(dá)35% -45%。
[0022]8)噴霧干燥
[0023]上述步驟所得蛋白肽濃縮液經(jīng)噴霧干燥即得到豬血球蛋白肽。
[0024]優(yōu)選地,步驟2)中酶解的具體過程如下:預(yù)處理后的血球稀釋液測定pH在7-7.5之間,直接加熱至50-55°C,然后按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1-2 %的比例加入2709堿性蛋白酶,酶解2-4h,然后按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1-2%的比例加入1398中性蛋白酶酶解l-2h,接著加入按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5-1%的比例加入木瓜蛋白酶反應(yīng)l-2h,最后按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5-1 %的比例加入風(fēng)味蛋白酶,反應(yīng)l_2h。
[0025]本發(fā)明的有益效果在于:
[0026]1、本發(fā)明通過內(nèi)切酶與外切酶的合理組合、壓濾工段的改進(jìn)、血紅素和蛋白肽分離pH的重新確定使得酶解更加徹底,血紅素和蛋白肽收率大幅提高,蛋白肽收率達(dá)90%以上,且苦澀味明顯減輕,血紅素純度顯著提高。
[0027]2、本發(fā)明采用豬血為原料,降低了生產(chǎn)成本,提高了豬血的利用率,消除了豬血向環(huán)境排放所帶來的污染.
[0028]3、按照本發(fā)明的方法制備得到的蛋白肽為淡黃色或乳白色粉末,無苦澀味、無血腥味,溶解性極佳,含有大量的游離氨基酸和小肽,其中含有的肽類分子量大多數(shù)在10000以下,可在動物消化道內(nèi)直接吸收,提高了蛋白在動物體內(nèi)的吸收利用率,且小肽中部分活性肽可在不同程度上增強(qiáng)動物的生產(chǎn)性能和免疫力,是飼料行業(yè)潛在的優(yōu)良營養(yǎng)添加劑。同時本發(fā)明得到的血紅素的純度在90%以上,可用作血紅素精制用原料。
【附圖說明】
[0029]圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0030]實施實例1:
[0031]1)血球預(yù)處理
[0032]取管式離心機(jī)離心所得血球液1050kg,加入1250kg蒸餾水,攪拌溶血4h ;然后再加入1050kg沸水?dāng)嚢?0min ;
[0033]2)酶解
[0034]預(yù)處理后的血球稀釋液測定pH為7.15,加熱至54°C,按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2 %的比例加入2709堿性蛋白酶,酶解4h,然后按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1 %的比例加入1398中性蛋白酶酶解2h,接著按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%的比例加入木瓜蛋白酶反應(yīng)2h,最后按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%的比例加入風(fēng)味蛋白酶,反應(yīng)2h ;
[0035]3)滅酶
[0036]酶解完成后,將酶解液加熱至85°C,保溫處理20min,滅活蛋白酶;
[0037]4)板框壓濾
[0038]滅酶后的酶解液降溫至48°C后,導(dǎo)入板框壓濾機(jī)壓濾后,得到清液和濾渣;
[0039]5)調(diào)節(jié)pH和離心
[0040]上述壓濾所得濾液用6M HC1調(diào)節(jié)pH至2.86,4000rpm離心15min,得到上清液和沉淀,沉淀干燥即得高純度血紅素;
[0041 ] 6)膜濃縮
[0042]上述步驟離心所得上清液使用超濾和納濾設(shè)備脫除未酶解蛋白及大分子肽類以及部分水分、鹽分,濃縮脫水1.18倍;
[0043]7)真空濃縮
[0044]膜濃縮所得濃縮液經(jīng)三效真空濃縮設(shè)備處理后使其固含達(dá)43.8%。
[0045]8)噴霧干燥
[0046]上述步驟所得濃縮液經(jīng)噴霧干燥即得到豬血球蛋白肽。
[0047]實施實例2:
[0048]1)血球預(yù)處理
[0049]取管式離心機(jī)離心所得血球液1000kg,加入1000kg蒸餾水,攪拌溶血10h ;然后再加入1000kg沸水?dāng)嚢枞苎?0min ;
[0050]2)酶解
[0051 ] 預(yù)處理后的血球稀釋液測定pH為7.43,直接加熱至55°C,按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2 %的比例加入2709堿性蛋白酶,酶解4h,然后按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2 %的比例加入1398中性蛋白酶酶解2h,接著按照占原血球液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1 %的比例加入木瓜蛋